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不明原因肝损害的32例肝组织活检标本的29种微量元素测定

李惠敏,  陈刚,  李铁汉,  冯晓洁,  李卫昆,  祁燕伟,  刘春云,  刘立

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文章导航 > 昆明医科大学学报  > 2022 >  43(4): 125-131
王霖, 沈凌筠, 李海雯, 王晓燕, 高建鹏, 马志强. 云南省肺结核病患者营养状况及免疫功能分析[J]. 昆明医科大学学报, 2023, 44(1): 109-115. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230116
引用本文: 李惠敏, 陈刚, 李铁汉, 冯晓洁, 李卫昆, 祁燕伟, 刘春云, 刘立. 不明原因肝损害的32例肝组织活检标本的29种微量元素测定[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(4): 125-131. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220419
shu
Lin WANG, Lingjun SHEN, Haiwen LI, Xiaoyan WANG, Jianpeng GAO, Zhiqiang MA. Analysis of Nutritional Status and Immune Function of Tuberculosis Patients in Yunnan[J]. Journal of Kunming Medical University, 2023, 44(1): 109-115. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230116
Citation: Huimin LI, Gang CHEN, Tiehan LI, Xiaojie FENG, Weikun LI, Yanwei QI, Chunyun LIU, Li LIU. Determination of 29 Trace Elements in 32 Cases of Liver Biopsy with Unexplained Liver Injury[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(4): 125-131. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220419
shu

不明原因肝损害的32例肝组织活检标本的29种微量元素测定

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220419
  • 1.

    昆明市第三人民医院肝病三科，云南 昆明　650041

  • 2.

    昆明市第一人民医院肝胆胰外科，云南 昆明　650034

  • 3.

    昆明医科大学第二附属医院肝胆外科，云南 昆明　650101

  • 4.

    昆明市第一人民医院病理科，云南 昆明　650034

基金项目: 昆明市科学技术局科研基金资助项目（2019-1-S-25318000001263）
详细信息
    作者简介:

    李惠敏(1969～)，女，四川成都人，医学学士，副主任医师，主要从事中西医结合肝病临床工作

    通讯作者:

    刘立，E-mail：liuli197210@163.com

  • 中图分类号: R575.3

Determination of 29 Trace Elements in 32 Cases of Liver Biopsy with Unexplained Liver Injury

  • 1.

    Dept. of Hepatology，The 3rd People’s Hospital of Kunming, Kunming Yunnan 650041

  • 2.

    Dept. of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery，The 1st People’s Hospital of Kunming，Kunming Yunnan 650034

  • 3.

    Dept. of Liver and Gallbladder Surgery，The 2nd Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming Yunnan 650101

  • 4.

    Dept.of Pathology，The 1st People’s Hospital of Kunming, Kunming Yunnan 650034，China

摘要

    摘要
  • 摘要:   目的  测定肝组织中的微量元素，探讨不明原因肝损害的发生与机体微量元素的关系。  方法  对不明原因肝损害患者进行肝组织穿刺术取出肝组织，与对照组正常的肝组织，均采用电感耦合等离子体质谱仪测定29种微量元素含量，进行比较分析。  结果  不明原因肝损害（实验组）与对照组比较，肝组织中的锂7Li、铍9Be、铝27Al、钙44Ca、钛48Ti、钒51V、铬52Cr、钴59Co、镍60Ni、锗73Ge、锶88Sr 、 钼95Mo 、铟115In、锡118Sn、铼185Re、铂195Pt、汞202Hg、铅208Pb、铋209Bi 19种元素均显著增高，差异有统计学意义（P < 0.01)；砷75As、硒82Se均增高，差异有统计学意义（P < 0.05），镉111Cd显著降低 ，差异有统计学意义（P < 0.01），而镁24Mg、锰55Mn、铁57Fe、铜63Cu、锌66Zn、镓71Ga、硒77Se、钡137Ba无显著差异（P > 0.05）。 实验组中铁蛋白和肝组织活检中铁含量的相关性，采用Spearman相关性分析，P < 0.01，铁蛋白与肝组织中铁呈正相关关系。   结论  不明原因肝损害患者的肝组织中微量元素升高，表明这些微量元素代谢异常可能为不明原因肝损害的原因之一，或在肝病的发生、发展过程中起一定的作用。肝病理检查及肝组织微量元素测定为实验组患者明确找到了肝损害的病因。铁蛋白与肝组织中铁含量呈正相关。
    Abstract:   Objective  To determine trace elements in liver tissue and to explore the relationship between the occurrence of liver injury with unknown causes and trace elements in the body.   Methods  The liver tissue of patients with liver injury of unknown causes was obtained by liver biopsy. The content of 29 trace elements was determined by inductively coupled plasma mass spectrometry （ICP-MS） and were compared with the normal liver tissue of the control group.   Results   Compared with the control group, 19 elements including lithium, beryllium, aluminum, calcium, titanium, vanadium, chromium, cobalt, nickel, germanium, strontium, molybdenum, indium, tin, rhenium, platinum, mercury, lead, bismuth were significantly increased （P < 0.01）. Arsenic and selenium increased （P < 0.05）, and cadmium significantly decreased （P < 0.01）. However, there were no significant differences in magnesium, manganese, ferrum, copper, zinc, gallium, selenium and barium （P > 0.05）. Spearman correlation analysis showed ferritin was positively correlated with iron content in liver tissue.   Conclusion  The increase of trace elements in liver tissue of patients with liver injury of unknown cause indicated that abnormal metabolism of trace elements might be one of the causes of liver injury of unknown causes or play a certain role in the occurrence and development of liver disease. By examination of liver pathology and determination of trace elements in liver tissue, the causes of liver damage in the experimental group were clearly found. Ferritin was positively correlated with iron content in liver tissue.
    • HTML全文

  • 结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病，2021年全球结核病报告显示[1]：2020年全球新发结核病患者987万，发病率127/10万。我国估计新发患者84.2万（2019年83.3万），结核病发病率约59/10万（2019年58/10万），我国发病数在全球结核病高负担国家中上升至第2位。结核病属于慢性消耗性疾病，营养不良也是其发病的重要危险因素之一，患者长期的慢性消耗中机体常处于负氮平衡状态，因此易出现不同程度的营养不良[2]。营养不良也是常见的可致免疫功能低下的原因之一，营养不良与发病率和病死率的升高、疾病恢复、获得性耐药及患者生存率和免疫功能等有关[3]。结核病与营养之间着联系复杂且发生发展相互影响，营养支持在结核病的治疗及预后起重要作用[4]。营养与免疫的关系主要有，营养状况是免疫系统和免疫功能的基础，机体的免疫反应和临床疾病可以改变其营养代谢和营养需求量[5]。营养素的缺乏会增加疾病发生风险，影响食物的消化吸收、代谢和机体的生长发育，从而间接影响免疫系统[6-7]。因此，良好的营养状况是免疫系统正常运作和发挥功能的重要保障，也是抵御病原体入侵和促进患者康复的重要因素。目前关于结核病患者营养及免疫方面的实验室指标研究较少，本研究通过对结核病患者实验室相关指标与营养状况及免疫功能的关系及特点分析，可为肺结核病患者开展营养评估和管理，营养支持治疗提供参考。

    1.   资料与方法

    1.1   研究对象

    收集2021年3月至2022年3月在昆明市第三人民医院（昆明结核病防治院）收治的1041例肺结核病患者为研究组，病例多分布在昆明周边地区且覆盖云南全境；其中男性537例，女性504例；年龄8～87岁，中位年龄42岁。另选同期在昆明市第三人民医院健康体检者854例作为对照组，其中男性646例，女性208例；年龄6～85岁，中位年龄41岁。2组在性别构成及年龄分布经卡方检验及曼惠特尼U检验，差异均无统计学意义（χ2 = 0.005，U = 504538；P > 0.05）。

    纳入标准：（1）所有诊断均按照《肺结核诊断标准》（WS288-2017）[8]；（2）经结核菌痰涂片及痰培养等实验室检查和组织病理学检查确诊为肺结核。排除标准：（1）非结核分枝杆菌病；（2）其它感染性疾病；（3）自身免疫性疾病；（4）合并心、肝、肾等重要器官疾病及严重高血压和精神状况欠佳者；（5）患者为妊娠或哺乳期女性。本研究为回顾性分析，不涉及伦理审查。

    1.2   研究方法

    将研究对象的外周血进行总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（Glob）、白/球比（A/G）、血红蛋白（Hb）、前白蛋白（PA）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL-C）、成熟T淋巴细胞（CD3）、辅助性T淋巴细胞（CD4+）、细胞毒性T淋巴细胞（CD8+）、CD4+/CD8+、白细胞介素家族（IL）、肿瘤坏死因子（TNF）、干扰素（IFN）等指标检测，检测严格按照实验说明书在相应仪器上完成。

    1.3   仪器与试剂

    主要仪器∶日立全自动生化分析仪（008AS，日本日立生物科技有限公司），流式细胞仪（Bircyte E6，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司），希森美康全自动血液分析仪（XT-1800，康佳康科技有跟公司）。主要试剂：细胞因子检测试剂盒（批号：211001，青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司），流式细胞检测试剂盒（批号：2021050100，迪亚莱博生物科技有限公司），生化体外诊断试剂（批号：110620，富士胶片和光纯耀化学有限公司）。

    1.4   统计学处理

    采用 SPSS24.0及GraphPad Prism 8.0统计软件分析及作图。正态分布的计量资料采用t检验或方差分析；非正态分布的计量资料以M （P25，P75）表示，采用Mann-Whitney U 检验；多组比较采用Brown-Forsythe或Kruskal-Wallis检验；细胞因子整体水平间差异采用GraphPad Prism 8.0 嵌套t检验分析；计数资料以例/百分数（n/%）表示，采用χ2检验；相关性分析采用Spearman进行；以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2.   结果

    2.1   对照组与研究组营养及免疫相关指标比较

    与对照组比较，研究组营养及免疫相关实验室指标Hb、TP、Alb、Glob、A/G、PA、TC、TG、HDL、LDL、CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+、CD19+B、NK、NKT 表达显著降低，差异均有统计学意义（P < 0.05）；细胞因子IL-1β、IL-8、IL-17水平显著升高，IL-4、IL-10、IL-12p70、IFN-γ水平显著降低，差异均有统计学意义（P < 0.05），见表1。

    表  1  对照组和研究组相关检测指标水平比较 [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    Table  1.  Comparison of relevant detection index levels in controland study group [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    相关指标对照组（n = 854）研究组（n = 1041）t'/UP
    Hb（g/L） 155.8 ± 16.74 120.4 ± 21.88 27.75 < 0.001*
    TP（g/L） 74.40 ± 5.864 66.9 ± 7.674 28.64 < 0.001*
    Alb（g/L） 42.97 ± 4.457 37.42 ± 5.516 28.52 < 0.001*
    Glob（g/L） 31.43 ± 5.953 28.35 ± 6.061 12.67 < 0.001*
    A/G 1.426 ± 0.356 1.369 ± 0.328 4.035 < 0.001*
    PA（mmol/L） 300.5 ± 87.29 222.6 ± 70.51 23.02 < 0.001*
    TC（mmol/L） 4.634 ± 1.042 4.193 ± 0.982 10.79 < 0.001*
    TG（mmol/L） 1.22（0.830，1.960） 1.06（0.790，1.465） 637362 < 0.001*
    HDL（mmol/L） 1.31（1.100，1.540） 1.02（0.830，1.220） 367655 < 0.001*
    LDL（mmol/L） 3.00（2.470，3.560） 2.64（2.140，3.160） 553012 < 0.001*
    CD3+T（个/μL） 1202 ± 499.1 1086 ± 456.4 963035 < 0.001*
    CD4+T（个/μL） 704.5 ± 308.4 628.3 ± 279.4 951581 < 0.001*
    CD8+T（个/μL） 460.6 ± 234.5 429.1 ± 217.8 1033269 < 0.001*
    CD4+/CD8+ 1.720 ± 0.763 1.644 ± 0.746 1049776 0.003*
    CD19+B （个/μL） 246.9 ± 163.4 218.3 ± 158.9 285140 < 0.001*
    NK （个/μL） 241.7 ± 169.1 207.1 ± 142.8 277918 < 0.001*
    NKT （个/μL） 194.0（135.3，299.0） 74.0（44.0，118.0） 110096 < 0.001*
    IL-1β （pg/mL） 3.30（1.710，6.120） 4.03（1.540，7.420） 1017339 0.005*
    IL-2 （pg/mL） 2.01（1.040，3.363） 1.72（1.080，3.095） 1114912 0.226
    IL-4 （pg/mL） 1.65（1.190，2.520） 1.26（1.020，1.790） 829465 < 0.001*
    IL-5 （pg/mL） 2.13（1.030，3.260） 1.76（1.060，3.038） 1112062 0.106
    IL-6 （pg/mL） 3.33（2.118，5.880） 3.18（1.850，6.505） 979359 0.188
    IL-8 （pg/mL） 1.84（1.080，3.790） 1.85（1.233，4.740） 1068098 0.029*
    IL-10 （pg/mL） 1.33（0.890，2.090） 1.23（0.870，1.720） 1055485 < 0.001*
    IL-12p70 （pg/mL） 1.58（1.220，2.330） 1.48（1.130，2.003） 1031405 < 0.001*
    IL-17 （pg/mL） 1.86（1.280，3.400） 2.26（1.520，4.510） 917365 < 0.001*
    TNF-a （pg/mL） 1.70（1.170，2.650） 1.71（1.040，2.820） 931857 0.224
    IFN-γ （pg/mL） 4.61（2.310，9.843） 3.65（2.350，8.188） 1069329 0.003*
    　　经校正t检验和曼惠特尼U检验，*P < 0.05。
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    2.2   研究组营养相关指标及免疫状况分析

    2.2.1   营养相关指标程度分析

    为了评价研究组与对照组差异有统计学意义的营养及免疫相关指标的表达程度，分析了相关指标低血红蛋白、低白蛋白、高胆固醇、高甘油三酯、低高密度脂蛋白发生率分别为16.98%、59.84%、19.20%、23.42%、62.76%，其程度以轻度和中度为主，重度占比较少，见表2。

    表  2  研究组相关指标程度分析 [n（%）]
    Table  2.  Analysis of the degree of relevant indicators in the study group [n（%）]
    组别低血红蛋白低白蛋白高胆固醇高甘油三酯低高密度脂蛋白
    轻度 60 （41.38） 412 （80.63） 99 （60.36） 126 （63.00） 163 （30.41）
    中度 58 （40.00） 92 （18.00） 56 （34.15） 71 （35.50） 241 （44.96）
    重度 27 （18.62） 7 （1.37） 9 （5.49） 3 （1.50） 132 （24.63）
    合计 145 511 164 200 536
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    2.2.2   免疫指标特征分析

    根据CD4+T细胞分泌的细胞因子特点，可分为I型（Th1型细胞因子：IL-1β、IL-2、TNF-a、IFN-γ）和II型（Th2型细胞因子：IL-4、IL-5、IL-6、IL-10 ）免疫应答，在本研究中肺结核病患者细胞因子水平经嵌套t检验分析，Th1型细胞因子水平表达较Th2型高，I型免疫反应占主导地位（t = 2.506，P < 0.05），见图1。

    图  1  研究组Th1及Th2型免疫反应分析
    *P < 0.05。
    Figure  1.  Analysis of Th1 and Th2 immune responses in the study group
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    2.2.3   营养相关指标与免疫状况相关性分析

    结核病患者营养与免疫相关指标经Spearman相关性分析显示，营养相关指标CHOL、TG、HGB、HDL-C、LDL-C、TP、ALB、GLOB、PA、A/G与淋巴细胞数、细胞因子水平及免疫相关指标CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+、CD19+B、NK、NKT，IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、TNF-a、IFN-a、IFN-γ都呈正相关（r = 0.461、0.262、0.491；P均 < 0.05），见图2。

    图  2  营养相关指标与免疫状况相关性
    A：淋巴细胞数与营养相关指标相关性分析；B：细胞因子水平与营养相关指标相关性分析；C：免疫相关指标与营养相关指标相关性分析；*P < 0.05。
    Figure  2.  The correlation between nutrition-related indicators and immune status
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    2.2.4   不同性别和年龄段营养及免疫相关指标比较

    相关指标在不同性别和年龄段水平分析结果显示，在不同性别中男性TP、TG、NKT水平显著高于女性，TC、CD3+T、CD4+T、CD8+T、IL-1β、IL-4、IL-10、IL-12p70表达显著低于女性，差异均有统计学意义（P < 0.05）；各年龄段相关指标经单因素方差分析，Hb、TC、TG、CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+、IL-1β表达差异均有统计学意义（P < 0.05），其中41-60岁组和≥61岁组患者CD3+T、CD4+T、CD8+T计数较≤20岁组降低，差异有统计学意义（P < 0.05），见表3、表4。

    表  3  不同性别相关检测指标比较 [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    Table  3.  Comparison of relevant test indicators by gender [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    相关指标性别t /UP
    男性 （n = 581）女性 （n = 523）
    Hb（g/L） —
    TP（g/L） 66.76 ± 7.457 65.80 ± 7.646 2.173 0.030*
    Alb（g/L） 37.10 ± 5.410 37.11 ± 5.313 0.014 0.989
    Glob（g/L） 28.22 ± 5.779 28.04 ± 5.345 0.569 0.569
    PA（mmol/L） 223.1 ± 68.67 222.5 ± 71.89 0.138 0.890
    TC（mmol/L） 4.054 ± 0.9732 4.332 ± 0.9711 4.884 < 0.001*
    TG（mmol/L） 1.09（0.830，1.520） 1.04（0.770，1.430） 157520 0.035*
    HDL（mmol/L） 1.02（0.830，1.210） 1.02（0.840，1.230） 152054 0.999
    LDL（mmol/L） 2.60（2.120，3.173） 2.65（2.160，3.160） 150805 0.812
    CD3+T （个/μL） 1049 ± 458.4 1124 ± 451.4 555100 < 0.001*
    CD4+ T（个/μL） 602.2 ± 280.1 655.5 ± 276.2 544894 < 0.001*
    CD8+T （个/μL） 422.7 ± 230.2 435.8 ± 204.1 577473 0.005*
    CD4+/CD8+ 1.638 ± 0.790 1.65 ± 0.698 599054 0.163
    CD19+B （个/μL） 226.5 ± 171.8 210.1 ± 144.4 138840 0.428
    NK （个/μL） 210.1 ± 149.9 204.1 ± 135.2 140958 0.709
    NKT （个/μL） 78.00（45.00，129.0） 70.0（43.00，112.0） 134182 0.046*
    IL-1β （pg/mL） 3.64（1.460，7.150） 4.17（1.623，7.835） 351233 0.026*
    IL-4 （pg/mL） 1.24（1.010，1.715） 1.31（1.035，1.870） 374319 0.011*
    IL-8 （pg/mL） 1.76（1.230，4.615） 1.92（1.243，5.015） 377760 0.381
    IL-10 （pg/mL） 1.18（0.840，1.680） 1.28（0.900，1.780） 368229 0.003*
    IL-12p70（pg/mL） 1.42（1.080，1.880） 1.56（1.190，2.098） 354128 < 0.001*
    IL-17 （pg/mL） 2.30（1.470，4.510） 2.18（1.520，4.520） 138157 0.593
    IFN-γ （pg/mL） 3.45（2.200，8.660） 3.84（2.380，9.090） 382754 0.225
    　　经t检验和曼惠特尼U检验，*P < 0.05。
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    表  4  不同年龄段相关检测指标比较 [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    Table  4.  Comparison of relevant test indicators in different age groups [$ \bar x \pm s$/M（P25，P75）]
    相关指标年龄组 （岁）
    ≤20 （n = 129）21～40 （n = 426）41～60 （n = 311）≥61 （n = 175）F/HP
    Hb（g/L） 118.9 ± 19.56 117.9 ± 21.31 125.3 ± 21.15# 118.5 ± 24.28 8.010 0.046*
    TP（g/L） 67.17 ± 8.429 65.77 ± 7.325 66.44 ± 7.741 66.68 ± 7.300 1.034 0.376
    Alb（g/L） 37.18 ± 4.870 37.07 ± 5.344 37.39 ± 5.423 36.60 ± 5.495 0.556 0.644
    Glob（g/L） 28.15 ± 5.276 28.03 ± 5.873 28.06 ± 5.271 28.47 ± 5.541 0.848 0.838
    PA（mmol/L） 221.9 ± 78.24 223.7 ± 71.80 223.2 ± 68.94 220.3 ± 65.48 1.743 0.156
    TC（mmol/L） 3.70 ± 0.7442 4.13 ± 0.840■ 4.36 ± 1.068■ # 4.23 ± 1.113■ 45.50 < 0.001*
    TG（mmol/L） 0.89 ± 0.328 1.11 ± 0.650■ 1.41 ± 0.741■ # 1.33 ± 0.661■ # 99.14 < 0.001*
    HDL（mmol/L） 1.06 ± 0.3176 1.05 ± 0.306 1.04 ± 0.297 1.03 ± 0.298 1.270 0.736
    LDL（mmol/L） 2.74 ± 0.900 2.72 ± 0.775 2.66 ± 0.817 2.69 ± 0.817 2.558 0.465
    CD3+T （个/μL） 1291 ± 540.6 1166 ± 445.6 1021 ± 420.6■ # 880.8 ± 389.5■ # Δ 161.6 < 0.001*
    CD4+ T（个/μL） 712.9 ± 314.5 665.3 ± 281.6 606.6 ± 264.8■ # 520.2 ± 240.4■ # Δ 93.99 < 0.001*
    CD8+T （个/μL） 512.0 ± 238.2 458.4 ± 204.4■ 400.1 ± 215.1■ # 359.8 ± 213.1■ # Δ 135.2 < 0.001*
    CD4+/CD8+ 1.478 ± 0.470 1.57 ± 0.612 1.74 ± 0.821■ # 1.73 ± 0.9733 24.27 < 0.001*
    CD19+B （个/μL） 215.4 ± 198.1 209.5 ± 149.5 233.5 ± 159.0 210.1 ± 151.9 5.430 0.143
    NK （个/μL） 196.1 ± 143.7 201.7 ± 133.2 218.0 ± 148.2 204.7 ± 154.2 6.459 0.091
    NKT （个/μL） 79.50（47.0，108.3） 70.0（42.0，113.0） 78.0（46.0，125.3） 73.0（41.75，137.3） 3.794 0.285
    IL-1β （pg/mL） 4.43（1.533，8.098） 4.41（1.790，7.925） 3.76（1.400，7.400） 2.94（1.350，6.185）# 15.97 0.001*
    IL-4 （pg/mL） 1.28（1.00，1.710） 1.26（1.030，1.793） 1.29（1.020，1.860） 1.25（1.018，1.683） 1.422 0.701
    IL-8 （pg/mL） 2.03（1.320，5.253） 1.83（1.228，4.450） 1.84（1.228，4.733） 1.82（1.230，5.330） 2.545 0.467
    IL-10 （pg/mL） 1.19（0.860，1.710） 1.23（0.860，1.720） 1.25（0.890，1.690） 1.21（0.870，1.780） 0.180 0.981
    IL-12p70（pg/mL） 1.48（1.140，2.020） 1.51（1.155，2.100） 1.48（1.120，1.950） 1.44（1.120，1.850） 3.771 0.287
    IL-17 （pg/mL） 2.16（1.520，3.940） 2.13（1.428，4.290） 2.21（1.525，4.388） 2.65（1.540，5.355） 5.747 0.125
    IFN-γ （pg/mL） 4.44（2.325，9.41） 3.65（2.318，9.04） 3.11（2.190，8.830） 3.81（2.343，9.29） 4.522 0.210
    　　与≤20岁比较，■P < 0.05；与21～40岁组比较，#P < 0.05；与41～60岁组比较，ΔP < 0.05。*P < 0.05。
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    3.   讨论

    结核病的发生虽然与结核分枝杆菌感染密不可分，但也与机体的营养状况及免疫功能有关，当机体免疫力低下时感染结核分枝杆菌的概率增高，同时营养风险也伴随增高，最终导致其感染率和发病率的进一步提高[9-10]。营养不良一般可分为蛋白质营养不良、蛋白质与能量营养不良及混合性营养不良。本研究分析了肺结核病患者血红蛋白、总蛋白、白蛋白、球蛋白、前白蛋白等水平均明显低于正常对照组，可能的原因有：结核菌毒性反应及抗结核药物会引起患者肝功损伤、刺激胃肠道等不良反应从而降低患者食欲，影响到营养素的摄入及合成；结核病患者病程较长，且机体处于慢性消耗的状态，分解代谢增加，使营养不良发生的几率也随之增加。血清白蛋白水平作为反映营养状况的一个重要指标，也有将白蛋白用于结核病的免疫疗法[11]，而低蛋白质等营养不良还可降低免疫细胞的功能，使机体免疫力低下，导致病情反复不易控制，增加患者治疗次数最终形成恶性循环[12]。因此在本研究肺结核病患者易发生蛋白质-能量营养不良，这与柯学等[13]的研究一致，且程度相对较轻。同时在中老年患者中胆固醇和甘油三酯偏高，要警惕该类患者合并心血管疾病的风险。

    肺结核患者的免疫以细胞免疫为主，其中CD4+T淋巴细胞起主导作用，其不仅可分泌多种细胞因子促进免疫应答，还可以通过诱导和促进T淋巴细胞的增值分化、B淋巴细胞分泌抗体及巨噬细胞活化等[14]，且分泌的细胞因子在结核病的发病及免疫机制中也起着至关重要的作用[15]。本研究中，研究组CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD19+B、NK、NKT等细胞绝对值均低于对照组，说明机体营养状况较差时其免疫力下降会导致淋巴细胞表达降低，这与翟云霞等[16]研究一致，细胞因子水平中，促炎因子IL-1β、IL-8、IL-17水平较正常组高，抗炎因子IL-4、IL-10水平较低，提示结核病患者处于较高的炎症状态。同时笔者分析了外周血Th1及Th2型细胞因子水平整体较对照组低，但Th1型降低水平不如Th2型明显，这也提示在本研究中肺结核患者以Th1型免疫反应为主。当然外周血Th1和Th2型免疫反应在结核病的病程中维持动态平衡，通过不同的作用机制影响其发生发展[17]，使结核分枝杆菌既能实现免疫逃避，又不对机体造成严重损害，因此有效控制Th1和Th2型免疫反应的平衡，也是防治结核病的重要措施。

    通过对不同性别和年龄段的肺结核病患者免疫状况分析，结果显示CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞绝对值及IL-1、IL-4、IL-10、IL-12p70水平女性均较男性高，可能的原因是女性的免疫应答比男性强，且相对于男性，女性在一些抵抗传染病方面具有发病率低、病程弱的特点[18]。同时CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞绝对数在41～60岁组和≥61岁组较青壮年低，且与年龄成反比，可能因随着年龄的增长，机体免疫系统的功能降低，使其不能正常发挥保护作用，因此要注意老年结核病患者免疫状况。另外，笔者对结核病患者营养状况及免疫功能相关性进行了分析，发现营养相关指标与淋巴细胞数、细胞因子水平及免疫相关指标都呈正相关，这也提示营养素的缺乏会间接影响免疫系统[19]。因此评估肺结核患者的营养状态与免疫功能之间的关系，有助于结核病的早期干预，在临床治疗的同时应重视其营养状况。当然，本研究也存在一些不足之处，作为回顾性研究，缺乏患者的临床资料，在今后的研究中将大样本实验室资料与临床资料紧密结合，使研究更加系统和全面。

    综上所述，血清蛋白水平、CD4+T、CD8+T等淋巴细胞数及细胞因子是肺结核病患者营养状况和免疫功能的重要参考指标，这些指标特别是联合指标可简单、方便地为临床用来评估肺结核患者的营养和免疫状态，可对肺结核患者进行评估和干预及结核病的预防和治疗起到积极作用。

  • 表  1  实验组与对照组肝组织中的微量元素含量（μg/g）

    Table  1.   The concentration of trace elements in liver tissue of experimental group and control group （μg/g ）

    元素对照组M（P25，P75）实验组M（P25，P75）ZP
    锂Li7 0.415 （0.166，0.562） 1.380 （0.653，2.838） −4.034 < 0.001**
    铍Be9 0.031 （0.017，0.043） 0.807 （0.339，1.284） −5.191 < 0.001**
    镁Mg24 191.410 （116.950，253.097） 134.812 （82.114，232.670） −1.343 0.179
    铝Al27 91.708 （60.774，128.017） 205.687 （79.968，293.438） −3.137 0.002**
    钙Ca44 31.559 （19.419，42.835） 121.298 （53.201，331.890） −4.494 < 0.001**
    钛Ti48 3.311 （2.258，4.655） 15.650 （6.840，23.429） −5.593 < 0.001**
    钒V51 0.056 （0.040，0.090） 0.469 （0.166，0.894） −5.560 < 0.001**
    铬Cr52 0.750 （0.4298，1.199） 3.041 （1.965，5.828） −5.699 < 0.001**
    锰Mn55 4.544 （2.759，5.413） 3.583 （2.622，8.520） −4.02 0.688
    铁Fe57 1104.256 （872.058，1902.449） 1092.648 （712.147，1709.335） −0.715 0.474
    钴Co59 0.213 （0.178，0.251） 0.780 （0.350，4.161） −4.743 < 0.001**
    镍Ni60 1.739 （1.004，2.467） 8.945 （4.652，18.341） −5.496 < 0.001**
    铜Cu63 39.023 （23.287，47.266） 44.792 （26.534，60.657） −1.356 0.175
    锌 Zn66 140.601 （101.656，182.848） 95.770 （57.136，181.653） −1.574 0.116
    镓Ga71 0.394 （0.232，0.640） 0.326 （0.116，0.668） −0.487 0.626
    锗Ge73 0.044 （0.032，0.079） 0.162 （0.057，0.361） −3.223 0.001 **
    砷 As75 0.857 （0.436，1.596） 1.923 （0.475，4.566） −2.080 0.038 *
    硒Se77 1.407 （0.950，2.377） 1.646 （0.899，2.204） −0.315 0.753
    硒Se82 0.892 （0.589，1.237） 1.317 （0.701，2.850） −2.277 0.023*
    锶Sr88 1.527 （0.841，2.135） 3.305 （1.459，4.520） −3.758 < 0.001**
    钼Mo95 2.168 （1.506，2.790） 3.206 （1.749，7.236） −2.637 0.008
    镉Cd111 6.818 （2.942，10.272） 1.408 （0.660，1.731） −5.364 < 0.001**
    铟Ln115 0.004 （0.002，0.006） 0.108 （0.075，0.497） −5.892 < 0.001**
    锡Sn118 0.633 （0.359，0.836） 4.994 （2.015，36.284） −4.136 < 0.001**
    钡Ba137 50.791 （27.999，63.054） 52.746 （27.407，85.671） −0.752 0.452
    铼Re185 0.000 （0.000，0.001） 0.143 （0.028，0.340） −5.122 < 0.001**
    铂Pt195 0.005 （0.003，0.010） 0.259 （0.095，0.428） −4.928 < 0.001**
    汞Hg202 0.281 （0.167，0.378） 5.140 （2.275，10.034） −4.774 < 0.001**
    铅Pb208 3.927 （3.007，6.485） 16.921 （8.302，30.566） −5.034 < 0.001**
    铋Bi209 0.217 （0.148，0.557） 0.895 （0.525，2.507） −3.689 < 0.001**
    　　*P < 0.05， **P < 0.01。
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    表  2  实验组与对照组肝组织中的微量元素升高及降低例数[n（%）]

    Table  2.   The number of trace elements in liver tissue increased and decreased in experimental group and control group [n（%）]

    元素名参数（P25，P75）实验组对照组增高降低
    实检n增高n（%）降低n（%）实检n增高n（%）降低n（%）χ2Pχ2P
    锂7Li （0.166，0.562） 27 13 （48.148） 3 （11.111） 33 5 （15.152） 3 （9.091） 7.699 0.006** − 0.796
    铍9Be （0.017，0.043） 18 13 （72.222） 2 （11.111） 26 7 （26.923） 5 （19.231） 8.803 0.003** − 0.469
    镁24Mg （116.950，253.097） 31 4 （12.903） 10 （32.258） 35 8 （24.242） 8 （24.242） 1.095 0.295 0.732 0.392
    铝27Al （60.774，128.017） 31 19（61.290） 5（16.129） 33 5 （15.150） 10（30.303） 14.518 < 0.001** 1.790 0.181
    钙44Ca （19.419，42.835） 32 25（78.125） 3 （9.375） 35 4 （11.428） 10（28.571） 30.291 < 0.001** 3.939 0.047
    钛48Ti （2.258，4.655） 30 26（86.667） 1 （3.333） 35 7 （20.000） 9 （25.714） 28.725 < 0.001** − 0.016*
    钒51V （0.040，0.090） 30 24（80.000） 1 （3.333） 33 6 （18.182） 5 （15.152） 24.075 < 0.001** − 0.197
    铬52Cr （0.4298，1.199） 32 24（75.000） 2 （6.250） 35 8 （22.857） 8 （22.857） 18.216 < 0.001** − 0.086
    锰55Mn （2.759，5.413） 32 12（37.500） 11 （34.375） 35 5 （14.286） 9 （25.714） 4.758 0.029* 0.599 0.439
    铁57Fe （872.058，1902.449） 32 6（18.750） 14 （43.750） 35 8 （22.857） 9 （25.714） 0.171 0.680 2.412 0.120
    钴59Co （0.178，0.251） 31 22 （70.968） 6 （19.355） 32 6 （18.750） 6 （18.750） 17.389 < 0.001** 0.004 0.951
    镍60Ni （1.004，2.467） 30 23 （76.667） 2 （66.667） 31 10（32.258） 6 （19.355） 12.108 0.001** − 0.255
    铜63Cu （23.287，47.266） 32 17 （53.125） 5 （15.625） 35 6 （17.143） 8 （22.857） 10.289 0.001** 0.559 0.455
    锌66Zn （101.656，182.848） 31 9 （29.032） 14 （45.161） 35 7 （20.000） 9 （25.714） 0.730 0.393 2.738 0.098
    镓71Ga （0.232，0.640） 25 5（20.000） 12 （48.000） 35 8 （22.857） 8 （22.857） 0.070 0.791 4.149 0.042
    锗73Ge （0.032，0.079） 27 12 （44.444） 6 （22.222） 34 7 （20.588） 8 （23.529） 3.994 0.046* 0.015 0.904
    砷75As （0.436，1.596） 28 8 （28.571） 8 （28.571） 31 5 （16.129） 6 （19.355） 1.326 0.250 0.691 0.406
    硒77Se （0.950，2.377） 31 7 （22.581） 7 （22.581） 35 9 （25.714） 8 （22.857） 0.088 0.767 0.001 0.979
    硒82Se （0.589，1.237） 31 16 （51.613） 4 （12.903） 35 7 （20.000） 9 （25.714） 7.236 0.007** 1.706 0.192
    锶88Sr （0.841，2.135） 31 18 （58.065） 5 （16.129） 35 6 （17.143） 9 （25.714） 11.897 0.001** 0.904 0.342
    钼95Mo （1.506，2.790） 30 13 （43.333） 9 （30.000） 34 7 （20.588） 8 （23.529） 3.838 0.050 0.342 0.559
    镉111Cd （2.942，10.272） 31 1 （3.225） 25 （80.645） 35 7 （20.000） 7 （20.000） − 0.058 24.207 < 0.001**
    铟115In （0.002，0.006） 20 16 （80.000） 1 （5.000） 27 6 （22.222） 9 （33.33） 15.405 < 0.001** − 0.029*
    锡118Sn （0.359，0.836） 28 18 （64.286） 3 （10.714） 14 2 （14.286） 2 （14.286） 9.355 0.002** − 0.736
    钡137Ba （27.999，63.054） 31 11（35.484） 11 （35.484） 35 2 （5.714） 9 （25.714） 9.211 0.002** 0.743 0.389
    铼185Re （0.000，0.001） 22 17 （77.272） 0 （0.000） 27 4 （14.815） 0 （0.000） 19.310 < 0.001**
    铂195Pt （0.003，0.010） 28 24 （85.714） 1 （3.571） 17 2 （11.764） 2 （11.764） 23.712 < 0.001** − 0.547
    汞202Hg （0.167，0.378） 26 17 （65.385） 4 （15.385） 34 6 （17.647） 7 （20.688） 14.203 < 0.001** − 0.742
    铅208Pb （3.007，6.485） 32 22 （68.750） 3 （9.375） 35 6 （17.143） 8 （22.857） 18.302 < 0.001** 2.214 0.137
    铋209Bi （0.148，0.557） 28 16 （57.143） 6 （21.429） 31 2 （6.452） 9 （29.032） 17.831 < 0.001** 0.449 0.503
    　　*P < 0.05，**P < 0.01。
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    表  3  中毒性肝炎组肝组织的微量元素升高情况 （μg/g）

    Table  3.   The increase of trace elements in liver tissues in the group of toxic hepatitis （μg/g）

    元素对照组M（P25，P75）中毒性肝炎组M（P25，P75）ZP
    钙44Ca 31.559 （19.419，42.835） 357.595 （38.793，511.147） −2.556 0.011*
    钛48Ti 3.311 （2.258，4.655） 17.322 （7.353，51.076） −3.251 0.001**
    钒51V 0.056 （0.040，0.090） 0.280 （0.110，1.115） −3.153 0.002**
    铬52Cr 0.750 （0.4298，1.199） 5.859 （2.623，12.030） −3.415 0.001**
    钴59Co 0.213 （0.178，0.251） 1.261 （0.247，3.134） −2.221 0.026*
    镍60Ni 1.739 （1.004，2.467） 10.018 （8.526，18.814） −3.545 < 0.001**
    镉11Cd 6.818 （2.942，10.272） 0.941 （0.639，2.132） −2.924 0.003*
    铟115In 0.004 （0.002，0.006） 0.6335 （0.063，0.000） −2.325 0.020*
    铼185Re 0.000 （0.000，0.001） 0.000 （0.000，0.000） −2.336 0.020*
    铂195Pt 0.005 （0.003，0.010） 0.418 （0.093，3.058） −3.174 0.002**
    铅208Pb 3.927 （3.007，6.485） 25.501 （19.160，40.517） −3.415 0.001**
    　　*P < 0.05， **P < 0.01 。
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    表  4  实验组铁蛋白和肝组织活检中铁含量及相关性比较

    Table  4.   Comparison of iron content and correlation between ferritin and liver biopsy in experimental group

    　项目P50P25P75
    铁蛋白（ng/mL） 300.90 161.78 914.15
    Fe [ppb] 1244.01 950.96 2032.84
    rS 0.888
    P < 0.001**
    　　**P < 0.01。
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-01-01
  • 网络出版日期:  2022-03-15
  • 刊出日期:  2022-04-25

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摘要
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  • 1.   资料与方法

  • 1.1   研究对象

  • 1.2   研究方法

  • 1.3   仪器与试剂

  • 1.4   统计学处理

  • 2.   结果

  • 2.1   对照组与研究组营养及免疫相关指标比较

  • 2.2   研究组营养相关指标及免疫状况分析

  • 3.   讨论

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