Application of Various Sealing Materials and Adhesive Systems in Extracorporeal Pit and Fissure Sealing
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摘要:
目的 比较树脂型窝沟封闭剂、流动树脂、复合体、玻璃离子等材料结合不同粘结系统行窝沟封闭术后的边缘密闭性，为经济欠发达地区寻找简捷有效的防龋措施。 方法 离体牙随机分五组：全酸蚀技术 + 树脂型窝沟封闭剂组（A组，对照组）、自酸蚀粘结剂 + 树脂型窝沟封闭剂组（B组）、自酸蚀粘结剂 + 流动树脂组（C组）、自酸蚀粘结剂 + 复合体组（D组）及玻璃离子组（E组），体外行窝沟封闭并记录操作时间。行体外温度循环后进行扫描电镜及体视显微镜检测。 结果 （1）各组均存在不同程度的微渗漏；（2） B组及C组与对照组（A组）差异有统计学意义（P < 0.05），操作时间短于对照组；（3） D组及E组微渗漏高于对照组（P < 0.05）；（4） D组在试件制备过程中无折断及松脱等现象。 结论 自酸蚀粘结系统结合树脂型窝沟封闭剂及流动树脂实施窝沟封闭术时操作简便、微渗漏较低；复合体抗压强度较大。 Abstract:Objective To evaluate marginal integrity and microleakage of resin-based sealant, flowable composite resin, compomer and glass ionomer cement combined with certain adhesive systems, in order to explore a more convenient, effective and time-saving approach which intends to be applied in less developed areas. Methods 65 maxillary premolar teeth were kept in artificial saliva, pits and fissures were cleaned by ART equipments. The samples were allocated into 5 groups randomly: （A） phosphoric acid etching + Concise （control）; （B） AdperTM Easy One + Concise; （C） AdperTM Easy One + FiltekTM Z350XT flowable resin; （D） AdperTM Easy One + Dyract Extra compomer; and （E） GC Fuji VII. The pit and fissure sealant were applied, and the operation time was recorded in vitro. After thermocycling, specimens were evaluated by scanning electron microscope and stereomicroscope. Results i） All the groups showed various level of microleakage; ii） Group B and C showed similar microleakage as compared with the control group, while their operation time were shorter than that of the control group （P < 0.05）; iii） Group D and E showed greater microleakage than other groups （P < 0.05）; iv） No shedding of sealing materials during teeth cutting in Group D. Conclusions Resin-based sealant and flowable composite resin combined with self-etching adhesive system has advantages of operative convenience and effectiveness. Dyract Extra compomer has better abrasion resistance. -
Key words:
- Pit and fissure sealant /
- Sealing materials /
- Adhesive system /
- Marginal integrity /
- Microleakage
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颅内动脉瘤（intracranial aneurysm ，IA）是临床中致死率与伤残率极高的脑血管疾病，发病率约2%～5%。IA破裂后12%的患者在到达医院前死亡，1个月内超过50%的死亡率，剩余超过30%的患者将进一步出现迟发性神经功能缺失，患者预后极差[1]，动脉瘤的发生发展涉及遗传、血流动力学、环境以及生活习惯等多种因素，但其确切的病理生理机制尚未阐明，后交通动脉一般借大脑后动脉与动眼神经分开而不与其接触，当血管分叉处动脉瘤突然增大便可压迫动眼神经，导致动眼神经麻痹等严重的后果；另一方面，随着体检的普及和成像技术的发展，颅内未破裂的后交通动脉瘤的检出率明显增高，这些动脉瘤将会如何发展？破裂的风险有多少？对患者及家属至关重要。4D-CTA成像是一种无创血管造影技术，可实现图像的实时处理和定量分析，在脑卒中等脑血管疾病的诊断中已经取得了良好的效果[2]。同时，血清学检查也已广泛应用于临床，基质细胞衍生因子-1（SDF-1a）属于 CXCR 趋化因子家族，是一种炎性趋化因子，来源于骨髓间充质干细胞，SDF-1a能与趋化因子受体4（CXCR4）特异性结合，形成SDF-1a/CXCR4生物轴，参与血管生成和炎症反应等生物学过程[3]。Shi 等[4]发现预后良好的急性缺血性脑卒中患者的 SDF-1a水平低于预后不良者，提示 SDF-1a水平与患者病情严重程度及预后不良呈正相关。然而，SDF-1 a在颅内动脉瘤破裂诊断中少有报道，在动脉瘤发生发展的研究中，SDF-1a/CXCR4信号通路通过影响血管壁的炎症反应及平滑肌功能，从而在后交通动脉瘤的发生、发展和破裂中起到了关键作用，逐渐成为了新的研究焦点，并且少有影像学结合基础方面共同研究颅内动脉瘤，本研究利用 4D-CTA 结合SDF-1 a在评估颅内后交通动脉瘤破裂风险方面的价值。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
将 2022年 2 月至 2023 年 2 月期间接受治疗的 50 例未破裂颅内后交通动脉瘤患者和 50 例破裂颅内后交通动脉瘤患者分为未破裂组 1 和破裂组 1。在破裂 1 组中，男性24例 ，女性26例 ，年龄 51～73 岁，平均年龄（62.30±3.44）岁。2组的总体数据均衡，具有可比性（P > 0.05）。 未破裂组男性 29 例，女性 21 例，年龄 49～71 岁，平 均（61.05±3.57）岁。破裂组男 24 例，女 26 例，年龄 50～74 岁，平均（62.30±3.47）岁。2 组间一般资料平衡良好，具有可比性（P > 0.05）。
1.2 纳入和排除标准
纳入标准[5]：（1）通过脑血管造影术确诊为颅内动脉瘤的患者；（2）首次确诊的患者；（3）有明确病变动脉的患者；（4）患者及其家属签署知情同意书的患者。
排除标准：（1）合并感染者；（2）因外伤继发颅内动脉瘤者；（3）并发其他脑血管畸形者；（4）对造影剂过敏者；（5）并发恶性肿瘤者。2组数据同时适用于纳入标准和排除标准。本研究通过昆明市医学委员会批准（2023-223-01）。
1.3 4D-CTA
使用日本佳能320 层 CT 扫描仪进行扫描，扫描范围覆盖整个大脑，管电压为 120 kV，电流为 300 mA；扫描总时间为 14.30 s，扫描管旋转一圈的时间为 0.75 s。向肘前静脉注射碘佛醇（300 mg碘/mL，30 mL）和 30 mL生理盐水，然后进行动态扫描。
1.4 图像后处理
将所获得的原始图像及减影图像传送至Start Vitrea工作站，重建层厚0.5 mm、层间距0.4 mm，从多角度、多方位观察。（1）动脉瘤的瘤颈是指动脉瘤与载瘤动脉相交的两点间连线，瘤高是指动脉瘤底部最高处与动脉瘤颈部中点的连线，瘤颈比（AR）= 瘤高/瘤颈（图1）；（2）动脉瘤的大小：寻找动脉瘤的最大宽度与瘤高2个数值中的最大者；动脉瘤的最大宽度定义为垂直于瘤高的、连接动脉瘤两侧壁的最大段长度；动脉瘤的瘤高与载瘤动脉直径比（SR）=瘤高/载瘤动脉平均直径（图1）。（3）VOR = Volume（动脉瘤体积）/ Ostium Area（动脉瘤底面积），见图1。
破裂组右侧大脑中动脉瘤。0%～100% 代表4D-CTA 中的10 个期相，在这 10 幅动态图中，10%、60%、90%连续3个期限可见动脉瘤瘤底出现搏动点，见图2 。
图像都在多个层面上进行旋转重建，整个动脉瘤显示在同一位置，以减少测量误差；多层旋转重建后动脉瘤边界的自动追踪显示了动脉口面积和动脉瘤体积并在下图自动显示，见图3。
图 3 AR、SR 及 VOR 数值 测量图示并动脉瘤基底部见异常搏动点（黄箭头所示）Figure 3. Diagram of 4D measurement of AR，SR，and VOR values（shown by yellow arrow）4D-CTA成像经过图像渲染后可以更接近DSA图像，见到经过动脉瘤侧壁喷射出血液，见图4。
图 4 4D-CTA成像 后交通动脉异常搏动点（绿箭头）Figure 4. Abnormal pulse points of Traffic artery after 4D-CTA （green arrow）1.5 检测 SDF-1水平
抽取每位患者的外周肘静脉血（5 mL）并离心。然后采集血清，使用酶联免疫吸附试验（西门子）检测SDF-1a水平。
1.6 分组方法
未破裂组 1 的患者接受保守治疗，并随访 12 个月以后观察动脉瘤破裂情况。在此基础上，动脉瘤破裂的患者被纳入破裂组2，动脉瘤未破裂的患者被纳入未破裂组2。
1.7 观察指标
（1） 4D-CTA 成像特征：记录肿瘤颈宽（Wn）、肿瘤体高（H）、肿瘤长径/母动脉平均直径（AR）、肿瘤长径（L）、母动脉平均直径（DA）、H/DA（SR）和 H/Wn；（2）SDF-1：记录并比较 SDF-1 水平。
1.8 统计学处理
统计分析采用 SPSS24.0 软件，绘制接收者操作特征曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC），据此检验 4D-CTA 结合SDF-1 对颅内动脉瘤破裂的诊断和预测价值。P<0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 破裂组1和非破裂组1 影像数据结合SDF-1水平联合诊断
破裂组1和非破裂组1 SDF-1结合颅内后交通动脉瘤Wn、AR、L、SR）和血清SDF-1组合联合诊断， 破裂1组SDF-1水平[（149.48±13.22）μg/L高于非破裂1组[（135.03±11.01） μg/L（t=5.90，P < 0.001），差异有统计学意义，见表1。 4D-CTA测量Wn、AR、L、SR）和血清SDF-1水平为检验变量，绘制ROC曲线。Wn、AR、L、SR、SDF-1及其联合诊断颅内后交通动脉瘤破裂的AUC均>0.70，联合诊断有价值（表2、图5）。
表 1 破裂组1和非破裂组1 SDF-1对比[μg/L，（$\bar x \pm s $）]Table 1. Comparison of SDF-1 between unruptured group 1 and ruptured group 1 [μg/L，（$\bar x \pm s $）]组别 SDF-1 破裂组 1 （n=50） 135.03±11.01 非破裂 1 （n=50） 149.48±13.22 T 5.900 P <0.001* *P<0.05。 表 2 4D-CTA联合SDF-1对颅内后交通动脉瘤破裂的诊断价值Table 2. Diagnostic value of 4D-CTA combined with SDF-1 in the rupture of intracranial posterior communicating aneurysms.因素 AUC 临界值 95%CI P 特性异 敏感性 Wn 0.844 2.990 0.765～0.923 <0.001* 0.760 0.860 AR 0.888 1.115 0.818～0.958 <0.001* 0.840 0.900 L 0.834 4.585 0.758～0.909 <0.001* 0.660 0.820 SR 0.771 1.255 0.679～0.863 <0.001* 0.680 0.740 SDF-1 0.800 141.155 0.712～0.887 <0.001* 0.760 0.760 Combination 0.976 0.953～0.999 <0.001* 0.880 0.960 *P<0.05。 
图 5 4D-CTA联合SDF-1对颅内后交通动脉瘤破裂的诊断价值Figure 5. Diagnostic value of 4D-CTA combined with SDF-1 in the rupture of intracranial posterior communicating aneurysms2.2 破裂组2和非破裂组2 SDF-1水平和以及颅内动脉瘤Wn、AR、L、SR）和血清SDF-1水联合诊断
破裂组2 的 SDF-1 水平[（142.38±11.22）μg/L]高于非破裂组 2 [（128.13±10.22）μg/L]（t=4.660，P<0.001），差异有统计学意义，见表3。 4D-CTA 测量Wn、AR、L 、SR及入院时血清 SDF-1 水平为检验变量，绘制 ROC 曲线，结果发现，Wn、AR、L、SR和SDF-1 在颅内后交通动脉瘤破裂诊断中的 AUC 均大于 0.70，提示其组合值具有预测价值（表4、图6）。
表 3 破裂组2和非破裂组2 SDF-1对比[μg/L，（$\bar x \pm s $）]Table 3. Comparison of SDF-1 between unruptured group 2 and ruptured group 2 [μg/L，（$\bar x \pm s $）]组别 SDF-1 破裂组2 （n=19） 142.38±11.22 非破裂2 （n=31） 128.13±10.22 t 4.660 P <0.001* *P<0.05。 表 4 联合SDF-1对颅内后交通动脉瘤破裂的预测价值Table 4. Predictive value of combined SDF-1 for rupture of intracranial posterior communicating aneurysms因素 AUC 临界值 95%CI P 特性异 敏感性 Wn 0.926 2.710 0.856～0.996 <0.001* 0.871 0.842 AR 0.705 1.065 0.546～0.863 0.016 0.710 0.632 L 0.744 4.215 0.579～0.910 0.004 0.742 0.737 SR 0.792 1.115 0.652～0.932 0.001 0.645 0.789 SDF-1 0.847 133.510 0.742～0.952 <0.001* 0.710 0.789 Combination 0.973 − 0.928～1.000 <0.001* 0.903 0.947 *P<0.05。 
图 6 4D-CTA联合SDF-1对颅内后交通动脉瘤破裂的预测价值Figure 6. Predictive value of 4D-CTA combined with SDF-1 for ruptured intracranial aneurysms3. 讨论
颅内动脉瘤是常见的脑血管疾病，后交通动脉瘤破裂具有发病急、病情重的特点，是导致蛛网膜下腔出血的主要原因[6-7]。未破裂的后交通动脉瘤可通过动脉瘤栓塞等多种方式进行治疗消除动脉瘤破裂的风险[8]，但破裂动脉瘤与未破裂动脉瘤的治疗方案和预后不同，因此及时有效地诊断颅内动脉瘤是否有破裂倾向对临床治疗具有重要意义。血管造影是诊断颅内动脉瘤的 "金标准"；然而，由于血管造影术具有创伤大且存在血管内膜损伤等并发症的风险，其临床应用受到一定限制；同时由于DSA常用观察角度会遗漏病灶，无法像4D-CTA脑动脉瘤形态学分析软件可以自由旋转并全方位观察；4D-CTA 是一种无创血管造影技术并在3D-CTA 的基础上增加了时间维度，比DSA扫描速度快可以减低患者辐射量，同时可实现对心动周期不同阶段血管壁形态变化的实时观察[9]，可以更客观的观察到动脉瘤的大小、形态、血供等动态信息，为诊断提供数据支持 [10]。目前，临床上对颅内动脉瘤的病因和发病机制仍不清楚，但一般认为与炎症反应密切相关。De Paepe M E 等[11]报道，颅内动脉瘤的形态特征与动脉瘤壁的炎症反应密切相关。Jiang 等[12]也认为后动脉瘤破裂患者动脉瘤壁的补体激活程度高于未破裂的后交通动脉瘤患者，这表明炎症与颅内后交通动脉瘤的变性和破裂有关，同时SDF-1 是一种趋化因子，是激活炎症级联和血管生成的重要角色。Newberry J 等[13]研究发现，SDF-1 可促进营养血管生成和炎症细胞的迁移与增殖，与颅内后交通动脉瘤的发生和发展密切相关。本研究中，破裂组1和非破裂组1 SDF-1水平和以及颅内动脉瘤Wn、AR、L、SR和血清SDF-1组合联合诊断， 破裂1组SDF-1水平（149.48±13.22）μg/L高于非破裂1组（135.03±11.01） μg/L （t = 5.90， P < 0.001），差异有统计学意义；破裂组2和非破裂组2 SDF-1水平和以及颅内动脉瘤Wn、AR、L、SR和血清SDF-1水平联合诊断，破裂组2 的 SDF-1 水平（142.38±11.22）μg/L高于非破裂组 2 （128.13±10.22） μg/L（t = 4.660，P < 0.001），差异有统计学意义，提示具有一定的预测价值。原因如下：（1）SDF-1 可改变动脉瘤壁的性质，促进后交通动脉瘤周围的炎症反应，诱导炎性细胞（内皮细胞和巨噬细胞）通过血管进入动脉瘤壁，从而导致动脉瘤破裂；（2）炎症细胞可通过后交通动脉瘤的血管浸润，动脉瘤外的基质在炎症细胞分泌的蛋白酶作用下发生变形，从而使动脉瘤更加脆弱，导致结构失去完整性，最终引起后交通动脉瘤破裂[14]。此外，SDF-1 可与 CXCR4 结合形成 SDF-1/CXCR4 生物轴，在炎症细胞的募集中发挥重要作用，有利于细胞在病变部位的聚集，从而加重颅内动脉瘤的炎症反应，导致动脉瘤破裂[15]。此外，在诊断和预测颅内动脉瘤破裂方面，4D-CTA 结合 SDF-1 的 AUC 分别为 0.976 和 0.973，大于任何单一参数。
综上所述，建立包含SDF-1a／CXCR4信号通路信息在内的“颅内后交通动脉瘤破裂风险预测模型”，有助于提供准确的颅内后交通动脉瘤破裂预警，最终为探索动脉瘤的发生机制、破裂风险预测和治疗开创新方法。本研究由于样本量不足，日后将会加大样本量进一步研究影响后交通动脉瘤破裂的风险因素，并延长随访时间进一步确认结论。为患者提供合适的治疗方案。
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图 1 对照组及实验组微渗漏等级评分构成图
A：对照组；B：自酸蚀粘结剂+树脂型窝沟封闭剂；C：自酸蚀粘结剂+流动树脂；D：自酸蚀粘结剂+复合体；E：GC FujiVII。 与A组比较，*P < 0.05；与B组比较，#P < 0.05。
Figure 1. Bar diagram illustrating microleakage in each group
图 2 扫描电镜下各组材料与牙面的结合状况（× 100）
A：对照组；B：自酸蚀粘结剂 + 树脂型窝沟封闭剂；C：自酸蚀粘结剂 + 流动树脂；D：自酸蚀粘结剂 + 复合体；E：GC FujiVII。
Figure 2. Interface between sealant and tooth surface in each group detected by SEM （× 100）
图 3 扫描电镜下封闭材料与牙釉质界面的显微结构（× 2 000）
A：对照组；B：自酸蚀粘结剂 + 树脂型窝沟封闭剂；C：自酸蚀粘结剂 + 流动树脂；D：自酸蚀粘结剂 + 复合体；E：GC FujiVII；S：窝沟封闭材料；T：牙釉质界面。
Figure 3. SEM photomicrographs of sealant-enamel interface （× 2 000）
表 1 采用不同材料及技术进行窝沟封闭的实验分组
Table 1. Sealing with various materials and techniques in different groups
组别 粘结处理材料 封闭材料 固化方式 A组（对照组） 37%正磷酸 树脂型窝沟封闭剂（Concise） LED光固化 B组 Easy One自酸蚀粘结剂 树脂型窝沟封闭剂（Concise） LED光固化 C组 Easy One自酸蚀粘结剂 流动树脂（Z350XT） LED光固化 D组 Easy One自酸蚀粘结剂 复合体（Dyract） LED光固化 E组 — 玻璃离子（Fuji VII） 自凝固化 
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表 2 染料渗漏等级评分
Table 2. Crading of dye penetration
分值 渗漏情况描述 0 边缘无染色 1 渗入深度未及封闭材料与牙釉质界面长度的1/2 2 渗入深度超过封闭材料与牙釉质界面长度的1/2，
未及沟底3 染料延伸至沟底
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表 3 各组窝沟封闭操作时间比较（
$\bar x \pm s$ ）Table 3. Comparison of operation time between different groups （
$\bar x \pm s$ ）组别 n 操作时间（s） A组 13 129.69 ± 9.49#^&§ B组 13 108.54 ± 10.00*& C组 13 110.38 ± 12.47*& D组 13 153.85 ± 17.53*#^§ E组 13 95.31 ± 20.63*& 与A组比较，*P < 0.05；与B组比较，# P < 0.05；与C组比较，^P < 0.05；与D组比较，&P < 0.05；与E组比较，§P < 0.05。
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表 4 体式显微镜下各组材料渗漏情况[n（%）]
Table 4. Microleakage detected by stereomicroscope [n（%）]
组别 渗漏分值 其他 合计 0 1 2 3 X A 38（63.3） 10（16.7） 5（8.3） 3（5.0） 4（6.7） 60（100） B 37（61.7） 13（21.7） 3（5.0） 4（6.7） 3（5.0） 60（100） C 35（58.3） 11（18.3） 8（13.3） 5（8.3） 1（1.7） 60（100） D 20（33.3） 25（41.7） 6（10.0） 9（15.0） 0（0.0） 60（100）*# E 21（35.0） 11（18.3） 8（13.3） 13（21.7） 7（11.7） 60（100）*# X为试件制备过程中，材料出现折裂、松动及脱落等现象，无法正常观察染料渗透情况。与A组比较，*P < 0.05；与B组比较，#P < 0.05。
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