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UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响

杨兰 贾霄 姜奕彤 崔琪 刘光赐 何颖红

杨兰, 贾霄, 姜奕彤, 崔琪, 刘光赐, 何颖红. UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(5): 18-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210504
引用本文: 杨兰, 贾霄, 姜奕彤, 崔琪, 刘光赐, 何颖红. UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(5): 18-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210504
Lan YANG, Xiao JIA, Yi-tong JIANG, Qi CUI, Guang-ci LIU, Ying-hong HE. The Effect of Silencing of UBE2C Gene on the Proliferation and Migration of Human Gastric Cancer AGS Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(5): 18-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210504
Citation: Lan YANG, Xiao JIA, Yi-tong JIANG, Qi CUI, Guang-ci LIU, Ying-hong HE. The Effect of Silencing of UBE2C Gene on the Proliferation and Migration of Human Gastric Cancer AGS Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(5): 18-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210504

UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210504
基金项目: 国家自然科学基金资助项目(31360288)
详细信息
    作者简介:

    杨兰(1995~),女,广东梅州人,在读硕士研究生,主要从事细胞信号转导研究工作

    通讯作者:

    何颖红,E-mail:yinghonghe@qq.com

  • 中图分类号: R735.2

The Effect of Silencing of UBE2C Gene on the Proliferation and Migration of Human Gastric Cancer AGS Cells

  • 摘要:   目的  探讨UBE2C基因沉默对人胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。  方法  将用RNA 干扰技术构建的UBE2C-shRNA表达载体转染到293T细胞,用含有病毒颗粒的上清感染人胃癌AGS细胞,经puromycin筛选获得稳定表达的AGS细胞株。实验分为UBE2C表达沉默人胃癌AGS细胞组(干扰组)和对照组。采用qRT-PCR验证人胃癌AGS细胞中UBE2C的mRNA 表达水平,随后利用实时无标记细胞分析仪(RTCA)检测UBE2C沉默对人胃癌AGS细胞的增殖和迁移情况;同时应用CCK-8 细胞增殖检测试剂盒进一步印证UBE2C表达水平对人胃癌AGS细胞增殖能力影响。  结果  干扰组中UBE2C mRNA 表达 水平与对照组相比明显降低,AGS细胞增殖和迁移能力显著下降(P < 0.01)。  结论  靶向沉默UBE2C基因表达能抑制人胃癌AGS细胞恶性生物学行为。
  • 图  1  293T细胞转染3组慢病毒干扰质粒和对照质粒72 h荧光显微镜观察结果(100×)

    Figure  1.  293 T cells transfected with three group of interfering lentiviral vectors and control vector for 72hours were photographed under fluorescene microscope(100×)

    A:Contrl-shRNA;B:UBE2C -shRNA1;C:UBE2C -shRNA2;D:UBE2C -shRNA3。

    图  2  UBE2C-shRNA转染对UBE2C表达的影响(*P < 0.05,与对照组相比,n = 3)

    与Control-shRNA组比较,*P < 0.05,n = 3。

    Figure  2.  Interference efficiency of UBE2C-shRNA plasmid on UBE2C expression

    图  3  荧光显微镜下观察稳定表达 UBE2C的 AGS 胃癌细胞株(100×)

    Figure  3.  Stable expressing UBE2C of AGS gastric cancer cell strain under fluorescene microscope(100 ×)

    A:Contrl-shRNA;B:UBE2C-shRNA2。

    图  4  qRT-PCR 检测胃癌AGS细胞株中稳定表达UBE2C的水平

    与对照组比较,*P < 0.05,n = 3。

    Figure  4.  stable expression of UBE2C in AGS gastric cancer cell strain determined by qRT-PCR

    图  5  RTCA 实时监测胃癌AGS细胞增殖结果

    与对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,n = 3。

    Figure  5.  RTCA monitoring the proliferation of gastric cancer AGS cells

    图  6  CCK-8 检测UBE2C对胃癌AGS细胞增殖的影响与对照组比较,***P < 0.001,n = 3。

    Figure  6.  Effect of UBE2C on proliferation of gastric cancer AGS cells detected by CCK-8

    图  7  RTCA 实时监测胃癌AGS细胞迁移结果(*P < 0.05,***P < 0.001,n = 3)

    Figure  7.  RTCA monitoring the migration of gastric cancer AGS cells

    *P < 0.05,***P < 0.001,n = 3。

    表  1  引物信息

    Table  1.   Primer information

    基因引物序列5′→3′
    UBE2C forward:ATCCATGGAGCAGCTGGAAC
    reverse:GGCAGCATGTGTGTTCAAGG
    GAPDH forward:GAGCCACATCGCTCAGACAC
    reverse:CATGTAGTTGAGGTCAATGAAGG
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-01-15
  • 网络出版日期:  2021-06-02
  • 刊出日期:  2021-05-20

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