留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

HPLC指纹图谱联合化学计量学在不同产地云木香药材鉴别中的应用

卢敏南 杨学芳 邓菊庆 胡月新 李璠 吴林雄 孔灿 吴怡

卢敏南, 杨学芳, 邓菊庆, 胡月新, 李璠, 吴林雄, 孔灿, 吴怡. HPLC指纹图谱联合化学计量学在不同产地云木香药材鉴别中的应用[J]. 昆明医科大学学报, 2017, 38(10): 16-21.
引用本文: 卢敏南, 杨学芳, 邓菊庆, 胡月新, 李璠, 吴林雄, 孔灿, 吴怡. HPLC指纹图谱联合化学计量学在不同产地云木香药材鉴别中的应用[J]. 昆明医科大学学报, 2017, 38(10): 16-21.
Linlin XUE, Binghan LI, Chunyun LIU, Weikun LI, Lixian CHANG, Huimin LI, Yanwei QI, Li LIU. Establishment and Evaluation of a Nomogram for Predicting Potential Death in Patients with Hepatitis C Cirrhosis and Sepsis in General Wards[J]. Journal of Kunming Medical University, 2023, 44(6): 113-119. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230630
Citation: Lu Min Nan , Yang Xue Fang , Deng Ju Qing , Hu Yue Xin , Li Fan, Wu Lin Xiong , Kong Can , Wu Yi . Identification of Radix Saussureae lappae from Different Habitats by HPLC Fingerprints Combined with Chemometrics[J]. Journal of Kunming Medical University, 2017, 38(10): 16-21.

HPLC指纹图谱联合化学计量学在不同产地云木香药材鉴别中的应用

基金项目: 

基金: 云南省教育厅科学研究基金资助项目 (2013C246); 昆明医科大学教研教改课题 (2017-JY-Y-004);

Identification of Radix Saussureae lappae from Different Habitats by HPLC Fingerprints Combined with Chemometrics

Funds: 

基金: 云南省教育厅科学研究基金资助项目 (2013C246); 昆明医科大学教研教改课题 (2017-JY-Y-004);

  • 摘要: 目的 应用高效液相色谱法检测云木香药材指纹图谱, 采用多种化学计量学方法分析, 以鉴别不同产地云木香药材.方法 采用反相高效液相色谱法, 乙腈-水为流动相梯度程序洗脱, 流速1.0 m L/min, 检测波长254 nm, 检测云木香药材的HPLC图谱;结合相似度计算、系统聚类分析、主成分分析等方法分析指纹图谱, 对不同产地云木香进行鉴别.结果 该方法可使云木香中各成分得到较好的分离;根据检测结果确定了18个共有指纹峰, 建立了云木香药材指纹图谱的共有模式, 15个不同来源的云木香有一定相似度;但不同产地云木香药材样品的指纹图谱通过化学计量学分析, 发现存在较大差异.结论 该HPLC指纹图谱重复性好, 特异性高.HPLC指纹图谱联合化学计量学可鉴别不同产地云木香药材, 为云木香药材质量控制提供依据, 并为云木香药材资源合理开发利用提供参考.
  • 第5跖骨近端骨折在临床上是足部最常见的损伤,占足部骨折的61%~78%[1]。其治疗主要取决于骨折的解剖位置,而对于第5跖骨近端的分类主要包括Stewart及Lawrence and Botte分类,前者将其分为粗隆骨折与琼斯骨折,而后者主要将第5跖骨近端骨折分为三区[2],2种分类中琼斯骨折与二区、三区骨折重叠[3],但二区骨折通常指的就是琼斯骨折。粗隆部骨折松质结节有丰富的血液供应,非手术治疗可取得良好愈合,但相对无血管的琼斯骨折最好的治疗方式是手术固定[4]。累及二区且有移位的,以及运动员或需求高的非移位骨折患者,手术目的是减少愈合时间和加速康复,三区骨折最好选择手术治疗,因为这些骨折容易发生延迟愈合和骨不连。而对于二、三区的内固定选择,有关文献证实了髓内钉是首选之一[5-6]

    选择2021年1月至2022年3月在云南中医药大学第一附属医院骨科就诊行足部正斜位片的患者,且选择既往无手术或第5跖骨损伤,无足部骨折、脱位或畸形的患者,拍摄的120例患者中男60例、女60例符合纳入标准[7]。本研究已通过医院伦理委员会审批。

    选择标准足部正斜位作为测量图像,见图1(正位)中第5跖骨髓腔直径内侧线以第5跖骨基底部与骰骨组成的跖跗关节缘尖端为起点,做一条至第5跖骨干内侧髓腔皮质弯曲部的直线A,再从第5跖骨干外侧髓腔皮质弯曲点为起点,引出一条平行A至第5跖骨基底部的直线B,测量2条直线间的垂直距离作为第5跖骨髓腔直径(a)。在正位片上从第5跖骨干弯曲点外侧皮质做一平行于B至第5跖骨基底部的直线C,此条长度为髓内钉长度(c)。再从第5跖骨基底部外侧做一条平行于c至第5跖骨头关节面的直线D,此长度为第5跖骨长度(d)。图2(斜位)中第5跖骨髓腔直径内侧线以5跖骨基底部内侧尖端为起点,同图1做两平行线E、F,测量2条直线间的垂直距离为斜位髓腔直径(b),上述具体字母标识见图1图2

    图  1  正位第5跖骨髓腔直径、髓内钉长度、第5跖骨长度测量
    A:第5跖骨髓腔直径内侧线;B:第5跖骨髓腔直径外侧线;C:髓内钉长度线;D:第5跖骨长度线。
    Figure  1.  Measurement of the diameter of the medullary cavity,the length of intramedullary nail and the length of the fifth metatarsal bone
    图  2  斜位第 5 跖骨髓腔直径测量
    E:第5跖骨髓腔直径内侧线;F:第5跖骨髓腔直径外侧线。                      
    Figure  2.  Measurement of the diameter of the fifth metatarsal medullary cavity in oblique position

    采用SPSS26.0统计学软件包进行统计学分析,正态分布计量资料采用均数据±标准差、平均值、中位数、最大值、最小值、标准差表示,正态分布计量资料2组组间比较采用两独立样本t检验,相关性分析采用Pearson相关性分析,P < 0.05表示差异有统计学意义。

    正位上髓腔直径(a)平均值为4.15 mm,范围(2.24~5.64 mm),斜位上第5跖骨髓腔直径(b)平均值为4.31 mm,范围(3.18~5.81 mm),髓内钉长度(c)平均值为39.74 mm,范围(28.07~53.46 mm),第5跖骨长度(d)平均值71.64 mm,范围(59.73~85.44 mm),髓内钉长度与第5跖骨长度比值(e)平均值为55.48%,范围(41.12%~68.05%),见表1

    表  1  基础数据描述
    Table  1.  Description of basic data
    指标平均值中位数最大值最小值标准差
    年龄 43.79 40.00 79 19 16.40
    a(mm) 4.15 4.10 5.64 2.24 0.58
    b(mm) 4.31 4.26 5.81 3.18 0.69
    c(mm) 39.74 39.58 53.46 28.07 4.80
    d(mm) 71.64 71.42 85.44 59.73 5.78
    e(%) 55.48 55.07 68.05 41.12 5.10
      a:正位第5跖骨髓腔直径;b:斜位第5跖骨髓腔直径;c:髓内钉长度;d:第5跖骨长度;e:髓内钉长度与第5跖骨长度比值。
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    t检验证实男性与女性年龄差异无统计学意义(P > 0.05),男性和女性正斜位髓腔直径、第5跖骨长度、髓内钉长度,差异有统计学意义(P < 0.05),髓内钉长度与第5跖骨长度比值(e),差异无统计学意义(P > 0.05)。Pearson相关性分析:男性和女性d与e均无相关性(P > 0.05),见表2表3

    表  2  男性和女性各资料比较($ \bar x \pm s $
    Table  2.  Comparison of male and female data ($ \bar x \pm s $
    指标男性组女性组tP
    年龄 46.03 ± 17.92 41.55 ± 14.53 1.505 0.135
    a(mm) 4.31 ± 0.56 3.99 ± 0.56 3.082 0.003*
    b(mm) 4.46 ± 0.64 4.17 ± 0.50 2.717 0.008
    c(mm) 41.25 ± 4.64 38.23 ± 4.51 3.609 < 0.001*
    d(mm) 75.04 ± 4.68 68.23 ± 4.68 7.977 < 0.001*
    e(%) 54.95 ± 4.99 56.01 ± 5.30 −1.139 0.257
      a:正位第5跖骨髓腔直径;b:斜位第5跖骨髓腔直径;c:髓内钉长度;d:第5跖骨长度;e:髓内钉长度与第5跖骨长度比值。*P < 0.05。
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格
    表  3  男性和女性d与e相关性分析
    Table  3.  Correlation analysis of d and e between men and women
    性别rP
    0.030.799
    0.050.694
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    足外侧纵弓和横弓,是第5跖骨近端的重要组成部分,在足部生物力学中有重要作用,如足部力量的传导,及负重[8],而且腓骨短肌止点位于第5跖骨粗隆部,当足部重复性应力及外伤时容易造成骨折,若骨折累计二区、三区,因影响血液供应,容易造成骨折不愈合或延迟愈合[9]。因此选择良好内固定物与术式,对骨折愈合有巨大作用。Ryan等[10]在一项研究琼斯骨折外科技术中提到髓内螺钉固定仍是治疗选择的金标准,但有关金标准的提法并未取得共识。而且髓内螺钉固定也存在骨不连、再骨折等风险[11]。也有其更好的作用,经皮髓内螺钉对跖骨血供破坏较少,利于跖骨骨折愈合,而且切口在跖骨近端粗隆部,减少皮肤坏死等并发症,植入扩髓的腔隙增加了其稳定性,防止内固定的松动[12]

    此次研究根据120例患者的X片检测确定了第5跖骨的简要解剖结构,在笔者的研究人群中,第5跖骨的平均长度为71.64 mm,髓内钉长度的平均值为39.74 mm,髓内钉长度约占第5跖骨总长度的55.48%。髓腔平均值大小在正位上比斜位要小。Ochenjele等[7]在CT测量研究中发现40 mm螺钉长度已接近第5跖骨弯曲处,而在本次X片测量中髓内钉平均长度为39.74 mm,与本文献相映。因此在临床置钉中应该注意髓内钉的长度,钉道长度应该小于跖骨长度的55.48%,从而避免致内外侧皮质骨折。但是为了让骨折有良好的固定及稳定性,可以考虑选择更大的髓内钉直径。

    不足之处在于利用X线拍摄足部正斜位片,只能得到部分信息,若考虑存在跖跗关节损伤时,需拍摄跖跗关节正斜位[13]。本研究样本量相对较少,可能数据存在偏倚,且髓腔大小随着跖骨解剖而变化,利用计算机断层扫描和尸体标本测量髓腔大小可能会更接近真实值,尽管对大量就诊患者第5跖骨的解剖进行了详细的研究和分析,但每个患者都是独立个体,髓内钉的直径及长度应据个体的术前影像学检查确定[14]。另外所有测量的起点都在第5跖骨基底部尖端进行的,可能不能提供一致的髓内钉轨迹。而且这是一项放射学研究,测量结果需大量的临床实践进行验证,才能确定髓内钉的良好固定、稳定性,及减少并发症。总之,此研究结果有助于指导临床髓内钉直径和长度的选择。

  • [1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M]北京:科学出版社, 2004:058.
    [2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部[S].北京:中国医药科技出版社, 2010:57-58.
    [3]江苏新医学院.中药大辞典:上册[M].上海:上海科学技术出版社, 1979:353.
    [4]梁凤书, 高宏光.道地药材云木香不同产地的质量研究.云南中医中药杂志, 2005, 26 (6) :23.
    [5] 魏·吴普, 清·孙星衍, 孙冯冀辑.神农本草经[M].北京:人民卫生出版社, 1997:186.
    [6]王永兵, 王强, 毛福林, 等.木香的药效学研究[J].中国药科大学学报, 2001, 32 (2) :146-148.
    [7] [7]SINGH I P, TALWAR K K, ARORA J K, et a1.A biologically active guaianolide from Saussurea lappa[J].Phytochemistry, 1992, 31 (7) :2529-2531.
    [8] [8]TALWAR K K, SINGH I P, KALSI P S.A sesquiterpenoid with plant growth regulatory activity from Saussurea lappa[J].Phytochemistry, 1992, 31 (1) :336-338.
    [9]林明峡.木香的药理及临床研究概况[J].中医药信息, 2005, 22 (3) :18-19.
    [10]杨辉, 谢金伦, 孙汉董.云木香化学成分及药理作用研究概况[J].天然产物研究与开发, 1998, 10 (2) :90-98.
    [11]徐宇, 方鲁延, 谈红, 等.HPLC法测定木香中去氢木香内酯的含量[J].中草药, 2004, 35 (12) :1416-1417.
    [12]李力, 张振秋, 王冰, 等.木香药材HPLC指纹图谱的研究[J].中成药, 2011, 33 (6) :925-928.
    [13]梁晟, 梁逸曾, 李雅文, 等.木香挥发性化学成分的气相色谱-质谱分析[J].广州化学, 2007, 32 (4) :12.
    [14]侯鹏飞, 陈文星, 赵新慧, 等.木香挥发性成分气质联用分析及其抑制血小板聚集作用的研究[J].中国实验方剂学杂志, 2008, 14 (7) :26.
    [15]张兰胜, 杨志勇, 董光平, 等.云木香挥发油化学成分的研究[J].大理学院学报 (综合版) , 2007, 6 (12) :9.
    [16]邱琴, 崔兆杰, 刘廷礼, 等.GC/MS法测定木香挥发油化学成分[J].理化检验化学分册, 2001, 37 (8) :346.
    [17]陈飞龙, 谭晓梅, 汤庆发, 等.不同产地木香挥发油成分的GC-MS分析比较[J].中国药房, 2011, 22 (23) :2187-2189.
    [18]王瑾, 胡臻华.中药指纹图谱的研究概述[J].解放军药学学报, 2004, 20 (3) :214-216.
    [19]侯小平, 何新新, 苏薇薇.中药指纹图谱质量控制技术[J].中药材, 2002, 24 (5) :370-371.
  • [1] 肖金宝, 赵骏达, 马俊旗.  下调HPV16 E6/E7表达宫颈癌细胞Siha上清液代谢组学, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240104
    [2] 唐莹, 王国燕, 徐永超, 胡秋兰, 王艳娇.  2型糖尿病患者自助干预的证据图谱, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231115
    [3] 吴乐艳, 侯雯清, 孙孔春, 杨璨瑜, 舒纹, 沈报春.  反相高效液相色谱法测定神经酸片剂中神经酸含量, 昆明医科大学学报.
    [4] 赵江, 邹颜秋硕, 闵向东, 蔡同建, 韩兴孟, 杨祖顺, 刘志涛.  云南省食源性沙门菌血清分型及脉冲场凝胶电泳的指纹图谱, 昆明医科大学学报.
    [5] 朱胜章.  宫颈液基细胞学检查在贵州黔南地区宫颈癌筛查中的临床运用, 昆明医科大学学报.
    [6] 王应霞.  液基细胞学检测在良恶性胸腹水鉴别诊断中的应用, 昆明医科大学学报.
    [7] 杨正浩.  细胞DNA定量分析法和液基薄层细胞学检测技术在宫颈癌早期诊断中的应用对比, 昆明医科大学学报.
    [8] 李继印.  液相色谱-质谱法测定云南草乌中双酯型生物碱的含量, 昆明医科大学学报.
    [9] 李继印.  液相色谱-质谱法测定大鼠全血中3种CYP450探针药物, 昆明医科大学学报.
    [10] 王海垠.  大黄藤化学成分研究, 昆明医科大学学报.
    [11] 孙虹.  高效液相色谱法与酶法检测糖化血红蛋白结果一致性的比较, 昆明医科大学学报.
    [12] 刘旭红.  6 MV与10 MV-X线在非小细胞肺癌中的计量学比较, 昆明医科大学学报.
    [13] 韩迪.  超高效液相色谱串联质谱法检测鸡肉中5种雌激素残留, 昆明医科大学学报.
    [14] 王蕾.  翠柏的化学成分研究, 昆明医科大学学报.
    [15] 仇晓春.  2000年至2012年MEDLINE收录我国生物医学论文计量学分析, 昆明医科大学学报.
    [16] 郑巧玲.  高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度, 昆明医科大学学报.
    [17] 冷红琼.  云南产葛根HPLC指纹图谱研究, 昆明医科大学学报.
    [18] 赵春梅.  HPLC法测定大鼠血浆中甲硝唑的浓度, 昆明医科大学学报.
    [19] 苏新民.  高效液相色谱法测定清脑降压片中黄芩苷的含量, 昆明医科大学学报.
    [20] 屈燕.  《昆明医学院学报》2002年至2006年载文及计量学分析, 昆明医科大学学报.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  1587
  • HTML全文浏览量:  565
  • PDF下载量:  183
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2017-05-06

目录

/

返回文章
返回