摘要: 目的筛选用慢病毒转染能抑制类风湿关节炎(RA)小鼠动物模型滑膜细胞COX-2表达的有效shRNA序列。方法设计4组hCOX-2 shRNA序列,然后插入慢病毒形成pGPHI/GFP/Neo-shRNA表达载体。将重建的病毒转染到来自类风湿关节炎小鼠动物模型的滑膜细胞,在上清液中实时PCR和ELISA法分别检测hCOX-2 mRNA表达水平与炎性因子如前列腺素E2 (PGE2)的蛋白,血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-1(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。结果慢病毒介导的hCOX-2 shRNA基因转染后细胞生长和形态上没有明显的负面影响。hCOX-2 mRNA的表达水平,以及PGE2、VEGF的浓度,IL-1和TNF-α,显著降低(P<0.05)。结论慢病毒介导的干扰RNA(hcox-2 shRNA2和hcox-2 shRNA2)可以显著抑制RA滑膜细胞hCOX-2 mRNA的表达水平,从而减少炎性细胞因子的表达。