非水溶液氯硝西泮注射剂无菌检查法的研究

王璐; 向东; 张艳; 刘勤; 黄珊; 徐帆

doi:10.12259/j.issn.2095-610X.S20231112

非水溶液氯硝西泮注射剂无菌检查法的研究

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231112

王璐¹,
向东¹,
张艳¹,
刘勤¹,
黄珊²,
徐帆^3, ,

1.
云南省食品药品监督检验研究院，工业和信息化部产业技术基础公共服务平台，云南昆明　650106
2.
浙江泰林生物技术有限公司，浙江杭州　310051
3.
联勤保障部队第九二〇医院，云南昆明　650032

基金项目: 云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目（2017HB052）；云南省科技厅科技计划基金资助项目（202101AY070001-293）

详细信息

作者简介:
王璐（1978～），女，云南昆明人，理学硕士，副主任药师，主要从事药品检验工作

通讯作者:
徐帆，E-mail：xu_fan@126.com

中图分类号: R917
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出版历程
- 收稿日期: 2023-09-01
- 网络出版日期: 2023-11-11
- 刊出日期: 2023-11-30

Study on Sterility Test of Non-aqueous Clonazepam Injection

Lu WANG¹,
Dong XIANG¹,
Yan ZHANG¹,
Qin LIU¹,
Shan HUANG²,
Fan XU^{3
, ,}

1.
Yunnan Institute For Food and Drug Control，Ministry of Industry and Information Technology Industrial Technology Basic Public Service Platform，Yunnan Kunming 650106
2.
Zhejiang TAILIN Bioengineering Co.，LTD ，Zhejiang Hangzhou 310051
3.
920 Hospital of Joint Logistic Support Force，Yunnan Kunming 650032，China

摘要

摘要: 目的建立非水溶液氯硝西泮注射液无菌检查方法，探索有机溶剂对于无菌检查法的影响。方法参考《中国药典》2020年版，通过薄膜过滤法无菌检查及膜通透性实验，考察氯硝西泮注射液中有机溶剂对集菌培养器不同材质的滤膜及杯体的影响，以及样品溶液pH值，冲洗液的品种及数量对样品中微生物的影响。结果苯甲醇、冰醋酸及无水乙醇会造成集菌培养器复合纤维素膜、尼龙膜及聚偏二氟乙烯（PVDF）膜不同程度溶解，复合纤维素膜溶解程度更严重，残留于杯体及滤膜的苯甲醇不溶于培养基造成浑浊；丙二醇与AS杯体反应故培养基呈浑浊。不同冲洗液冲洗后培养基pH范围在5.99～7.16之间。结论建立了一种合理的无菌检验方法，该方法为其他以有机相为溶剂的注射液无菌检查提供较好的参考价值。
- 氯硝西泮注射液 /
- 无菌检查法 /
- 有机溶剂 /
- 集菌培养器 /
- 方法优化
Abstract: Objective To establish a method for sterility test of non-aqueous clonazepam injection, and explore the effect of organic solvent on sterility test. Methods With reference to the 2020 edition of Chinese Pharmacopoeia, the effects of organic solvents in Clonazepam injection on the filtration membranes and cups of different materials of the collector were investigated by membrane filtration test and membrane permeability test, as well as the effects of pH value of the sample solution and the variety and quantity of the rinsed solution on the microorganisms in the sample. Results Benzyl alcohol, acetic acid and anhydrous ethanol caused the dissolution of composite cellulose membrane, nylon membrane and PVDF membrane in different degrees, and the dissolution of composite cellulose membrane was more serious, and the benzyl alcohol remaining in the cup and filter membrane was insoluble in the medium and caused turbidity. The reaction of propylene glycol with AS cup made the medium cloudy. The pH range of the culture-medium was 5.99 ~ 7.16 after washing with different rinsing solutions. Conclusions We have developed a rational sterile testing method, which provides a good reference value for the sterile inspection of injections using organic phases as solvents.
- Clonazepam injection /
- Sterility test /
- Organic solvent /
- Collection incubator /
- Method optimization

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图 1 集菌培养器滤膜及杯体选择实验结果

A：过滤样品后加入培养基的浑浊程度；B：过滤苯甲醇、丙二醇加入培养基的浑浊程度，红色杯体为尼龙膜，蓝色杯体为复合纤维素膜。

Figure 1. Results of the selection experiment of filter membrane and cup of the incubator

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表 1 滤膜通透性检测

Table 1. Filter membrane permeability test results

方案	供试液	加入培养基现象	滤膜通透性检测
方案	供试液	加入培养基现象	复合纤维素膜	尼龙膜	PVDF膜
1	样品	浑浊	部分溶解	部分溶解	部分溶解
2	溶剂	浑浊	部分溶解	部分溶解	部分溶解
3	无水乙醇	浑浊*	严重溶解	严重溶解	严重溶解
4	丙二醇	浑浊	膜完整	膜完整	膜完整
5	冰醋酸十倍稀释液	浑浊*	严重溶解	严重溶解	严重溶解
6	苯甲醇	浑浊*	严重溶解	部分溶解	部分溶解
7	阴性对照	澄清	膜完整	膜完整	膜完整
加入培养基后1～6号呈现浑浊状态，但浑浊的程度不一致，*表示浑浊状态比较严重。

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表 2 样品及无菌检查时培养基的pH

Table 2. The pH of the culture medium during the sample and sterility test

样品	pH	0.9%的氯化钠无菌溶液		pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液
样品	pH	FTM	TSB	FTM	TSB
样品A	4.01	5.99	6.21	6.89	6.99
样品B	4.12	6.03	6.22	7.16	7.06
样品D	4.32	6.13	6.20	6.78	7.03
FTM表示加入硫乙醇酸盐流体培养基，TSB表示加入胰酪大豆胨液体培养基。

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表 3 无菌检查方法学适用性试验

Table 3. Test results of the suitability of sterility test methodology

供试品	FTM中阳性菌生长时间（h）			TSB中阳性菌生长时间（h）
供试品	金葡菌	大肠埃希菌	生孢梭菌	枯草芽孢杆菌	白色念珠菌	黑曲霉
样品A	24	24	24	48	72	72
样品B	24	24	24	48	72	72
样品C	24	24	24	48	72	72
样品D	24	24	24	48	72	72
样品E	24	24	24	48	72	72
样品F	24	24	24	48	72	72
阳性对照	24	24	24	48	72	72

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表 4 样品无菌检查结果

Table 4. Results of sample sterility test

培养基	培养时间（d）
培养基	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14
FTM（样品）	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－
TSB（样品）	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－
阳性对照	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋	＋
FTM	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－
TSB	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－	－

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参考文献(16)

[1]	范菲,李静静,刘鹏鸣,等. 不同厂家氯硝西泮片在4种溶出介质中溶曲线的比较[J]. 中国药业,2016,25(8):56-58.
[2]	石银涛,冯柏霖,王绘军,等. ASPE-LC-Q-TOF /MS 检测血液中氯硝西泮和 7 - 氨基氯硝西泮[J]. 药物分析杂志,2015,35(4):605-611.
[3]	余果. 6 种苯二氮类药物的联合分析及氯硝西泮在急性中毒大鼠体内的分布研究[D]. 武汉: 华中科技大学, 2013.
[4]	中华人民共和国药典[S]. 2020年版. 二部, 2020: 1649-1650.
[5]	项玮. 注射液的无菌检查方法验证的研究概况[J]. 海峡药学,2018,30(6):68-70.
[6]	杨晓莉,李辉,马英英,等. 中国药典 2015年版非无菌产品微生物限度检查: 微生物计数法解读[J]. 药物分析杂志,2016,36(6):1101-1107.
[7]	中华人民共和国药典 2020 年版. 四部[S]. 2020: 156-160.
[8]	王秀霞,顾金花,李小燕,等. 气相色谱法测定乳液中苯甲醇含量的不确定度评定[J]. 分析仪器,2022(4):33-39.
[9]	陈青连,姚振,万超. 三唑类抗真菌药物泊沙康唑注射液无菌检查方法研究[J]. 中国药业,2020,29(17):63-67.
[10]	马仕洪,肖璜,袁宇,等. 泊沙康唑注射液无菌检查方法的建立[J]. 药物分析杂志,2018,38(9):1568-1572.
[11]	刘洪祥,刘海玲,解慧,等. 注射用替加环素无菌检查的研究及优化[J]. 药物分析杂志,2020,40(8):1443-1450.
[12]	解慧,于翾,刘洪祥,等. 精蛋白重组人胰岛素注射液无菌检查方法的建立[J]. 药物分析杂志,2020,40(6):1131-1137.
[13]	马仕洪,刘鹏,杨利红,等. 药品微生物限度检查方法适用性试验中加菌方式的实验研究[J]. 药物分析杂志,2018,38(5):877-882.
[14]	解慧,刘洪祥,杨倩,等. 《美国药典》(USP42-NF37 2S)通则 <1227> 药品微生物回收的验证[J]. 中国药品标准,2020,21(2):146-149.
[15]	马仕洪,刘鹏,戴翚,等. 加替沙星无菌检查方法的建立与标准操作探讨[J]. 药物分析杂志,2007,27(6):877-880.
[16]	李康,刘旭明,朱观宇. 三联疗法治疗十二指肠溃疡的临床观察[J]. 中华全科医学,2009,7(7):720-721.

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[1]	黄云, 赵安楠, 刘秋月, 高伟民, 李霁. 基于响应面法优化水鬼蕉中水仙环素的提取工艺, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231104
[2]	王璐, 刘勤, 张红宇, 刘永辉. 血塞通注射液质量标准中生物活性测定的方法, 昆明医科大学学报.
[3]	唐雪梅, 李勇, 李婷婷. 有机磷农药中毒致患者呼吸功能衰竭的急救措施与疗效, 昆明医科大学学报.
[4]	吴嘉, 赵霞, 杨学芳, 胡月新, 徐天勇, 段永忠. 响应面分析法优化细菌内毒素的灭活方法, 昆明医科大学学报.
[5]	王应霞, 杨桂梅, 胡艳文, 王永艳, 姚珊, 张旋, 张丽. 黄藤素注射液抗脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用, 昆明医科大学学报.
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[7]	郭涛, 曹隽, 王刚, 王延学, 冷凤英, 夏志洁. 重症评分在治疗有机氟气体中毒致多器官衰竭患者中的作用, 昆明医科大学学报.
[8]	胡月新. 两种不同神经电生理检查法对桡管综合征的鉴别诊断, 昆明医科大学学报.
[9]	苏彦宏. 滇产复方甘西鼠尾草注射液对大鼠心肌缺血再灌注心脏功能的影响, 昆明医科大学学报.
[10]	李鹏翔. 丁苯酞注射液治疗急性脑梗死临床研究, 昆明医科大学学报.
[11]	孟丽红. 疏血通注射液治疗缺血性中风的临床研究, 昆明医科大学学报.
[12]	高静. 采用均匀设计法优化PCR复合扩增的实验研究, 昆明医科大学学报.
[13]	杨明. 一种优化的大鼠视网膜组织石蜡切片制作方法, 昆明医科大学学报.
[14]	任爱红. 活性炭胃肠灌洗治疗对有机磷中毒患者肝功能恢复的意义, 昆明医科大学学报.
[15]	张雪辉. 响应面法优化微波提取小香薷籽总黄酮工艺及数学模型研究, 昆明医科大学学报.
[16]	孙美红. 重度有机磷农药中毒致急性呼吸衰竭92例临床分析, 昆明医科大学学报.
[17]	. 刺五加注射液治疗失眠症60例临床体会, 昆明医科大学学报.
[18]	. 血塞通注射液治疗玻璃体积血疗效观察, 昆明医科大学学报.
[19]	. 天花粉蛋白注射液结合中药治疗异位妊娠临床分析, 昆明医科大学学报.
[20]	李福萍. 红花注射液治疗脑梗死30例疗效观察, 昆明医科大学学报.