竞争ELISA法检测人抗脊髓灰质炎病毒(Ⅲ型)中和抗体
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摘要: 目的建立竞争ELISA检测方法,用于检测人群中抗脊髓灰质炎病毒Ⅲ型中和抗体的监测,旨在消灭脊灰后时代中替代中和试验,提供方便、快速和准确的检测方法。方法在前期研究的双抗体夹心ELISA方法的基础上,用纯化后的SabinⅢ型的D抗原作为包被抗原,然后将待测人血清和兔多克隆抗脊灰抗体共同孵育,形成竞争性结合,使用方阵滴定法确定各项抗体、抗原的包被条件,建立抗脊灰中和抗体竞争性ELISA检测方法,与中和试验进行结果的一致性评价。结果该方法仅对脊灰病毒Ⅲ型D抗原血清检测为阳性,与脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ型血清无交叉反应,比中和试验敏感性更高。批内批间变异系数分别为3.29%~4.51%和5.26%~6.11%,具有良好的重复性。与中和试验比较,阳性符合率为100%,阴性符合率为88.9%。结论使用本实验建立的竞争ELISA方法用于检测人群抗脊灰中和抗体能达到快速、准确的评价目的并且可避免活病毒的使用。
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