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抑制PPARγ表达对BMSCs成骨分化的影响

蒲龙 周旋然 江陈榕 李云轩 袁勇

蒲龙, 周旋然, 江陈榕, 李云轩, 袁勇. 抑制PPARγ表达对BMSCs成骨分化的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(9): 17-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240903
引用本文: 蒲龙, 周旋然, 江陈榕, 李云轩, 袁勇. 抑制PPARγ表达对BMSCs成骨分化的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(9): 17-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240903
Long PU, Xuanran ZHOU, Chenrong JIANG, Yunxuan LI, Yong YUAN. Effect of Inhibiting PPARγ Expression on Osteogenic Differentiation of BMSCs[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(9): 17-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240903
Citation: Long PU, Xuanran ZHOU, Chenrong JIANG, Yunxuan LI, Yong YUAN. Effect of Inhibiting PPARγ Expression on Osteogenic Differentiation of BMSCs[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(9): 17-23. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240903

抑制PPARγ表达对BMSCs成骨分化的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240903
基金项目: 云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目(202201AY070001-128);昆明医科大学第二附属医院院内科技计划项目(2022yk13);昆明医科大学研究生教育创新基金项目(2023S297)
详细信息
    作者简介:

    蒲龙(1996~),男,云南麻栗坡人,在读硕士研究生,主要从事骨与关节疾病研究工作

    通讯作者:

    袁勇,E-mail:yuanyongdoc@163.com

  • 中图分类号: R68

Effect of Inhibiting PPARγ Expression on Osteogenic Differentiation of BMSCs

  • 摘要:   目的  探究抑制过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)表达对BMSCs成骨分化的影响,为原发性骨质疏松症(primary psteoporosis ,POP)的治疗提供理论基础。  方法  将骨密度正常患者提取的BMSCs分为正常对照组(CON组),POP患者提取的BMSCs分为原发性骨质疏松组(POP组),取POP组细胞加入PPARγ抑制剂,分为抑制剂组(INR组),经成骨诱导分化后,检测各组细胞中骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Osterix、Runt相关转录因子2 (runt-related transcription factor 2 ,Runx2)的表达情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色观察各组BMSCs成骨分化情况。  结果  POP组ALP阳性细胞数低于CON组和INR组(P < 0.05);与CON组相比,POP组中OCN、OPN、Osterix、Runx2表达量降低,差异具有统计学意义(P < 0.05);与POP组相比,INR组中OCN、OPN、Osterix、Runx2表达量升高,差异具有统计学意义(P < 0.05)。  结论  抑制PPARγ表达后,BMSCs成骨分化特异性基因(ALP、OCN、OPN、Osterix、Runx2)表达增加。
  • 图  1  CD45、CD90蛋白条带

    Figure  1.  CD45,CD90 protein bands

    图  2  各组PPARγ免疫荧光染色(标尺为50 μm)

    A:CON组PPARγ表达的免疫荧光图; B:POP组PPARγ表达的免疫荧光图; C:INR组PPARγ表达的免疫荧光图。

    Figure  2.  Immunofluorescence staining for PPARγ in each group (scale bar: 50 μm)

    图  3  PPARγ表达情况

    与POP组比较,***P < 0.001。

    Figure  3.  PPARγ expression

    图  4  各组ALP染色(中性红染色,标尺为50 μm)

    A:CON组ALP染色;B:POP组ALP染色;C:INR组ALP染色。

    Figure  4.  ALP staining for each group (Neutral red staining,scale bar: 50 μm)

    图  5  基因相对表达量

    A:BMSCs中OCN基因相对表达量;B: BMSCs中OPN基因相对表达量;C: BMSCs中Osterix基因相对表达量;D: BMSCs中Runx2基因相对表达量。*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  5.  Relative mRNA expression

    图  6  蛋白相对表达量

    A:BMSCs中OCN蛋白相对表达量;B:BMSCs中OPN蛋白相对表达量;C:BMSCs中Osterix蛋白相对表达量;D:BMSCs中Runx2蛋白相对表达量。*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  6.  Relative protein expression

    表  1  免疫荧光半定量方差分析($ \bar x \pm s $,n = 3)

    Table  1.   The ANOVA for semi-quantification of immunofluorescence ($ \bar x \pm s $,n = 3)

    组别平均荧光强度
    CON组27.65±3.93
    POP组105.98±13.95
    INR组40.72±13.20
    F41.229
    P<0.001*
      *P < 0.05。
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    表  2  各组基因相对表达量($ \bar x \pm s $,n = 3)

    Table  2.   Relative expression of genes in each group($ \bar x \pm s $,n = 3)

    组别 OCN OPN Osterix Runx2
    CON组 0.95±0.07 1.21±0.20 1.20±0.17 1.23±0.20
    POP组 0.40±0.07 0.46±0.03 0.58±0.11 0.48±0.04
    INR组 0.66±0.05 0.80±0.03 0.85±0.12 0.86±0.16
    F 59.832 31.647 15.947 19.007
    P <0.001* 0.001* 0.004* 0.003*
      *P < 0.05。
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    表  3  各组蛋白相对表达量($ \bar x \pm s $,n = 3)

    Table  3.   Expression levels of each group of proteins($ \bar x \pm s $,n = 3)

    组别 OCN OPN Osterix Runx2
    CON组 0.74±0.07 0.44±0.06 0.55±0.02 0.54±0.16
    POP组 0.51±0.11 0.3±0.03 0.22±0.03 0.31±0.08
    INR组 0.89±0.28 0.51±0.03 0.38±0.06 0.52±0.02
    F 7.189 37.672 93.211 9.690
    P 0.006* <0.001* <0.001* 0.002*
      *P < 0.05。
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-03-20
  • 网络出版日期:  2024-06-14
  • 刊出日期:  2024-09-25

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