肺部结节或肿块患者肺泡灌洗液SHOX2和RASSF1A基因甲基化在肺癌诊断中的价值

朱东平; 李海峰; 冯俊飞; 汤秋恒; 冷静

doi:10.12259/j.issn.2095-610X.S20240316

肺部结节或肿块患者肺泡灌洗液SHOX2和RASSF1A基因甲基化在肺癌诊断中的价值

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240316

1.
大理大学临床医学院，云南大理　671003
2.
云南省第三人民医院呼吸与危重症医学科，云南昆明　650011

基金项目: 云南省教育厅科学研究基金资助项目（2019J0792）

详细信息

作者简介:
朱东平（1996～），男，湖南永州人，在读硕士研究生，主要从事肺部肿瘤相关研究工作

通讯作者:
冷静，E-mail：2388612156@qq.com

中图分类号: R365
计量
- 文章访问数: 780
- HTML全文浏览量: 609
- PDF下载量: 9
- 被引次数: 0
出版历程
- 收稿日期: 2023-05-09
- 网络出版日期: 2024-03-10
- 刊出日期: 2024-03-30

Value of SHOX2 and RASSF1A Gene Methylation in Alveolar Lavage Fluid in Patients with Pulmonary Nodules or Masses in the Diagnosis of Lung Cancer

1.
School of Clinical Medicine，Dali University，Da li Yunnan 6710032
2.
Dept. of Respiratory and Critical Care Medicine，The 3rd People’s Hospital of Yunnan Province，Kunming Yunnan 650011，China

摘要

摘要: 目的通过肺组织活检或手术后病检结果来验证两基因甲基化指标检验肺部良、恶性结节诊断效能。方法进行前瞻性研究，收集2019年3月至2020年3月在云南省第三人民医院99例诊断为肺部结节、肿块的患者，行支气管镜检查收集支气管肺泡灌洗液（BALF）样本后，进行定期随访、肺穿刺活检、手术后病检。结果收集的99例肺部结节、肿块患者，经病理诊断后分为肺癌组（n = 50）和良性肺疾病组（n = 49）。肺癌组年龄（62.64±9.71）岁，良性肺疾病组年龄（60.48±13.69）岁，2组指标差异具有统计学意义（P = 0.032）；在肺癌的诊断过程中，发现SHOX2和RASSF1A基因任一阳性诊断肺癌的灵敏度分别为72%和58%，特异度分别为92.3%和95.9%。而这2个基因的联合检测在肺癌的诊断中表现出了更高的灵敏度，为0.84，远高于良性疾病组的0.102 （P < 0.001）。ROC曲线分析显示2个基因甲基化联合时灵敏度可提高至84%。结论肺泡灌洗液SHOX2和RASS1A基因甲基化检验对存在肺部结节或肿块影像表现的肺癌患者诊断具有良好的预测价值，在影像学和组织学诊断不明时，SHOX2和RASSF1A联合检验可以作为肺癌早期诊断的一个重要补充工具。
- DNA甲基化 /
- SHOX2 /
- RASSF1A /
- 肺泡灌洗液
Abstract: Objective The diagnostic efficacy of the two gene methylation indexes was verified by lung biopsy or postoperative disease examination results. Methods A prospective study was conducted to collect 99 patients diagnosed with pulmonary nodules and masses in the Third People's Hospital of Yunnan Province from March 2019 to March 2020. After bronchoscopy and BALF samples were collected, regular follow-up, lung puncture biopsy and post-operative disease examination were performed. Results Ninety-nine patients with pulmonary nodules and masses were divided into lung cancer group（n = 50） and benign lung disease group（n = 49） after pathological diagnosis. The age of patients in the lung cancer group was（62.64±9.71） years, and that of the benign lung disease group was（60.48±13.69） years, and there was a statistical difference between the two groups（P = 0.032）. In the diagnosis of lung cancer, the sensitivity and specificity of SHOX2 and RASSF1A genes alone were found to be 72% and 58%, respectively, and 92.3% and 95.9%, respectively. The combined test of the two genes showed a higher sensitivity in the diagnosis of lung cancer, 0.84, compared to 0.102 in the benign disease group（P < 0.001）. ROC curve analysis showed that the sensitivity of the two genes could be increased to 84% when methylation was combined. Conclusion The methylation test of SHOX2 and RASS1A gene in alveolar lavage fluid has a good value in the diagnosis of lung cancer patients with pulmonary nodules and masses and SHOX2 combined with RASSF1A can be an important supplementary tool for early diagnosis of lung cancer when imaging and histological diagnosis are unclear.
- DNA methylation /
- SHOX2 /
- RASSF1A /
- Alveolar lavage fluid

HTML全文

图 1 SHOX2和RASSF1A基因ROC曲线

Figure 1. SHOX2 and RASSF1A were detected by the ROC curve

下载: 全尺寸图片幻灯片

表 1 临床病例特征[（n）%/（$\bar x \pm s $）]

Table 1. Clinical case characteristics[（n）%/（$\bar x \pm s $）]

组别	总数（n=99）	肺癌组（n=50）	良性疾病组（n=49）	χ²/t	P
性别
男	56（57.00）	32（64.00）	24（49.00）	2.273	0.132
女	43（43.00）	18（36.00）	25（51.00）
年龄（岁）	61.79 ± 11.16	62.64 ± 9.71	60.48 ± 13.69	3.554	0.032^*
吸烟
是	59（59.60）	39（78.00）	20（40.82）	14.210	< 0.001^*
否	40（40.40）	11（22.00）	29（49.18）
结节大小（cm）
最大直径	3.714 ± 2.67	4.01 ± 2.33	3.14 ± 3.09	1.332	0.177
最小直径	2.90 ± 2.16	2.97 ± 1.65	2.26 ± 2.06	1.878	0.065
^*P < 0.05。

下载: 导出CSV

表 2 2组SHOX2和RASSF1A基因组甲基化PCR检测结果 [n（%）]

Table 2. PCR results of SHOX2 and RASSF1A genome methylation in two groups [n（%）]

组别	n	SHOX2	RASSF1A	SHOX2、RASSF1A双阳性	SHOX2、RASSF1A任意阳性
肺癌组	50	37（74.00）	29（58.00）	24（48.00）	42（84.00）
良性疾病组	49	4（8.16）	2（4.08）	1（2.04）	5（10.20）
χ²		44.211	33.451	27.693	54.046
P		< 0.001^*	< 0.001^*	< 0.001^*	< 0.001^*
^*P < 0.05。

下载: 导出CSV

表 3 不同类型肺癌患者基因甲基化检测 [n（%）]

Table 3. Gene methylation in patients with different types of lung cancer [n（%）]

项目	n	SHOX2	RASSF1A	二者均阳性	任一阳性
肺腺癌	23	19（82.60）	16（69.57）	13（56.52）	21（91.30）
肺鳞癌	14	10（71.43）	7（50.00）	5（35.71）	12（85.71）
大细胞癌	1	1（100.00）	1（100.00）	1（100.00）	1（100.00）
小细胞癌	1	1（100.00）	1（100.00）	1（100.00）	1（100.00）
腺鳞癌	2	1（50.00）	1（50.00）	1（50.00）	1（50.00）
其它类型癌	9	5（55.56）	3（33.33）	3（33.33）	6（66.67）

下载: 导出CSV

表 4 多因素Logistics回归分析

Table 4. Multi-factor Logistics regression analysis

因素	B	S.E	Wald	P	OR	95% CI
SHOX2	2.906	0.054	6.922	0.009^*	12.675	2.146～20.451
RASSF1A	2.293	0.120	6.014	0.014^*	3.644	1.245～8.245
吸烟	1.055	0.245	3.155	0.035^*	1.354	1.1245～3.564
年龄	0.019	0.578	0.525	0.469	1.019	0.969～1.072
^*P < 0.05。

下载: 导出CSV

表 5 单一指标和双指标联合检测结果

Table 5. Combined detection results of single index and double index

指标	AUC	95%CI	灵敏度	特异度	约登指数
SHOX2	0.829	0.743～0.915	0.723	0.923	0.658
RASSF1A	0.770	0.674～0.886	0.580	0.959	0.539
SHOX2+ RASSF1A	0.869	0.792～0.946	0.84	0.898	0.738

下载: 导出CSV

参考文献(18)

[1]	赵俊松,崔利,何江波,等. 上海22351例无症状体检者低剂量CT肺癌筛查及随访结果初步分析[J]. 诊断学理论与实践,2019,18(2):183-188.
[2]	Dor Y,Cedar H. Principles of DNA methylation and their implications for biology and medicine[J]. Lancet,2018,392(10149):777-786. doi: 10.1016/S0140-6736(18)31268-6
[3]	刘莹,王圆圆,贾文青,等. 肺癌患者血清p16、FHIT、APC基因甲基化检测[J]. 郑州大学学报(医学版),2017,52(1):51-54.
[4]	林列坤,卢春生,郑义,等. 支气管肺泡灌洗液SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测在临床肺癌诊断中的应用[J]. 中国实用医药,2019,14(18):1-3.
[5]	周清华,范亚光,王颖,等. 中国肺部结节分类、诊断与治疗指南(2016年版)[J]. 中国肺癌杂志,2016,19(12):793.
[6]	Du Rand I A,Blaikley J,Booton R,et al. Summary of the British Thoracic Society guideline for diagnostic flexible bronchoscopy in adults[J]. Thorax,2013,68(8):786-787. doi: 10.1136/thoraxjnl-2013-203629
[7]	Walter J E,Heuvelmans M A,De Jong P A,et al. Occurrence and lung cancer probability of new solid nodules at incidence screening with low-dose CT: Analysis of data from the randomised,controlled NELSON trial[J]. Lancet Oncol,2016,17(7):907-916. doi: 10.1016/S1470-2045(16)30069-9
[8]	Miller K D,Goding Sauer A,Ortiz A P,et al. Cancer statistics for hispanics/latinos,2018[J]. CA Cancer J Clin,2018,68(6):425-445. doi: 10.3322/caac.21494
[9]	赫捷, 赵平, 陈万青. 2012中国肿瘤登记年报[M]. 北京: 军事医学科学出版社, 2012: 1-3.
[10]	Aberle D R,Adams A M,Berg C D,et al. Reduced lung-cancer mortality with low-dose computed tomographic screening[J]. N Engl J Med,2011,365(5):395-409. doi: 10.1056/NEJMoa1102873
[11]	中华医学会放射学分会心胸学组. 低剂量螺旋CT肺癌筛查专家共识[J]. 中华放射学杂志,2015,49(5):328-335.
[12]	邱小明,乔艳洁,刘斌,等. DNA甲基化在肺癌早期诊断中的研究进展[J]. 中国肺癌杂志,2012,15(4):234-241. doi: 10.3779/j.issn.1009-3419.2012.04.08
[13]	Zeng H,Zheng R,Guo Y,et al. Cancer survival in China,2003-2005: A population-based study[J]. Int J Cancer,2015,136(8):1921-1930. doi: 10.1002/ijc.29227
[14]	Koch A,Joosten S C,Feng Z,et al. Analysis of DNA methylation in cancer: Location revisited[J]. Nat Rev Clin Oncol,2018,15(7):459-466. doi: 10.1038/s41571-018-0004-4
[15]	Shi J,Chen X,Zhang L,et al. Performance evaluation of SHOX2 and RASSF1A methylation for the aid in diagnosis of lung cancer based on the analysis of FFPE specimen[J]. Front Oncol,2020,10:565780. doi: 10.3389/fonc.2020.565780
[16]	Song L,Yu H,Li Y. Diagnosis of lung cancer by SHOX2 gene methylation assay[J]. Mol Diagn Ther,2015,19(3):159-167. doi: 10.1007/s40291-015-0144-5
[17]	Schmidt B,Liebenaerg V,Dietrich D,et al. SHOX2 DNA methylation is a biomarker for the diagnosis of lung cancer based on bronchial aspirates[J]. BMC Cancer,2010,10:600. doi: 10.1186/1471-2407-10-600
[18]	Tomizawa Y,Iijima H,Nomoto T,et al. Clinicopathological significance of aberrant methylation of RARbeta2 at 3p24,RASSF1A at 3p21.3,and FHIT at 3p14.2 in patients with non-small cell lung cancer[J]. Lung Cancer,2004,46(3):305-312. doi: 10.1016/j.lungcan.2004.05.003

相关文章(20)

[1]	王缘, 李蓉, 陈娇娇, 申艳丽, 胡凤娣. 粪便SDC2基因甲基化检测在结直肠癌早期筛查的临床价值, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230524
[2]	尹文卅, 卢玉梅, 佟金莲, 聂胜洁, 阮冶. DNA甲基化与精神分裂症的研究进展, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230811
[3]	毛俊鸿, 鲁丹枫, 徐玉, 代毅聪, 张哲瑞, 李悦, 王昆华. 甲基苯丙胺改变成瘾小鼠突触可塑性基因的甲基化修饰, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220121
[4]	蔡和伦, 李平, 董燕, 陈俊文, 董昭兴. 经皮肺穿刺活检组织Xpert MTB/RIF对肺结核的诊断价值, 昆明医科大学学报.
[5]	张颖, 牛小群. 肺泡灌洗液G和GM试验对早期诊断AECOPD患者并发侵袭性肺真菌感染的诊断价值, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20201217
[6]	杨金荣, 阮经艳, 曾云, 武坤, 聂波, 王雪娇. DNMT3A在IDH1致急性髓系白血病基因组高甲基化中的作用, 昆明医科大学学报.
[7]	陈思宇, 杨乐, 陈黄鸿, 付帅, 吴勇. 醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27细胞ER基因甲基化和mRNA表达的影响, 昆明医科大学学报.
[8]	孙宇星, 谭力, 郝芮, 李明, 甘政艳, 吴澄清. 儿童肺炎支原体肺炎与呼出气一氧化氮的相关性, 昆明医科大学学报.
[9]	伍刚. 乙肝病毒X蛋白通过DNA甲基化沉默肝癌中miR-338表达, 昆明医科大学学报.
[10]	赵斐, 姜焰凌, 张寿勋, 夏生, 鲍建军, 张柠, 杨晓佩, 钟树荣. DNA甲基化的焦磷酸测序通过率, 昆明医科大学学报.
[11]	杨晓佩, 姜焰凌, 阮冶, 张寿勋, 赵斐, 张柠, 夏生, 钟树荣. OPRM1基因DNA甲基化在物质依赖中的研究进展, 昆明医科大学学报.
[12]	谭力. 难治性肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-6、IFN-γ的水平及支气管镜下特点, 昆明医科大学学报.
[13]	刘宁. 流式细胞检测肺结核患者肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群评价, 昆明医科大学学报.
[14]	张继华. 慢性阻塞性肺疾病患者肺泡灌洗液SIgA表达水平与肺功能相关性研究, 昆明医科大学学报.
[15]	张明谦. ANKRD18B基因在大肠癌中的甲基化与表达, 昆明医科大学学报.
[16]	岳万远. 醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞P16基因甲基化及mRNA表达的影响及其意义, 昆明医科大学学报.
[17]	贺振新. 多发性骨髓瘤中细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）基因异常甲基化的研, 昆明医科大学学报.
[18]	闫婷. 砒霜厂工人Bcl-2基因相对表达与尿砷甲基化产物的关系, 昆明医科大学学报.
[19]	杜兴华. ALX4基因在肿瘤中的甲基化与表达, 昆明医科大学学报.
[20]	郝英豪. RASSF1A和TIP30在大肠癌中的表达及临床意义, 昆明医科大学学报.