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HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用

肖锦玲 管雅玲 朱森森 庄梦婕 苏丽萍 蒲红伟

肖锦玲, 管雅玲, 朱森森, 庄梦婕, 苏丽萍, 蒲红伟. HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(2): 7-13. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240202
引用本文: 肖锦玲, 管雅玲, 朱森森, 庄梦婕, 苏丽萍, 蒲红伟. HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(2): 7-13. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240202
Jinling XIAO, Yaling GUAN, Sensen ZHU, Mengjie ZHUANG, Liping SU, Hongwei PU. Role of HK2 and VDAC1 in Diacetylmorphine-induced Cardiomyocyte Apoptosis[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(2): 7-13. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240202
Citation: Jinling XIAO, Yaling GUAN, Sensen ZHU, Mengjie ZHUANG, Liping SU, Hongwei PU. Role of HK2 and VDAC1 in Diacetylmorphine-induced Cardiomyocyte Apoptosis[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(2): 7-13. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240202

HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240202
基金项目: 国家自然科学基金资助项目(8216020119);新疆维吾尔自治区研究生科研创新项目(XJ2023G192)
详细信息
    作者简介:

    肖锦玲(2000~),女,湖南衡阳人,在读硕士研究生,主要从事病理学研究工作

    通讯作者:

    蒲红伟,E-mail:576250630@qq.com

  • 中图分类号: R966

Role of HK2 and VDAC1 in Diacetylmorphine-induced Cardiomyocyte Apoptosis

  • 摘要:   目的  探讨HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用。  方法  采用剂量递增方法,建立二乙酰吗啡成瘾大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为3组,正常组(Control,n=10)皮下注射等量生理盐水;模型组(Model,n=15)首次皮下注射二乙酰吗啡剂量为 5 mg/kg,以后逐日递增剂量 2.5 mg/(kg·d),连续注射20 d;模型+10 D组(Model+10D,n=15)在模型组基础上继续递增剂量至第10天。采用ELISA法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)含量;采用 HE 染色观察各组心肌组织病理变化;采用TUNEL染色检测各组心肌组织细胞凋亡;采用免疫组化、RT-qPCR和Western blot检测HK2、VDAC1及凋亡相关因子的mRNA和蛋白的表达变化。  结果  HE染色发现随着二乙酰吗啡干预时间的延长,心肌组织表现出不同程度的损伤。与正常组相比,模型组中血清LDH、GOT含量及心肌凋亡率升高,HK2和抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白水平下降,VDAC1和促凋亡因子Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白水平升高,Clevead Caspase-3蛋白水平升高;与正常组相比,模型+10 D组中以上指标,差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  二乙酰吗啡可导致心肌细胞凋亡,HK2和VDAC1可能参与了二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡的过程。
  • 图  1  各组LDH、GOT表达水平($ \bar x \pm s $,n=6)

    A:大鼠血清中LDH表达;B:大鼠血清中GOT表达。与正常组比较,***P<0.001。

    Figure  1.  LDH and GOT levels in each group($ \bar x \pm s $,n=6)

    图  2  各组大鼠心肌组织形态学比较(×200)

    A:正常组大鼠心肌组织的HE染色;B:模型组大鼠心肌组织的HE染色;C:模型+10 D组大鼠心肌组织的HE染色。

    Figure  2.  Comparison of myocardial tissue morphological changes among different roups of rats(×200)

    图  3  各组大鼠心肌细胞凋亡情况(×200)

    A:正常组TUNEL染色;B:模型组TUNEL染色;C:模型+10 D组TUNEL染色;D:正常组DAPI染色;E:模型组DAPI染色;F:模型+10 D组DAPI染色;G:正常组Merge染色;H:模型组Merge染色;I:模型+10 D组Merge染色;J:各组大鼠心肌细胞凋亡表达情况($ \bar x \pm s $,n=6)。与正常组比较,***P<0.001。

    Figure  3.  Apoptosis of cardiomyocytes in each group of rats (×200)

    图  4  大鼠心肌组织HK2、VDAC1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达(×200)

    A:正常组HK2表达;B:模型组HK2表达;C:模型+10 D组HK2表达;D:正常组VDAC1表达;E:模型组VDAC1表达;F:模型+10 D组VDAC1表达;G:正常组Bax表达;H:模型组Bax表达;I:模型+10 D组Bax表达;J:正常组Bcl-2表达;K:模型组Bcl-2表达;L:模型+10 D组Bcl-2表达;M:正常组Caspase-3表达;N:模型组Caspase-3表达;O:模型+10 D组Caspase-3表达;P:大鼠心肌组织HK2、VDAC1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白AOD表达情况($ \bar x \pm s $,n=6)。与正常组比较,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

    Figure  4.  Expression of HK2,VDAC1,Bax,Bcl-2 and Caspase-3 protein in rat myocardial tissue (×200)

    图  5  大鼠心肌组织HK2、VDAC1、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达($ \bar x \pm s $,n=6)

    Figure  5.  Expression of HK2,VDAC1,Bax,Bcl-2 and Caspase-3 mRNA in rat myocardial tissue($ \bar x \pm s $,n=6)

    图  6  各组心肌组织中HK2、VDAC1、Bax、Bcl-2、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达变化($\bar x \pm s $,n=6)

    A:各组蛋白印迹图;B:各组蛋白表达情况。

    Figure  6.  Changes in Protein Expression of HK2, VDAC1, Bax, Bcl-2, Caspase-3, and Cleaved Caspase-3 in Myocardial Tissues of Various Groups ($\bar x \pm s $,n=6)

    表  1  二乙酰吗啡对心肌组织中HK2、VDAC1、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达的影响($ \bar x \pm s $,n=6)

    Table  1.   Effects of diamorphine on the mRNA expression of HK2,VDAC1,Bax,Bcl-2 and Caspase-3 in myocardium($ \bar x \pm s $,n=6)

    基因正常组模型组模型+10 D组FP
    HK2 1.00±0.00 0.57±0.14* 0.24±0.09*** 48.77 0.009#
    VDAC1 1.00±0.00 3.00±0.61** 4.46±0.25*** 32.62 0.027#
    Bax 1.00±0.00 4.88±0.17* 7.64±0.44* 50.32 0.001#
    Bcl-2 1.00±0.00 0.75±0.10* 0.39±0.05*** 34.86 0.020#
    Caspase-3 1.00±0.00 1.91±0.11* 3.78±0.38** 45.67 0.020#
      与正常组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001。组间比较,#P < 0.05。
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出版历程
  • 收稿日期:  2023-11-29
  • 网络出版日期:  2024-02-27
  • 刊出日期:  2024-02-25

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