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葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

詹乐 马瑞堉 万妮 莫礼文 陈荟颖 张黎

詹乐, 马瑞堉, 万妮, 莫礼文, 陈荟颖, 张黎. 葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(11): 36-43. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221129
引用本文: 詹乐, 马瑞堉, 万妮, 莫礼文, 陈荟颖, 张黎. 葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(11): 36-43. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221129
Le ZHAN, Ruiyu MA, Ni WAN, Liwen MO, Huiying CHEN, Li ZHANG. Effects of Puerarin on Th17/Treg Cell Immune Homeostasis and the Expression of Related Transcription Factors in Rats with Periodontitis[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(11): 36-43. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221129
Citation: Le ZHAN, Ruiyu MA, Ni WAN, Liwen MO, Huiying CHEN, Li ZHANG. Effects of Puerarin on Th17/Treg Cell Immune Homeostasis and the Expression of Related Transcription Factors in Rats with Periodontitis[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(11): 36-43. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221129

葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221129
基金项目: 海南省财政科技计划资助项目-海南省2020年重点研发计划社会发展专项基金(ZDYF2020166)
详细信息
    作者简介:

    詹乐(1994~),女,湖北团风人,在读硕士研究生,住院医师,主要从事正畸与牙周病学临床及研究工作

    通讯作者:

    张黎,E-mail:wxw5411@163.com

  • 中图分类号: R781.42;R-332

Effects of Puerarin on Th17/Treg Cell Immune Homeostasis and the Expression of Related Transcription Factors in Rats with Periodontitis

  • 摘要:   目的  探究葛根素对牙周炎大鼠辅助性 T 细胞 17( T helper cell 17,Th17) /调节性 T 细胞 (Regulatory T cell, Treg) 免疫平衡及相关转录因子的影响。  方法  采用分离牙龈、丝线结扎配合龈下注射大肠杆菌内毒素(E-LPS)法建立大鼠牙周炎模型。将大鼠随机分为正常对照组(A组)、牙周炎模型组(B组)、200 mg/(kg·d)葛根素组(C组)。HE 染色观察牙周组织病理形态学变化。通过Micro-CT对骨生物学参数定量分析牙槽骨吸收情况。流式细胞术、免疫印迹法(western blot,WB) 分别检测牙周组织中 Th17、Treg 细胞比例、白介素-17( IL-17) 、视黄酸相关孤儿受体( RORγt) 、IL-10、叉头状转录因子-3( Foxp3) 蛋白表达。  结果  HE染色中葛根素组大鼠牙根部可见明显新生骨细胞增生,牙周膜可见少量炎症细胞聚集,牙槽骨结构较整齐。Micro-CT显示治疗组大鼠牙槽骨较模型组骨量略有下降,骨质量及强度有所上升。流式细胞术检测全血细胞发现葛根素组的TH17、Treg细胞比例均下降,且TH17/Treg的细胞比例也下降。 IL-10、Foxp3在葛根素组蛋白表达量上调,而IL-17、RORγt在葛根素组蛋白表达量下调,差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  葛根素可缓解牙周炎大鼠牙周组织炎性反应、牙槽骨吸收,通过调节Th17 /Treg 细胞及相关转录因子的表达,使Th17 /Treg 细胞免疫平衡轴往有利于牙周组织愈合方向发展,其作用机制可能与葛根素有效调节Th17 /Treg细胞免疫平衡轴有关。
  • 图  1  各组Micro-CT扫描重建图

    A、B:对照组1、2牙槽骨变化;C:模型组牙槽骨变化;D:葛根素组牙槽骨变化。

    Figure  1.  Micro-CT scan reconstruction for each group

    图  2  HE 染色观察牙周组织形态学特征变化(×100)

    A:对照组;B:模型组;C:葛根素组。

    Figure  2.  Observation of histomorphological changes in periodontal tissue by HE staining (×100)

    图  3  全血细胞中TH17细胞比例

    与对照组比较,**P < 0.01;与模型组比较,##P < 0.01。

    Figure  3.  Percentage of Th17 cells in whole blood

    图  4  全血细胞中Treg细胞比例

    与对照组比较,*P < 0.05;与模型组比较,#P < 0.05。

    Figure  4.  Percentage of Treg cells in whole blood

    图  5  全血细胞中Th17/Treg细胞比例

    与对照组比较,*P < 0.05;与模型组比较,#P < 0.05。

    Figure  5.  Th17/Treg cell ratio in whole blood

    图  6  流式细胞术检测全血细胞中各组Th17细胞比例变化

    A:对照组;B:模型组;C:葛根素组。

    Figure  6.  Change in the proportion of Th17 cells in whole blood detected by flow cytometry

    图  7  流式细胞术检测全血细胞中各组Treg 细胞比例变化

    A:对照组;B:模型组;C:葛根素组。

    Figure  7.  Change in the proportion of Treg cells in whole blood detected by flow cytometry

    图  8  WB 检测 IL-17、RORγt、IL-10、Foxp3 蛋白表达

    Figure  8.  Western blot detection of IL-17,RORγt,IL-10,and Foxp3 protein expression

    图  9  各组牙周组织中IL-10蛋白表达分析图

    与对照组比较,#P < 0.05;与模型组比较,*P < 0.05。

    Figure  9.  Analysis of IL-10 protein expression in periodontal tissues

    图  10  各组牙周组织中IL-17蛋白表达分析图

    与对照组比较,##P < 0.01;与模型组比较,**P < 0.01。

    Figure  10.  Analysis of IL-17 protein expression in periodontal tissues

    图  11  各组牙周组织中Foxp3蛋白表达分析图

    与对照组比较,##P < 0.01;与模型组比较,**P < 0.01。

    Figure  11.  Analysis of Foxp3 protein expression in periodontal tissues

    图  12  各组牙周组织中RORγt蛋白表达分析图

    与对照组比较,##P < 0.01;与模型组比较,*P < 0.05。

    Figure  12.  Analysis of RORγt protein expression in periodontal tissues

    表  1  各组Micro-CT扫描分析后骨体积分数、骨矿物质密度值(n = 12,$ \bar x \pm s $

    Table  1.   BV/TV and BMD values of each group obtained by micro-CT scan analysis (n = 12,$ \bar x \pm s $

    组别BV/TV(%)BMD(g/cm3
    对照组0.720 ± 0.0491004.269 ± 54.644
    模型组0.387 ± 0.0376*894.119 ± 53.789*
    葛根素治疗组0.337 ± 0.0361046.297 ± 54.565
      与对照组比较,*P < 0.05;与模型组比较,P < 0.05。
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-07-15
  • 网络出版日期:  2022-10-29
  • 刊出日期:  2022-11-14

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