Effects of Multidisciplinary Team Building on Hospice Care for End-stage Patients
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摘要:
目的 探究安宁疗护多学科团队建设对终末期患者的效果评价。 方法 选取2020年1月至2021年12月在昆明市第三人民医院安宁疗护中心就诊的200例终末期患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组100例。对照组进行常规临床干预,观察组通过安宁疗护多学科团队进行干预。使用生活质量评估简表(quality of life,QOL)、埃德蒙顿症状评价系统量表(edmonton symptom assessment system,ESAS)、疼痛评估表、营养风险筛查评估表(nutritional risk screening,NRS-2002)、姑息行为功能评估表(palliative performance scale,PPS)评价2组患者生活质量、症状、疼痛、营养状态、行为功能。 结果 干预后观察组患者QOL评分、行动状态正常率高于对照组,VAS、NRS-2002及ESAS评分低于对照组(P < 0.05)。 结论 建设安宁疗护多学科团队并对终末期患者进行干预,可有效提升患者生活质量。 Abstract:Objective To explore the effect of multidisciplinary team building in hospice care on patients with end-stage diseases. Methods 200 end-stage patients who were hospitalized in our hospital from January 2020 to December 2021 were selected and divided into the control group and the observation group by random number table method, with 100 patients in each group. The control group received the routine clinical intervention, while the observation group received the intervention through a multidisciplinary team of hospice care. Quality of life (QOL), Pain Assessment Form, Edmonton Symptom Assessment System (ESAS), Nutritional Risk Screening (NRS-2002), Palliative Performance Scale (PPS) were used to evaluate the quality of life, symptoms, pain, nutritional status andbehavior function. Results After the intervention, QOL score and normal rate of action state in the observation group were higher than those in the control group, and pain, nutritional status and symtom scores were lower than those in the control group (P < 0.05). Conclusion The establishment of a multidisciplinary team of hospice care and intervention to end-stage patients can effectively improve their quality of life. -
Key words:
- Hospice care /
- Multidisciplinary team building /
- End stage /
- Quality of life
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接种疫苗被认为是世界范围内预防感染最经济的措施。一种有效的佐剂对于提高疫苗接种效率是非常必要的。脂质体是磷脂双分子层包裹水相而构成的类球状微囊,按电荷性质可分为中性脂质体、阴离子脂质体和阳离子脂质体[1]。其中阳离子脂质体比阴离子和中性脂质体更有效,可延长在注射部位抗原的停留时间,增加抗原提呈,并诱导更强的免疫反应[2-4]。
DC-Chol(3β-[N-(N′ ,N′ -二甲基氨基乙烷)-氨基甲酰基])是胆固醇衍生物,含有一个叔胺基团。DC-Chol毒性相对较小[5],通常与脂质二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)结合使用[6-7]。胆固醇是经典脂质体配方的主要成分,被阳离子衍生物(DC-Chol)取代,形成PLUSCOM[8],可有效吸附抗原[9-10]。ISCOMs作为佐剂,以多种方式增强免疫反应,通过抗原提呈细胞对微粒优先摄取,PLUSCOM在诱导抗原特异性CD8 T细胞反应方面与经典ISCOMs一样有效[11]。
本研究以四价流感病毒裂解疫苗原液作为模型药物,探讨DC-Chol修饰脂质体作为载体对该疫苗的免疫增强效果。研究中选择市售疫苗原液和PBS作为对照组,比较DC-Chol脂质体作为疫苗佐剂的免疫增强效果。同时还对DC-Chol脂质体中DC-Chol用量与免疫原性的量效关系进行了初步研究,为阳离子脂质体佐剂的开发奠定基础。
1. 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 流感疫苗
均由江苏沃森生物技术有限公司提供。H1N1批号SA2018002,H3N2批号SB2018002,B(V)批号SC2018001,B(Y)批号SC22018006。
1.1.2 实验动物
SPF级昆明种小鼠,雌性,6~8周龄,体重18~22 g,由昆明医科大学实验动物中心提供[合格证号为SCXK9(滇)2005-0008]。
1.1.3 主要试剂
大豆卵磷脂(北京美亚斯磷脂技术公司);胆固醇(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司);DC-Cholesterol(Avanti Polar Lipids,USA);MTT(北京博奥拓达科技有限公司);Anti-mouse CD4 PE、Anti-mouse CD8a FITC(eBioscience,USA)。
1.2 方法
1.2.1 DC-Chol脂质体的制备
采用薄膜分散法和冻融-冻干法[12]。将胆固醇(80 mg)和大豆磷脂(300 mg)溶于无水乙醇,减压旋转成膜;在水化的脂质体混悬液中加入DC-Chol水浴静置,加入一定量流感疫苗原液,制备脂质体冻干粉。
1.2.2 DC-Chol脂质体包封率检测
高速离心取上清液,通过Lowry蛋白法[12]计算包封率。
1.2.3 DC-Chol脂质体量效关系研究
小鼠随机分为七组,每组3只,不同剂量DC-Chol脂质体组(250、500、750、900 μg/只)、PBS组、疫苗原液组、中性脂质体组,抗原剂量为6 μg/只。腹腔免疫后第7天处死,通过MTT法[13]测定刺激指数(SI)确定最佳DC-Chol剂量。
1.2.4 DC-Chol脂质体细胞免疫原性研究
在方法1.2.3确定最佳用量的基础上制备脂质体进行免疫实验。小鼠随机分为PBS组、疫苗原液组、中性脂质体组、DC-Chol 脂质体组,每组9只,腹腔免疫,于第7天、14天、28天处死,MTT方法检测各组SI值,流式细胞术检测T淋巴细胞表面标记。
1.3 统计学处理
采用SPSS17.0软件进行统计分析,多组间比较通过单因素方差分析,以P < 0.05 为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 DC-Chol 脂质体包封率结果
蛋白含量测定的标准曲线为Y = 0.0032X - 0.0009,相关系数R2 = 0.9984,在10~100 μg/mL 范围内有良好线性关系。DC-Chol流感疫苗脂质体包封率结果,见表1。
表 1 不同含量的DC-Chol阳离子脂质体的包封率Table 1. Encapsulation efficiency of DC-Chol cationic liposomes with different contentsDC-Chol含量(µg/鼠) 包封率(%) 250 59.17 500 70.44 750 68.78 900 68.78 2.2 DC-Chol 脂质体量效关系研究
检测结果显示,与PBS组、疫苗原液组相比较,剂量分别为250、500、750、900 μg的DC-Chol组差异有统计学意义(P < 0.05),表明DC-Chol脂质体有较好的免疫原性,见图1;500、750、900 μg组三个剂量组间比较差异无统计学意义(P > 0.05),选择500 µg/鼠为DC-Chol修饰脂质体疫苗的最佳用量。
2.3 DC-Chol 修饰流感疫苗脂质体细胞免疫原性研究
2.3.1 脾淋巴细胞增殖实验
DC-Chol脂质体组与中性脂质体组、疫苗原液组、PBS组比较差异有统计学意义(P < 0.05),且SI值高于各组,说明DC-Chol阳离子脂质体能有效刺激脾淋巴细胞增殖,产生较早较强的免疫原性,增强细胞免疫,见图2。DC-Chol脂质体组7 d时刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的强度最大,诱导细胞免疫的水平最高,但其14~28 d SI值稍有上升,说明抗原刺激机体时产生的抗体不会一直存在于机体中,部分会通过以代谢或排泄的方式排出体外,但仍然有细胞免疫原性的存在即记忆细胞。
2.3.2 T淋巴细胞表面标记实验
由图3可知,DC-Chol脂质体组与中性脂质体组、疫苗原液组、PBS组比较差异有统计学意义(P < 0.05),说明DC-Chol阳离子脂质体可增强细胞免疫;免疫相同周期时,DC-Chol组28 d与14 d的CD4+/CD8+值进行比较差异有统计学意义(P < 0.05),随着时间的延长,DC-Chol修饰的脂质体疫苗对脾淋巴细胞的刺激强度增加,有延长免疫时间的作用。
3. 讨论
阳离子脂质体已成为新一代的疫苗佐剂和给药系统。Yifan Ma[14]通过制备不同表面电荷密度的阳离子脂质体,作用于C57小鼠,采用 ELISA方法和流式细胞术发现阳离子脂质体能诱导更强的免疫反应,证实了阳离子脂质体的免疫调节作用主要是由于其表面电荷密度,而不是阳离子脂质体的浓度。Brunel等[15]将DC-Chol用于乙型肝炎疫苗,结果表明DC-Chol具有免疫调节作用,能诱导BALB/c小鼠的Th1和Th2型免疫反应。Rui等[16]开发了一种由肺炎球菌表面蛋白a和阳离子DC-Chol脂质体组成的肺炎球菌鼻腔疫苗,用小鼠肺炎链球菌感染模型验证了该疫苗的有效性。DC-Chol脂质体能同时诱导体液免疫和细胞免疫,诱导产生IgGl和IgG2a;DC-Chol脂质体还能诱导粘膜免疫[17-18]。阳离子脂质体能够运载不同种类的药物或作为疫苗载体,且到目前人们仍然不断开发其应用潜力。阳离子脂质体的毒性在一定程度上限制了它的应用,未来需要更加深入研究其结构和作用机制,设计出更加低毒高效的阳离子。
本实验中制备的DC-Chol脂质体疫苗包封率均在50% 以上。选择PBS、市售流感疫苗原液以及中性脂质体作为对照组,在一个免疫周期内DC-Chol脂质体的SI值始终高于其他组,提示 DC-Chol流感疫苗脂质体冻干粉在体内可产生细胞免疫,延长免疫时间,具有明显的佐剂效果。该实验为今后研究DC-Chol脂质体佐剂提供了初步参考,未来还需对其作用机制和安全性方面深入研究。
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表 1 2组患者一般资料[( $ \bar x \pm s$)/n(%)]
Table 1. General data of patients between two groups [( $ \bar x \pm s$)/n(%)]
项目 对照组(n=100) 研究组(n=100) t/χ2 P 性别 男 59(59.00) 56(56.00) 0.184 0.668 女 41(41.00) 44(44.00) 年龄(岁) 64.58 ± 6.73 63.61 ± 6.43 0.737 0.463 类型 心血管疾病 24(24.00) 23(23.00) 1.307 0.253 脑血管意外致瘫痪 13(13.00) 11(11.00) 恶性肿瘤 41(41.00) 43(43.00) 脓毒症 22(22.00) 23(23.00) 文化程度
0.183
0.669中学或中专 55(55.00) 58(58.00) 专科及以上 45(45.00) 42(42.00) 家属文化程度 中学或中专 64(64.00) 62(62.00) 0.086 0.77 专科及以上 36(36.00) 38(38.00) 表 2 2组临床指标 [( $ \bar{x} \pm s $),分]
Table 2. Clinical indexes of two groups [( $ \bar{x} \pm s$),points]
指标 评价时间 对照组(n = 100) 研究组(n = 100) t P QOL 躯体功能 干预前 52.47 ± 8.64 52.34 ± 7.74 0.112 0.911 干预后 61.63 ± 7.16* 70.47 ± 8.91* −7.734 < 0.001 * 情绪功能 干预前 52.46 ± 6.38 52.92 ± 6.51 −0.505 0.614 干预后 63.61 ± 7.12* 70.14 ± 7.69* −6.231 < 0.001 * 社会功能 干预前 50.87 ± 4.32 50.46 ± 3.64 0.726 0.469 干预后 61.11 ± 5.34* 79.92 ± 5.01* −25.689 < 0.001 * 呕吐恶心 干预前 52.30 ± 8.64 52.16 ± 8.94 0.113 0.91 干预后 54.19 ± 8.21* 81.13 ± 8.27* −23.118 < 0.001 * ESAS 干预前 7.67 ± 1.49 7.68 ± 1.35 −0.05 0.96 干预后 5.87 ± 1.37* 3.64 ± 0.72* 14.409 < 0.001 * NRS-2002 干预前 3.64 ± 1.58 3.71 ± 1.61 −0.31 0.757 干预后 3.01 ± 0.12* 2.15 ± 0.22* 4.318 < 0.001 * VAS 干预前 8.34 ± 1.28 8.34 ± 1.24 0.0 1.0 干预后 6.27 ± 1.03* 4.11 ± 1.06* 14.614 < 0.001 * 与干预前比较,*P < 0.05。 表 3 对比组间PPS评分 [n(%)]
Table 3. PPS score between comparison groups [n(%)]
组别 n 90%~100% 70%~80% 50%~60% 10%~40% 行动状态正常率 对照组 100 46(46.00) 38(38.00) 16(16.00) 0(0.00) 46(46.00) 研究组 100 52(52.00) 44(44.00) 4(4.00) 0(0.00) 52(52.00) χ2 3.241 P < 0.001 * *P < 0.05。 -
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