兔骨髓间充质干细胞的分离、体外培养、鉴定及成脂诱导
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摘要: [摘要]目的 分离、体外培养、鉴定兔的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及诱导分化为脂肪细胞.方法 采用健康幼龄日本大耳白兔,麻醉致死后冲洗骨髓收集骨髓液,采用直接贴壁法分离培养MSCs,对MSCs进行形态学观察,同时通过流式细胞分析术对CD34、CD44、CD45、CD90 4种表面抗原进行鉴定.取第5代MSCs,加入50 μmol/L抗坏血酸盐2磷酸盐,50 μmol/L消炎痛和0.5 μmol/L地塞米松诱导其分化.结果 第2代MSCs经流式细胞技术鉴定出细胞的CD34(-)、CD45(-)、CD44(+)、CD90(+)符合MSCs的表面抗原.第5代骨髓间充质干细胞,成脂诱导10 d后油红O染色显示有大量脂质沉积并相互融合,细胞由长梭形变为多边形.结论 本研究证实了体外培养的细胞为间充质干细胞且成分单一,具有干细胞特性,能分化为脂肪细胞,可作为一个细胞资源,为组织工程和动物模型研究细胞分化机制
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