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miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达

刘洋 廖婧 卢又汇 孙春意 孟昱时

刘洋, 廖婧, 卢又汇, 孙春意, 孟昱时. miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(3): 23-28. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210307
引用本文: 刘洋, 廖婧, 卢又汇, 孙春意, 孟昱时. miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(3): 23-28. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210307
Yang LIU, Jing LIAO, You-hui LU, Chun-yi SUN, Yu-shi MENG. Negative Regulation of hTERT Expression in Cervical Cancer Hela Cell Line by miR-21[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(3): 23-28. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210307
Citation: Yang LIU, Jing LIAO, You-hui LU, Chun-yi SUN, Yu-shi MENG. Negative Regulation of hTERT Expression in Cervical Cancer Hela Cell Line by miR-21[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(3): 23-28. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210307

miR-21负向调控宫颈癌HeLa细胞株中hTERT的表达

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210307
基金项目: 国家自然科学基金资助项目(81860515);云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目[2018FE001(-055)];云南省万人计划“青年拔尖人才”培养基金资助项目(云人社发[2018]73号);云南省万人计划“名医专项”培养基金资助项目(云厅字[2018]11号);云南省高层次卫生健康技术人才“妇产科学学科带头人”(D-2019004)
详细信息
    作者简介:

    刘洋(1979~),女,吉林四平人,博士,副主任医师,主要从事生殖内分泌与妇科恶性肿瘤研究工作;廖婧与刘洋对本文有同等贡献

    通讯作者:

    孟昱时,E-mail:km20150515@163.com

  • 中图分类号: R737.31

Negative Regulation of hTERT Expression in Cervical Cancer Hela Cell Line by miR-21

  • 摘要:   目的  通过观察在miR-21作用下hTERT的表达情况,探讨在宫颈癌HeLa细胞中miR-21对hTERT的调控作用。  方法  利用RT-PCR 法及West Blot 法分别检测HeLa中miR-21 的表达,以及hTERT蛋白的表达情况;通过实验设计,生成miR-21模拟物和 miR-21抑制剂,并分别设立两组的空白对照序列;将空转liposome2000 (lipo2000)设为对照组,利用脂质体 liposome2000包裹宫颈癌细胞株 HeLa并予以转染。在转染后24 h及时检测hTERT及蛋白的表达量。  结果  HeLa细胞株中miR-21及hTERT表达阳性;转染后24 h模拟物组、模拟物对照组、抑制剂组、抑制剂对照组、脂质体组 hTERT mRNA相对表达水平分别为(0.51±0.33)、(0.69±0.19)、(1.33±0.39)、(0.83±0.26)和(0.58±0.16);蛋白相对表达水平分别为(0.41±0.18)、(0.62±0.18)、(1.45±0.60)、(0.83±0.15)和(0.82±0.30);模拟物组与其对照组及脂质体组相比较,hTERT mRNA及蛋白表达情况均较低且差异有统计学意义(P < 0.05);相反,在抑制剂组与其对照组及脂质体组相比较中,hTERT mRNA及蛋白表达情况明显升高,差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  通过检测发现miR-21及hTERT基因在HeLa细胞株中均呈现高表达状态;miR- 21可以调节hTERT mRNA 和蛋白表达水平,从而发挥负向调控hTERT的作用。
  • 图  1  miR-21及hTERTmRNA在HeLa细胞株中的表达(×100)

    A:模拟物组;B:模拟物对照组;C:抑制剂组;D:抑制剂对照组;E:脂质体组

    Figure  1.  Expression of miR-21 and hTERTmRNA in HeLa cell line (×100)

    图  2  hTERT mRNA 在各组别细胞中的表达情况

    Figure  2.  Expression of hTERT mRNA in different groups of cells

    图  3  hTERT 蛋白在各组别细胞中的表达情况

    Figure  3.  hTERT protein expression in each group of cells

    表  1  hTERT mRNA 在各组别细胞中的表达情况($\bar{x}\pm s$

    Table  1.   Expression of hTERT mRNA in different groups of cells ($\bar{x}\pm s$

    组别hTERT mRNAtP
    模拟物组 0.51 ± 0.33 4.478 0.011
    模拟物对照组 0.69 ± 0.19
    抑制剂组 1.33 ± 0.39 5.387 0.005
    抑制剂对照组 0.83 ± 0.26
    脂质体组 0.58 ± 0.16
      注:单因素多组间比较(F = 5.403,P = 0.002)。
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    表  2  hTERT 蛋白在各组别细胞中的表达情况($\bar{x}\pm s$)(1)

    Table  2.   hTERT protein expression in each group of cells ($\bar{x}\pm s$)(1)

    组别实验结果tP
    模拟物组 0.41 ± 0.18 5.072 0.0071
    模拟物对照组 0.62 ± 0.18
    抑制剂组 1.45 ± 0.60 5.85 0.0043
    抑制剂对照组 0.83 ± 0.15
    脂质体组 0.82 ± 0.30
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    表  2  hTERT 蛋白在各组别细胞中的表达情况($\bar{x}\pm s$)(2)

    Table  2.   hTERT protein expression in each group of cells ($\bar{x}\pm s$)(2)

    组别 hTERT蛋白 t P
    模拟物组 0.41 ± 0.18 5.072 0.007
    模拟物对照组 0.62 ± 0.18
    抑制剂组 1.45 ± 0.60 5.85 0.004
    抑制剂对照组 0.83 ± 0.15
    脂质体组 0.82 ± 0.30
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  • 收稿日期:  2020-12-26
  • 刊出日期:  2021-04-09

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