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额面QRS-T夹角及Tp-e/QTc比值与冠状动脉慢血流现象的相关性研究

周萌 张红珊 葛康辉 张麟 韩雪

周萌, 张红珊, 葛康辉, 张麟, 韩雪. 额面QRS-T夹角及Tp-e/QTc比值与冠状动脉慢血流现象的相关性研究[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(10): 147-152. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221030
引用本文: 周萌, 张红珊, 葛康辉, 张麟, 韩雪. 额面QRS-T夹角及Tp-e/QTc比值与冠状动脉慢血流现象的相关性研究[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(10): 147-152. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221030
Meng ZHOU, Hongshan ZHANG, Kanghui GE, lin ZHANG, Xue HAN. Correlation of Frontal Planar QRS-T and Tp-e/QTc Ratio with Coronary Slow Flow Phenomenon[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(10): 147-152. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221030
Citation: Meng ZHOU, Hongshan ZHANG, Kanghui GE, lin ZHANG, Xue HAN. Correlation of Frontal Planar QRS-T and Tp-e/QTc Ratio with Coronary Slow Flow Phenomenon[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(10): 147-152. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221030

额面QRS-T夹角及Tp-e/QTc比值与冠状动脉慢血流现象的相关性研究

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221030
基金项目: 昆明医科大学第二附属医院院内科技计划基金资助项目(LCYJZX20212018)
详细信息
    作者简介:

    周萌(1980~),女,云南昆明人,主治医师,硕士研究生,主要从事无创性心电生理方面的工作

    通讯作者:

    张红珊,E-mail:13064232902@163.com

  • 中图分类号: R543.3

Correlation of Frontal Planar QRS-T and Tp-e/QTc Ratio with Coronary Slow Flow Phenomenon

  • 摘要:   目的  探讨心电图额面QRS-T夹角和Tp-e/QTc比值与冠状动脉慢血流现象(CSFP)的关系及预测价值。  方法  选取昆明医科大学第二附属医院2019年9月至2021年12月行冠脉造影术检查确诊为CSFP的患者73例为观察组,随机选取同期67例冠脉血流正常患者作为对照组。比较两组患者临床资料、心电图相关参数及实验室检查指标,采用多因素Logistic回归分析影响CSFP发生的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估额面QRS-T夹角及Tp-e/QTc比值对CSFP的预测作用。  结果  与对照组比较,额面QRS-T 夹角、Tp-e间期、Tp-e/QT比值、Tp-e/QTc比值、体重指数(BMI)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、肌酐(Cr)均较高,差异有统计学意义(P < 0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,BMI(OR = 1.137,P = 0.014)、Cr(OR = 1.048,P = 0.004)额面QRS-T夹角(OR = 1.020,P = 0.003)、Tp-e/QTc 4分位(IQR)等级(OR = 1.960,P < 0.001)是影响CSFP的独立相关因素。ROC曲线分析显示,额面 QRS-T夹角对CSFP的最佳截断值为45.5度,曲线下面积为 0.706,灵敏度和特异度分别为 56.2%和80.1%;Tp-Te/QTc 比值的CSFP的最佳截断值为0.22,曲线下面积为 0.68,灵敏度和特异度分别为 66%和69%。  结论  额面 QRS-T夹角和Tp-e/QTc比值与CSFP存在相关性,对CSFP具有一定的预测价值。
  • 三七(Panax notoginseng (Burk.) F. H. chen ex C. H.),又名参三七、田七等,为五加科多年生草本植物,是我国名贵中药材。三七中主要有效成分包括:三七多糖,三七皂苷、黄酮类、氨基酸、挥发油等[1]。据现有研究发现三七多糖具有调节免疫功能[2]、抗炎[3]、降血糖[4]、降血脂[5]、抗氧化[6]、抗衰老[7]等药理作用,刘平平等[8]发现从三七发酵液提取的三七多糖对DPPH自由基、羟自由基等具有一定清除作用。现已有研究表明,天然多糖如:银耳多糖、山药多糖、灵芝多糖等具有良好的吸湿保湿性能,在日化产品中具有良好的应用前景[9],而三七多糖是否具有吸湿、保湿的生物活性尚未见报道。

    三七药渣是三七在工业中提取三七总皂苷后的废渣[10],其中三七多糖、三七素等成分仍具有药用价值却不能得到有效利用。本课题组前期采用水提醇沉法,从工业三七药渣中提取三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow成功分离出中性多糖和酸性多糖,已证实三七药渣中提取的三七多糖具有多种生理活性[11-12],且具有良好的安全性[13]。本文拟在前期研究基础上,首次考察从药渣中提取的三七粗多糖及纯化后各组分是否具有吸湿、保湿及体外抗氧化活性,为三七多糖用于日化产品、保健食品、药品研发奠定基础。

    三七药渣(云南三七科技提供);D-无水葡萄糖对照品、D-半乳糖醛酸对照品、DPPH、ABTS(上海源叶生物);甘油、抗坏血酸(VC)、七水合硫酸亚铁(广东光华科技);海藻酸钠(上海易恩);DEAE Sepharose Fast Flow填料(美国GE Healthcare);透析袋(合肥白鲨生物科技);其余试剂均为国产分析级纯。

    BSA224S万分之一分析天平(德国Sartorius公司);DK-98- II水浴锅(天津市泰斯特);RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣);H1850高速离心机(湖南湘仪);SCIENTZ-10ND 冷冻干燥机(宁波新芝);玻璃干燥器(四川蜀玻集团);岛津UV-1900紫外-分光光度计(日本岛津);Bio-rad MODEL 680酶标仪(美国Bio-rad 公司)。

    1.3.1   三七多糖的提取、纯化及含量测定

    采用水提醇沉法从工业三七药渣中提取CPPN,取干燥三七药渣1000 g,加入10倍量超纯水,沸水浴提取6 h,过滤;滤渣加入8倍量超纯水,沸水浴提取6 h,过滤;滤渣继续加入6倍量超纯水,沸水浴提取6 h,过滤。合并3次滤液,8000 r/min离心5 min,取上清液,80℃减压浓缩,至原体积的1/10后,加入滤液3倍体积的无水乙醇,放4 ℃下醇沉过夜。8000 r/min离心5 min,弃去上清液,收集沉淀。分别用无水乙醇、乙醚洗涤沉淀三次后加入适量超纯水复溶,冷冻干燥,即得CPPN。采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换填料对CPPN进行纯化,取CPPN 600 mg,溶于20 mL超纯水中,8000 r/min离心10 min去除不溶物,经0.45 μm微孔滤膜过滤后上样,以超纯水、0.1、0.2、0.3 M NaCl溶液对其进行梯度洗脱,收集洗脱液,5 mL/管。硫酸蒽酮法跟踪检测,绘制洗脱曲线其中管数为横坐标,吸光度值为纵坐标。依据洗脱曲线,合并各组分,80℃减压浓缩至原体积1/10,超纯水透析36 h(MwCO 14000Da),每4 h换一次水。透析结束后,真空冷冻干燥,分离得到的各组分依次命名为NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ。采用硫酸蒽酮法,测定三七多糖中性糖含量,间羟基联苯法测定三七多糖糖醛酸含量[14]

    1.3.2   吸湿/保湿能力考察

    参照蔡婉静等[15]在研究中采用的方法,以常用的保湿剂甘油和海藻酸钠对照,考察CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的吸湿和保湿能力。(1)吸湿性。准确称取CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ、甘油和海藻酸钠各0.5 g于称量瓶中,平行3份,将其放入置有饱和碳酸钾溶液(RH43%)和饱和硫酸铵溶液(RH81%)的干燥器内,室温下放置,并在4、8、12、24、36 h分别称量样品放置前重量(W0)和放置后的重量(W1),吸湿能力按照公式(1)计算:

    $$ {\text{吸湿性}}(\%)=({\rm{W}}_0-{\rm{W}}_1)\times100/{\rm{W}}_0 $$ (1)

    (2)保湿性。准确称取CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ、甘油和海藻酸钠各0.5 g于称量瓶中,平行3份,并分别加入3倍样品质量的超纯水,转动称量瓶直至样品将水分完全吸收。将称量瓶放入装有干燥完全的硅胶的干燥室内,于室温下放置,并在4、8、12、24、36 h分别称量样品放置前重量(H0)和放置后的重量(H1)。保湿能力按照公式(2)计算:

    $$ {\text{保湿性}}(\%)={\rm{H}}_1 \times100/{\rm{H}}_0 $$ (2)
    1.3.3   抗氧化能力测定

    (1) DPPH自由基清除能力。将维生素C和三七多糖各待测组分用蒸馏水配置成0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL浓度的样液测定时,在96孔板中加入2×10-4 mol/L的DPPH乙醇溶液100 μL,然后加入100 μL待测液,摇匀后,在室温,黑暗处放置30 min,并测定517 nm处的吸光度值At,用乙醇代替DPPH溶液测定本底吸光度值Ar,用超纯水代替样品溶液测得参比溶液吸光度A0[16]。采用Vc作为阳性对照,同一测定设计3个平行,清除率按公式(3)计算:

    $$ {\rm{DPPH}}{\text{自由基清除率}}(\%)=[1-({\rm{A}}_{\rm{t}}-{\rm{A}}_{\rm{r}})/{\rm{A}}_0]\times100 $$ (3)

    (2) ABTS+自由基清除能力。将5 mL的7 mmol/L ABTS和88 μL的140 mmol/L K2S2O8混合,常温避光条件下静置过夜(12 h),形成ABTS+自由基储备液。使用前用无水乙醇稀释成在734 nm波长下的吸光度为0.7±0.02工作液[17]。测定时,在96孔板中加入ABTS+工作液100 μL和100 μL待测液,振荡混匀,10 min后测定反应液在734 nm处的吸光值At,用乙醇代替ABTS+工作液测定本底吸光度值Ar,用超纯水代替样品溶液测得参比溶液吸光度A0。采用Vc作为阳性对照,同一测定设计3个平行,清除率由公式(4)计算:

    $$ {\rm{ABTS}}^+{\text{自由基清除率}}(\%)=[1-({\rm{A}}_{\rm{t}}-{\rm{A}}_{\rm{r}})/{\rm{A}}_0]\times100 $$ (4)

    (3) 羟基自由基清除能力。配置2.25 mmol/LFeSO4水溶液、9 mmol/L水杨酸乙醇溶液,分别取50 μL加入96孔板,取50 μL待测液加入,再加入50 μL 8.80 mmol/L H2O2溶液,37 ℃反应30 min,测定510 nm处吸光度At。用超纯水代替H2O2测得对应待测溶液的本底吸光度值Ar,用超纯水代替待测液测得参比溶液吸光度A0[18]。采用Vc作为阳性对照,同一测定设计3个平行,清除率由公式(5)计算:

    $$ {\text{羟基自由基清除率}}(\%)=[1-({\rm{A}}_{\rm{t}}-{\rm{A}}_{\rm{r}})/{\rm{A}}_0]\times 100 $$ (5)

    1 000 g三七药渣采用经水提醇沉法,共提取到34.97g CPPN,得率为3.49 %。采用DEAE Sepharose Fast Flow对CPPN进行纯化,以超纯水、0.1、0.2、0.3 M NaCl溶液洗脱,共得到4个洗脱峰(洗脱曲线见图1),得率分别为27.68%、11.89%、15.41%、21.04%,对CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的含量测定结果如表1所示。

    图  1  DEAE Sepharose Fast Flow洗脱曲线
    Figure  1.  Elution curve with DEAE Sepharose Fast Flow
    表  1  三七多糖的含量测定结果(%)
    Table  1.  Determined the contents of Panax notoginseng polysaccharide(%)
    样品中性糖含量糖醛酸含量总糖含量
    CPPN 32.4 36.25 68.65
    NPPN 73.33 - 73.33
    APPNⅠ 48.33 27.5 75.83
    APPNⅡ 21.67 57.92 79.59
    APPNⅢ 13.75 79.58 93.33
    注:总糖含量 = 中性糖含量 + 糖醛酸含量。
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    在RH43%环境中,水分的含量随时间的变化结果如图2所示,三七多糖及各组分的吸湿率均逐渐上升,吸湿率大小依次为甘油>APPNⅢ>海藻酸钠>CPPN>APPNⅡ>APPNⅠ>NPPN,36 h时,吸湿率分别为37.21%、25.50%、23.55%、19.10%、18.43%、16.99%、13.20%。从图3可以看出,在高湿度(RH81%)环境中,在0~12 h,CPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的吸湿率上升较快,12 h~36 h变化缓慢,36 h时,吸湿率大小为甘油>APPNⅢ>海藻酸钠>APPNⅡ>APPNⅠ>CPPN>NPPN,吸湿率大小依次为83.57%、42.58%、39.76%、30.81%、27.80%、24.59%、20.80%。由两图对比显示,APPNⅢ在高湿度和低湿度下都具有良好的吸湿性,其吸湿性高于海藻酸钠。

    图  2  三七多糖在RH43%环境中的吸湿率变化情况
    Figure  2.  Relationship between moisture retention rate and time
    图  3  三七多糖在RH81%环境中的吸湿率变化情况
    Figure  3.  Relationship between moisture retention rate and time

    保湿性考察实验结果如图4,在干燥硅胶环境中,CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ、甘油和海藻酸钠保湿率均持续下降,保湿率大小依次为APPNⅢ>海藻酸钠>CPPN>APPNⅡ>甘油>APPNⅠ>NPPN,在36 h时,保湿率分别为45.64%、40.35%、38.40%、36.15%、35.38%、34.35%、33.59%。

    图  4  三七多糖在干硅胶环境中的保湿率变化情况
    Figure  4.  Relationship between moisture retention rate and time

    图5可知,CPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ对DPPH均具有较好的清除能力,且呈明显的量效关系,当多糖浓度为8 mg/mL时,CPPN对DPPH自由基的清除效果最好,达58.36%,而NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的清除率分别为12.90%、50.66%、37.26%、47.71%。抗氧化活性顺序为CPPN>APPNⅠ>APPNⅢ>APPNⅡ>NPPN。艾于杰等[18]发现纯化后的茶多糖清除DPPH清除能力纯化前强于纯化后,推测粗多糖对DPPH的清除作用可能为各组分结合后协同作用。本研究中三七粗多糖清除效果最好,推测其原因为七粗多糖中各组分协同发挥抗氧化作用。

    图  5  三七多糖对DPPH的清除能力
    Figure  5.  Scavening rate of DPPH of Panax notoginseng polysaccharide

    ABTS 可被活性氧氧化,生成蓝绿色的ABTS+自由基,在734 nm 处有特征吸收,当抗氧化剂存在时,自由基被抗氧化剂清除时,蓝绿色会逐渐褪色或消失[19]。三七多糖及纯化后各组分对ABTS+的清除效果图6所示,随着多糖浓度的增大,其清除ABTS+自由基的效果也不断增强。当多糖浓度为8 mg/mL时,CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的清除率分别为95.91%、36.41%、87.37%、68.34%、83.34%,抗氧化活性顺序为CPPN>APPNⅠ>APPNⅢ>APPNⅡ>NPPN。三七粗多糖对ABTS+自由基的清除效果最好,分离纯化得到的4个组分中,APPNⅠ的清除效果较强,NPPN的清除能力较弱。有研究表明,多糖对ABTS+自由基的清除能力与DPPH自由基的清除能力具有一致性[20],本研究中CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ对ABTS+的清除能力与对DPPH自由基清除能力趋势一致。

    图  6  三七多糖对ABTS+的清除能力
    Figure  6.  Scavening rate of ABTS+ of Panax notoginseng polysaccharide

    羟基自由基是机体内攻击性最强的活性氧,多糖是具有多羟基的醛或多羟基的酮,该结构上带有还原性的半缩醛羟基,使自由基被还原,从而阻止自由基进行连锁反应[21]。由图7可知,各浓度的VC对羟自由基的清除率最高,不同浓度的CPPN及纯化后各组分对羟自由基均具有一定的清除作用,随多糖浓度的升高,对羟自由基的清除能力也不断升高,当CPPN浓度为8 mg/mL,CPPN的清除能力为98.95%,与VC接近。同一浓度下,抗氧化活性顺序为CPPN>APPNⅢ>APPNⅡ>APPNⅠ>NPPN。

    图  7  三七多糖对·OH的清除能力
    Figure  7.  Scavening rate of ·OH of Panax notoginseng polysaccharide

    本文采用水提醇沉法成功从三七药渣中提取出三七多糖,并经过DEAE Sepharose Fast Flow对其纯化,成功分离出NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ,并对CPPN、NPPN、APPNⅠ、APPNⅡ、APPNⅢ的吸湿和保湿性能首次初步探究,发现APPNⅢ的吸湿性能优于海藻酸钠,其保湿性能也优于海藻酸钠及常用保湿剂甘油,表明APPNⅢ是一种优良的保湿剂。

    自由基,是生物体新陈代谢的正常产物,在正常的生理状态下,人体内自由基的产生处于动态平衡中,受体内各种内源性抗氧化网络的严格调控。当机体平衡一旦被打破,体内自由基过多时,自由基会引发氧化应激损伤,诱导各种疾病的发生和发展,如炎症、肿瘤等疾病。现有研究表明,诸多植物多糖具有抗氧化活性,如:枸杞多糖[22]、茯苓多糖[23]。多糖的抗氧化活性常与多糖分子量、糖基组成、糖苷键类型、高级结构等相关[18]。三七多糖体外抗氧化活性研究显示:三七粗多糖与分离纯化后的各组分比较,其对三种自由基的清除效果最佳,抗氧化能力最强,推测三七粗多糖中各组分多糖的抗氧化性有协同作用;纯化后的三种酸性多糖的抗氧化活性均强于中性多糖,说明三七多糖的抗氧化性与其酸性基团密切相关。综上,通对三七多糖具有吸湿、保湿性能及体外抗氧化活性,表明三七多糖具有应用于日化行业、保健食品、药品的潜力,为工业三七药渣的综合利用提供了新思路,有利于三七资源的综合利用。

  • 图  1  额面QRS-T夹角、T-pe/QTc比值及两者联合诊断的预测CSFP的ROC曲线

    Figure  1.  Frontal QRS-T angle,T-pe/QTc ratio and their combined diagnosis predict the ROC curve of CSFP

    表  1  2组的一般临床资料比较[$ \bar x \pm s$/n(%)/M(P25,P75)]

    Table  1.   Comparison of general clinical data between the two groups[$ \bar x \pm s$/n(%)/M(P25,P75)]

    一般资料NCF组(n = 67)CSFP组(n = 73)t/χ2/ZP
    年龄(岁) 57.18 ± 11.92 56.29 ± 8.10 0.521 0.603
    性别 女性 31 ( 46.3) 42 (57.5) 1.354 0.245
    男性 36 ( 53.7) 31 (42.5)
    糖尿病 是 10 ( 14.9) 22 (30.1) 3.762 0.052
    57 ( 85.1) 51 (69.9)
    高血压 是 28 ( 41.8) 34 (46.6) 0.159 0.690
    39 ( 58.2) 39 (53.4)
    收缩压 122.00[116.00,128.00] 118.00[114.00,126.00] −0.895 0.371
    舒张压 76.00[69.00,83.00] 77.00[71.00,86.00] −1.198 0.231
    吸烟 是 23 ( 34.3) 21 (28.8) 0.277 0.599
    44 ( 65.7) 52 (71.2)
    BMI 22.60[20.15,24.90] 25.00[22.99,27.64] 2.203 < 0.001#
    LVEF (%) 66.34 ± 5.24 66.84 ± 3.98 −0.629 0.53
    FBG(mmol/L) 5.85 ± 1.95 5.60 ± 1.91 0.772 0.441
    TC (mmol/L) 4.51 ± 1.16 4.33 ± 1.04 0.947 0.346
    TG (mmol/L) 1.77 ± 1.04 1.62 ± 0.92 0.870 0.386
    HDL-c (mmol/L) 1.22 ± 0.30 1.22 ± 0.38 −0.107 0.915
    LDL-c (mmol/L) 2.75 ± 0.95 2.61 ± 0.90 0.883 0.379
    Cr(µmol/L) 61.00[53.50,68.00] 64.00[56.00,83.0] −2.684 0.007#
    UA (µmol/L) 347.00[287.50,411.50] 348.00[302.00,392.0] −0.236 0.814
    RBC (1012/L) 4.61 [4.38,4.89] 4.83 [4.56,5.12] −2.906 0.004#
    Hb (g/L) 139.00[133.50,148.00] 147.00[139.00,156.0] −3.571 0.002#
    HCT (L/L) 0.42 [0.39,0.45] 0.44 [0.42,0.46] 1.815 0.000#
    RDW (fL) 43.65 ± 3.79 44.28 ± 4.74 −0.870 0.386
    PLT (109/L) 226.51 ± 64.05 234.16 ± 81.98 −0.612 0.542
    PDW (%) 13.47 ± 2.58 13.72 ± 2.83 −0.541 0.589
    PCT (%) 0.24 ± 0.07 0.25 ± 0.07 −0.856 0.393
      #P < 0.05。
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    表  2  2组的心电图指标比较[$ \bar x \pm s$/n(%)/M(P25,P75)]

    Table  2.   Comparison of ECG parameters between groups[$ \bar x \pm s$/n(%)/M(P25,P75)]

    参数NCF组(n = 67)CSFP组(n = 73)t/χ2/Zp
    HR(次/min) 70.16 ±9.19 69.75± 10.71 0.243 0.809
    额面QRS-T夹角(度) 20.00 [10.00,36.00] 49.00 [19.00,76.00] −4.773 < 0.001
    QT间期 (ms) 400.00[373.50,426.0] 400.00[370.00,420.00] −5.548 0.584
    QTc间期 (ms) 423.00[408.00,436.0] 418.00[396.00,436.00] −1.237 0.216
    T-pe间期(ms) 80.00 [79.50,92.50] 90.00 [80.00,100.00] −3.000 0.003
    T-pe/QT 0.20 [0.18,0.21] 0.22 [0.20,0.24] −4.305 < 0.001
    T-pe/QTc 0.21 [0.19,0.23] 0.23 [0.21,0.26] −3.709 < 0.001
      #P < 0.05。
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    表  3  多因素二元Logistic回归分析结果

    Table  3.   The result of multivariate binary regression analysis

    变量BS.E.WaldPOR95% CI
    BMI 0.117 0.058 4.098 0.043 1.124 1.003~1.267
    Cr 0.040 0.016 6.260 0.012 1.041 1.009~1.073
    额面QRS-T夹角 0.024 0.007 12.253 0.000 1.024 1.010~1.038
    T-pe/QTc(IQR)等级 0.562 0.185 9.202 0.002 1.755 1.220~2.524
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-06-13
  • 网络出版日期:  2022-10-09
  • 刊出日期:  2022-10-31

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