成纤维细胞生长因子受体FGFR1真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞的表达

金锦花; 李科岩; 张玲; 王玉慧; 邓晓明

成纤维细胞生长因子受体FGFR1真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞的表达

中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院麻醉科

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国家自然科学基金资助项目(81701926)；

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摘要

摘要: 目的建立一个有效表达FGFR1的真核系统。方法从人胎盘组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到FGFR1基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建成pcDNA3.1-FGFR1质粒表达载体,并在HEK293T细胞重组表达;将pcDNA3.1-FGFR1质粒转染HEK293T细胞,通过免疫印迹和免疫荧光检测FGFR1在细胞中的表达情况。结果扩增的FGFR1序列与数据库一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了FGFR1c DNA在HEK293T细胞膜上的表达。结论成功扩增出FGFR1 c DNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了FGFR1在HEK293T细胞的高效表达。
- FGFR1 /
- HEK293T细胞 /
- 表达 /
- Western blot /
- 免疫荧光

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