摘要: ［摘要］目的　建立一种经济、稳定可靠的HSC分离方法，为体外研究提供细胞模型．方法　Hanks液在体灌洗大鼠肝脏，离体后用Ⅳ胶原酶、链蛋白酶、DNaseI消化肝脏，12% Nycodenz连续梯度液分离大鼠HSC，计数细胞得率，0.2%台盼蓝染色计算细胞活率．自发荧光、Desmin、α-SMA免疫荧光染色对HSC进行鉴定和纯度分析．结果　分离HSC得率（3.7±0.6）×107/只大鼠，细胞活率＞90%，分离第1天自发荧光和第3天desmin 染色阳性细胞＞90%．HSC随着体外培养形态明显改变，分离培养7 d后α-SMA阳性细胞>90%，培养14 d或传代后＞95%．结论　肝脏离体后消化能达到在体消化同样的效果，应用Nycodenz密度分离介质可获得满意的HSC得率和纯度