Analysis of Serum Fat-soluble Vitamin Levels in Infants and Children in Anning City
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摘要:
目的 了解安宁市婴幼儿及儿童血清脂溶性维生素水平，为安宁市儿童合理补充脂溶性维生素提供参考。 方法 于2019年6月至2020年7月，选取昆钢医院儿童体检中心925名婴幼儿及儿童，使用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）定量检测血清中脂溶性维生素；根据不同年龄、性别和季节进行脂溶性维生素营养水平分析。 结果 925例婴幼儿及儿童血清维生素A、25-羟基维生素D3、维生素E和维生素K的平均水平及不足和缺乏率分别为：（284±3.84）ng/mL，61.08%（565/925）；（34.27±0.46）ng/mL，1.73%（16/925）；（8.47±0.16）μg/mL，12.11%（112/925）；（0.46±0.03）ng/mL，19.68%（182/925）。不同年龄段（3岁以下，4～6岁，7～12岁）之间及不同季节之间脂溶性维生素水平，差异有统计学意义（P < 0.01）。 结论 安宁市婴幼儿及儿童维生素A严重缺乏，需要密切关注，合理补充。由于天然的日照优势，维生素D营养水平较好，因避免盲目过度补充。 Abstract:Objective To investigate the serum fat-soluble vitamins levels in infants and children in Anning City, to provide reference data for reasonable fat-soluble vitamin supplementation. Methods From June 2019 to July 2020, 925 infants and children from Children’ s Physical Examination Center of Kungang Hospital were selected. High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS） was used to test the serum fat-soluble vitamins quantitatively. Then the fat-soluble vitamins levels were analyzed based on different ages, genders, and seasons. Results The average levels as well as insufficiency and deficient rates of serum vitamin A, 25-hydroxyvitamin D3, vitamin E and vitamin K in 925 infants and children were （284±3.84） ng/mL, 61.08%（565/925）; （34.27±0.46）ng/mL, 1.73%（16/925）; （8.47±0.16）μg/mL, 12.11%（112/925） and （0.46±0.03）ng/mL, 19.68%（182/925）, respectively. There were differences between different age groups （age range 0-3, 4-6, 7-12） and seasons （P < 0.01）. Conclusion There was a serious deficiency of vitamin A, which requires close attention and reasonable supplement. Due to the natural sunshine advantage in Yunnan, vitamin D nutrition level is relatively good, and excessive supplementation should be avoided. -
维生素是机体必须的微量营养元素，参与调节生长发育、新陈代谢等多个生理功能。根据不同的溶解性，维生素被划分为水溶性和脂溶性两大类。常见的脂溶性维生素包括：维生素A、D、E、K。
维生素A与人体正常视觉功能和免疫功能相关。缺乏维生素A不仅会导致儿童患夜盲、干眼症，还会增加儿童患呼吸系统疾病的风险[1]。中国疾病预防控制中心的一项调查显示，我国中小城市9.77%的小学生存在维生素A缺乏[2]。维生素D是维持血清钙、磷平衡，促进骨骼发育的重要微量元素。1，25-羟基维生素D3是维生素D在人体的主要活性形式。缺乏维生素D会导致骨折发生风险增加。研究显示我国98%的儿童维生素D摄入量不足[3]。维生素E，又名生育酚，对机体免疫起调节作用，具有抗氧化功能，可保护神经元免受损伤，与儿童脑部发育密切相关[4]。维生素K参与凝血因子合成，其缺乏可导致自发性出血。据报道，维生素K缺乏性出血是导致我国婴儿出血症的主要原因[5]。
为了解安宁市婴幼儿及儿童血清脂溶性维生素（A、D、E、K）营养状况，本研究对1个月～12岁婴幼儿及儿童的血清脂溶性维生素进行调查，现将调查结果作如下报道。
1. 对象与方法
1.1 研究对象
于2019年6月至2020年7月，选取昆钢医院儿童体检中心进行健康检查的婴幼儿及儿童共925名（男童508例、女童417例）；排除标准：存在呼吸道感染症状、胃肠道疾病、慢性疾病和先天性疾病等的非健康婴幼儿及儿童。按年龄分为婴幼儿期（3岁以下）667例，学龄前期（4～6岁）144例，学龄期（7～12岁）114例；按检测季节分为春季组（91例）、夏季组（196例）、秋季组（230例）、冬季组（408例），季节按阳历进行划分：春季（3～5月）、夏季（6～8月）、秋季（9～11月）、冬季（12月至次年2月）。本研究已经过云南省昆钢医院医学伦理委员会审查批准，并取得受检者家长或监护人知情同意。
1.2 研究方法
1.2.1 血清
由科室专业护士负责采血，每位受检者采集空腹静脉血2 mL，离心分离获得血清后，立即送往医院检验科进行样本检测。
1.2.2 血清脂溶性维生素检测及评估
使用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）定量检测血清中脂溶性维生素（VA、VD2、VD3、VE、VK），参考美国儿科学会和美国内分泌学会标准[6]评估每位受试者的维生素营养情况，VA < 300 ng/mL，VD2 < 1.2 ng/mL，VD3 < 12 ng/mL，VE < 7 μg/mL，VK < 0.1 ng/mL即为缺乏/不足。
1.3 统计学处理
采用SPSS 23软件进行数据分析。计数资料以例数和百分比进行描述，采用χ2检验进行组间比较；计量资料均以（
$\bar x \pm s$ ）表示，2组比较采用t检验，多组比较采用方差分析。检验水准α= 0.05，P < 0.05为差异有统计学意义。2. 结果
2.1 婴幼儿及儿童血清脂溶性维生素水平
925例婴幼儿及儿童血清维生素A的平均水平为（284±3.84）ng/mL，不足和缺乏率为61.08%（565/925）；维生素D2的平均水平为（4.88±0.18）ng/mL，不足和缺乏率为18.05%（167/925）；维生素D3的平均水平为（34.27±0.46）ng/mL，不足和缺乏率为1.73%（16/925）；维生素E的平均水平为（8.47±0.16）μg/mL，不足和缺乏率为12.11%（112/925）；维生素K的平均水平为（0.46±0.03）ng/mL，不足和缺乏率为19.68%（182/925），见图1。
图 1 血清脂溶性维生素不足与缺乏率Figure 1. The insufficiency and deficient rates of serum lipid soluble vitamins2.2 不同性别血清脂溶性维生素水平比较
925例婴幼儿及儿童中男童占比55%（508例），女童占比45%（417例）。男童和女童之间维生素A、25-羟基维生素D2、维生素E和维生素K的营养水平均，差异无统计学意义（P > 0.05），但女童的25-羟基维生素D3低于男童，差异有统计学意义（P < 0.05），见表1。比较男童、女童之间维生素A、25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3和维生素E的正常率及不足和缺乏率，差异无统计学意义（P > 0.05），但男童维生素K的缺乏和不足率显著高于女童（P < 0.05），见表2。
表 1 不同性别血清脂溶性维生素水平比较（$\bar x\pm s$ ）Table 1. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum between different genders （$\bar x\pm s$ ）性别 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）男（n = 508） 281.16 ± 4.85 4.82 ± 0.26 35.19 ± 0.61 8.29 ± 0.15 0.41 ± 0.03 女（n = 417） 289.53 ± 6.11 4.95 ± 0.23 33.15 ± 0.68 8.70 ± 0.30 0.51 ± 0.05 t −1.086 −0.375 2.243 −1.298 −1.753 p 0.278 0.708 0.025* 0.194 0.080 *P < 0.05。 表 2 不同性别血清脂溶性维生素的正常、不足和缺乏率比较[n（%）]Table 2. Comparison of normal，insufficiency and deficient rates of serum fat-soluble vitamin levels between different genders [n（%）]性别 维生素A 25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3 维生素E 维生素K 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 男（n = 508） 327（64.37） 181（35.63） 98（19.29） 410（80.71） 8（1.57） 500（98.43） 61（12.00） 447（88.00） 112（22.05） 396（77.95） 女（n = 417） 245（58.75） 172（41.25） 69（16.55） 348（83.45） 8（1.92） 409（98.08） 51（12.23） 366（87.77） 70（16.79） 347（83.21） x2 3.015 1.17 0.159 0.011 4.010 P 0.082 0.280 0.690 0.918 0.045* *P < 0.05。 2.3 不同季节血清脂溶性维生素水平比较
婴幼儿及儿童血清脂溶性维生素水平在不同季节之间均存在差异（P < 0.01），见表3。进一步分析显示，维生素A分布特点：夏季 > 冬季 > 秋季 > 春季；维生素E分布特点：夏季 > 秋季 > 春季 > 冬季；维生素A、25-羟基维生素D3、维生素E和维生素K水平最高的季节均在夏季，而25-羟基维生素D2水平在春季和冬季较高，在夏季最低（P < 0.01）。
表 3 不同季节血清脂溶性维生素水平比较（$\bar x\pm s$ ）Table 3. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum among seasons （$\bar x\pm s$ ）季节 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）春季（n = 91） 250.91 ± 12.85 5.37 ± 0.48 33.11 ± 1.59 8.48 ± 0.34 0.28 ± 0.03 夏季（n = 196） 326.79 ± 10.78a 3.37 ± 0.33a 39.48 ± 1.15a 10.44 ± 0.31a 0.72 ± 0.11a 秋季（n = 230） 262.64 ± 5.74b 3.99 ± 0.43a 35.88 ± 0.88b 9.22 ± 0.49b 0.49 ± 0.05 冬季（n = 408） 284.98 ± 5.19 abc 5.99 ± 0.24bc 31.12 ± 0.58bc 7.11 ± 0.12abc 0.36 ± 0.02 合计（n = 925） 284.93 ± 3.84 4.88 ± 0.18 34.27 ± 0.46 8.47 ± 0.16 0.46 ± 0.03 F 14.389 13.942 18.501 25.196 8.876 P < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 与春季比较，aP < 0.01；与夏季比较，bP < 0.01；与秋季比较，cP < 0.01。 2.4 不同年龄段血清脂溶性维生素水平比较
婴幼儿及儿童血清脂溶性维生素水平在不同年龄段之间均存在差异（P < 0.01），见表4。进一步分析可见，维生素A的年龄分布特点为：婴幼儿期（3岁以下）< 学龄前期（4～6岁）< 学龄期（7～12岁）；25-羟基维生素D3和维生素E的年龄分布特点与维生素A相反，婴幼儿期（3岁以下）> 学龄前期（4～6岁）> 学龄期（7～12岁）。
表 4 不同年龄段血清脂溶性维生素水平比较（$\bar x\pm s$ ）Table 4. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum among age groups （$\bar x\pm s$ ）年龄段 n 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）年龄 婴幼儿期 667 277.51 ± 4.35 4.80 ± 0.22 36.80 ± 0.53 8.85 ± 0.21 0.43 ± 0.03 学龄前期 144 287.95 ± 9.84 5.17 ± 0.40 30.34 ± 1.08a 7.69 ± 0.26a 0.53 ± 0.14 学龄期 114 324.53 ± 12.33ab 4.99 ± 0.45 24.41 ± 0.86ab 7.25 ± 0.26a 0.52 ± 0.06 总体 925 284.93 ± 3.84 4.88 ± 0.18 34.27 ± 0.46 8.47 ± 0.16 0.46 ± 0.03 F 8.088 31.5 50.807 7.624 10.37 P < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 与婴幼儿期比较，aP < 0.01；与学龄前期比较，bP < 0.01。 3. 讨论
脂溶性维生素是维持人体正常生理功能、促进新陈代谢的必需微量元素，而膳食摄入和补充剂是脂溶性维生素的主要来源[7-10]。然而，由于摄入不足或吸收不良导致的脂溶性维生素缺乏严重影响了儿童身体健康。
本研究表明，安宁市婴幼儿及儿童血清维生素A的平均水平为（284±3.84）ng/mL，低于我国儿童血清维生素A平均水平（310 ng/mL）[11]。全国调查结果显示，我国12岁以下儿童维生素A缺乏率超过50%[11]，本研究中儿童维生素A缺乏率为61.08%，远高于厦门等东部沿海地区报道的43.19%[12]，这可能由于安宁市地处偏僻，经济落后，当地居民缺乏维生素A的补充意识。安宁市婴幼儿及儿童维生素A营养水平随着年龄增加而升高，具体表现为婴幼儿期（3岁以下）< 学龄前期（4～6岁）< 学龄期（7～12岁），该结果与全国调查结果一致[7]。
维生素D3是维生素D的主要形式，主要由皮肤中7-脱氢胆固醇通过阳光中的紫外线照射转化而来。25-羟基维生素D3是机体维生素D3的主要活性形式和营养状态的指示剂。本研究结果显示，安宁市婴幼儿及儿童25-羟基维生素D3的平均水平为（34.27±0.46）ng/mL，高于中国东北地区报道的26.2848 ng/mL[13]和福建厦门地区报道的（32.790±8.435）ng/mL[12]。这可能是由于安宁地处我国西部高原地区，空气稀薄，紫外线强，日照时间长，儿童可自体合成充足的维生素D3。因此，安宁市婴幼儿及儿童的维生素D3缺乏率仅为1.73%，而我国东北地区维生素D的缺乏率高达47.47%[13]。
维生素E是一类包括生育酚和生育三烯酚的复合物，具有多种生物功能，与机体酶活性、基因表达和神经系统发育相关[14-16]。我国健康儿童维生素E缺乏与不足率为21.49%[17]，其缺乏与儿童反复呼吸道感染相关[18-20]。本研究中，安宁市婴幼儿及儿童的维生素E缺乏与不足率为12.11%，其平均水平为（8.47±0.16）μg/mL，略低于北京健康儿童报道的（9.21±2.31）μg/mL[21]。
维生素K主要源于绿叶蔬菜，可参与骨代谢，其不足可影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收，影响儿童骨密度和骨骼发育[22-24]。本调查研究发现19.68%的安宁市婴幼儿及儿童存在维生素K缺乏现象。对于儿童骨骼发育，家长只注重钙和维生素D的补充，加上儿童挑食，对绿叶蔬菜摄入不足，容易导致儿童维生素K的缺乏[23]。
综上所述，安宁市婴幼儿及儿童脂溶性维生素（A、E、K）的营养水平欠佳，特别是维生素A存在严重缺乏现象，需要密切关注，进行合理补充。由于天然的日照优势，安宁市婴幼儿及儿童的维生素D营养水平较好，因此要避免盲目过度补充。
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图 1 血清脂溶性维生素不足与缺乏率
Figure 1. The insufficiency and deficient rates of serum lipid soluble vitamins
表 1 不同性别血清脂溶性维生素水平比较（
$\bar x\pm s$ ）Table 1. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum between different genders （
$\bar x\pm s$ ）性别 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）男（n = 508） 281.16 ± 4.85 4.82 ± 0.26 35.19 ± 0.61 8.29 ± 0.15 0.41 ± 0.03 女（n = 417） 289.53 ± 6.11 4.95 ± 0.23 33.15 ± 0.68 8.70 ± 0.30 0.51 ± 0.05 t −1.086 −0.375 2.243 −1.298 −1.753 p 0.278 0.708 0.025* 0.194 0.080 *P < 0.05。 
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表 2 不同性别血清脂溶性维生素的正常、不足和缺乏率比较[n（%）]
Table 2. Comparison of normal，insufficiency and deficient rates of serum fat-soluble vitamin levels between different genders [n（%）]
性别 维生素A 25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3 维生素E 维生素K 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 缺乏和不足 正常 男（n = 508） 327（64.37） 181（35.63） 98（19.29） 410（80.71） 8（1.57） 500（98.43） 61（12.00） 447（88.00） 112（22.05） 396（77.95） 女（n = 417） 245（58.75） 172（41.25） 69（16.55） 348（83.45） 8（1.92） 409（98.08） 51（12.23） 366（87.77） 70（16.79） 347（83.21） x2 3.015 1.17 0.159 0.011 4.010 P 0.082 0.280 0.690 0.918 0.045* *P < 0.05。
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表 3 不同季节血清脂溶性维生素水平比较（
$\bar x\pm s$ ）Table 3. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum among seasons （
$\bar x\pm s$ ）季节 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）春季（n = 91） 250.91 ± 12.85 5.37 ± 0.48 33.11 ± 1.59 8.48 ± 0.34 0.28 ± 0.03 夏季（n = 196） 326.79 ± 10.78a 3.37 ± 0.33a 39.48 ± 1.15a 10.44 ± 0.31a 0.72 ± 0.11a 秋季（n = 230） 262.64 ± 5.74b 3.99 ± 0.43a 35.88 ± 0.88b 9.22 ± 0.49b 0.49 ± 0.05 冬季（n = 408） 284.98 ± 5.19 abc 5.99 ± 0.24bc 31.12 ± 0.58bc 7.11 ± 0.12abc 0.36 ± 0.02 合计（n = 925） 284.93 ± 3.84 4.88 ± 0.18 34.27 ± 0.46 8.47 ± 0.16 0.46 ± 0.03 F 14.389 13.942 18.501 25.196 8.876 P < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 与春季比较，aP < 0.01；与夏季比较，bP < 0.01；与秋季比较，cP < 0.01。
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表 4 不同年龄段血清脂溶性维生素水平比较（
$\bar x\pm s$ ）Table 4. Comparison of fat-soluble vitamin levels in serum among age groups （
$\bar x\pm s$ ）年龄段 n 维生素A
（ng/mL）25-羟基维生素D2
（ng/mL）25-羟基维生素D3
（ng/mL）维生素E
（μg/mL）维生素K
（ng/mL）年龄 婴幼儿期 667 277.51 ± 4.35 4.80 ± 0.22 36.80 ± 0.53 8.85 ± 0.21 0.43 ± 0.03 学龄前期 144 287.95 ± 9.84 5.17 ± 0.40 30.34 ± 1.08a 7.69 ± 0.26a 0.53 ± 0.14 学龄期 114 324.53 ± 12.33ab 4.99 ± 0.45 24.41 ± 0.86ab 7.25 ± 0.26a 0.52 ± 0.06 总体 925 284.93 ± 3.84 4.88 ± 0.18 34.27 ± 0.46 8.47 ± 0.16 0.46 ± 0.03 F 8.088 31.5 50.807 7.624 10.37 P < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 < 0.001 与婴幼儿期比较，aP < 0.01；与学龄前期比较，bP < 0.01。
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