目标导向液体治疗联合米力农在腹腔镜肝叶切除手术中实现控制性低中心静脉压的观察

彭博; 苏纲; 秦榕; 温戎; 殷巍

doi:10.12259/j.issn.2095-610X.S20240918

目标导向液体治疗联合米力农在腹腔镜肝叶切除手术中实现控制性低中心静脉压的观察

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240918

昆明市第一人民医院麻醉科，云南昆明　650034

基金项目: 昆明市卫生健康委员会卫生科研课题项目（2022-04-11-008）

详细信息

作者简介:
彭博（1988～），女，云南昆明人，医学学士，主治医师，主要从事心胸外科手术麻醉临床工作

通讯作者:
殷巍，E-mail：3846485@qq.com

中图分类号: R657.3
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出版历程
- 收稿日期: 2024-03-26
- 网络出版日期: 2024-09-03
- 刊出日期: 2024-09-25

Observation of Achieving Controlled Low Central Venous Pressure with Goal-directed Fluid Therapy Combined with Milrinone in Laparoscopic Hepatic Lobectomy

Dept. of Anesthesiology，First People’s Hospital of Kunming，Kunming Yunnan 650034，China

摘要

摘要: 目的探讨目标导向液体治疗联合米力农在腹腔镜肝叶切除术中实现控制性低中心静脉压（controlled low central venous pressure，CLCVP）的效果。方法选取2021 年08月至2023 年11 月昆明市第一人民医院行腹腔镜肝叶切除手术患者60 例为研究对象，采用随机数字表法将其均分为2 组，即对照组、实验组各30 例。对照组采用严格控制液体治疗（输注3 mL/kg晶胶比为1∶1的液体），根据患情使用泵注Nitroglycerin实现CLCVP；实验组则采用以SVV 1%～9%为目标进行液体治疗（输注 20 mL/kg晶胶比为1∶1的液体），并联合使用米力农实现CLCVP。记录2 组手术视野满意率、出血量、血压变化、尿量和中心静脉压以及住院时间指标。结果实验组手术医生术中视野满意率高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）；实验组术中总出血量、平均出血量均低于对照组，手术时间短于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）；2 组在术前平均动脉压方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05）；实验组在术中、术后平均动脉压均高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）；2 组在术中尿量方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05），但术后尿量实验组高于对照组，术中平均CVP值低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）；实验组总住院时间、平均住院时间均短于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论在腹腔镜肝叶切除手术中，采用目标导向液体治疗联合米力农实现控制性低中心静脉压（CLCVP）的方法，相较于传统严格液体控制，显著减少术中出血，维持循环稳定，缩短手术与住院时间，提高手术医生视野满意率。
- 腔镜肝叶切除术 /
- 目标导向液体治疗 /
- 米力农 /
- 控制性低中心静脉压技术
Abstract: Objective To investigate the effect of goal-directed fluid therapy combined with milrinone in achieving controlled low central venous pressure （CLCVP） in laparoscopic hepatic lobectomy. Methods Sixty patients undergoing laparoscopic hepatectomy at the First People’ s Hospital of Kunming City from August 2021 to November 2023 were selected as the study subjects. They were randomLy divided into two groups, with 30 cases in each group: the control group and the experimental group. The control group received strict fluid therapy （infusion of crystalloid at a ratio of 1∶1 at 3 mL/kg） and Nitroglycerin infusion to achieve CLCVP based on the patient’ s condition. The experimental group received fluid therapy targeting SVV 1%～9% （infusion of crystalloid at a ratio of 1∶1 at 20 mL/kg） and milrinone was used in combination to achieve CLCVP. Surgical field satisfaction, blood loss, blood pressure changes, urine output, central venous pressure, and length of hospital stay were recorded for both groups. Results The intraoperative surgical field satisfaction of the experimental group was higher than that of the control group, with statistically significant differences （P < 0.05）; the total intraoperative blood loss and average blood loss in the experimental group were lower than those in the control group, and the surgical time was shorter than that of the control group, with statistically significant differences （P < 0.05）. There was no statistically significant difference in preoperative mean arterial pressure between the two groups （P > 0.05）. The experimental group had higher mean arterial pressure both intraoperatively and postoperatively than the control group, with statistically significant differences （P < 0.05）. There was no statistically significant difference in urine output between the two groups intraoperatively （P > 0.05）, but postoperatively, the urine output in the experimental group was higher than that in the control group. The average CVP value was lower in the experimental group than in the control group, with statistically significant differences （P < 0.05）. The total length of hospital stay and average length of hospital stay were shorter in the experimental group than in the control group, with statistically significant differences （P < 0.05）. Conclusion In laparoscopic liver resection surgery, the use of goal-directed fluid therapy combined with milrinone to achieve controlled low central venous pressure （CLCVP） significantly reduces intraoperative bleeding, maintains hemodynamic stability, shortens surgical and hospital stay, and improves surgeon’ s satisfaction with surgical field compared to the traditional strict fluid control method.
- Endoscopic hepatic lobectomy /
- Goal-directed fluid therapy /
- Milrinone /
- Controlled low central venous pressure technique

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我国不同地区报道的成人腰痛患病率为7.21%～39.0%，年患病率为 20.88%～29.88%，已经成为我国一个非常严峻的公共卫生问题^[1]，而腰椎间盘退变（lumbar disc degeneration，LDD）是导致下腰痛的重要因素^[2]。椎间盘是人体最大的乏血管神经的组织，当椎间盘发生退变时血管神经向椎间盘内延伸，极易诱发椎间盘退变，进而出现腰痛，但其具体的发病机制有待深入探讨。髓核（nucleus pulposus，NP）细胞是椎间盘中主要的细胞，其异常增殖或过度凋亡是LDD中最明显的细胞和生化变化之一。而H₂O₂和miR-153-3p可能是调节这一过程的重要因素之一。本研究旨在阐明H₂O₂对于腰椎髓核细胞的影响及初步探讨miR-153-3p对于腰退行性病变的调节机制。

1. 材料与方法

1.1 标本来源

本实验研究标本采用从Sciencell公司购买正常腰椎髓核细胞：Human Nucleus Pulposus Cells， Catalog #4800。

1.2 实验分组

实验分为：（1）对照组；（2）H₂O₂组；（3）miR-153-3p inhibitor NC（以下简称inhibitor-NC组）；（4）miR-153-3p inhibitor（以下简称inhibitor组）。总例数n = 48，每组例数n = 12。

1.3 标本处理方法

对照组：采用髓核细胞培养基（DMEM细胞培养液、品牌：GIBCO）体外培养；H₂O₂组：髓核细胞培养基体进行体外培养，并予200 μmol/L H₂O₂处理6 h；inhibitor组：加入miR-153-3p inhibitor，是一段序列跟miR-153-3p 序列互补的抑制序列miRNA；inhibitor-NC组：miR-153-3p inhibitor NC是一段无功能序列的miRNA，起对照作用。实验时，按照要求将加入对应分组的RNA。

1.4 检测方法

1.4.1 RT-qPCR检测

miR-153-3P、COL-Ⅱ、MMP3、Nrf2 总ＲNA提取后，反转录cDNA，根据试剂盒说明书进行9PCR。反应条件95℃，30 s预变性，95℃ 5 s，60℃ 35 s共40个循环。相对表达量用2^-△△Ct法计算，引物序列见表1。

表 1 RT-qPCR 引物序列

Table 1. Rt-qPCR primer sequence

引物名称	引物序列	产物长度（bp）	数据库	种属	厂家	熔解曲线（℃）
miR-153-3p-F	TTGCATAGTCACAAAAGT	70	MIMAT0000439	人	生工	79
miR-153-3p-R	CAGTGCGTGTCGTGGAGT	70	MIMAT0000439	人	生工	79
U6-F	CTCGCTTCGGCAGCACA	80	NR_004394.1	人	生工	82.5
U6-R	AACGCTTCACGAATTTGCGT	80	NR_004394.1	人	生工	82.5
Nrf2-F	GCCAACTACTCCCAGGTTGC	122	NM_006164.5 Homo	人	生工	85.5
Nrf2-R	AACGTAGCCGAAGAAACCTCA	122	NM_006164.5 Homo	人	生工	85.5
ACTB-F	GTCATTCCAAATATGAGATGCGT	121	NM_001101.5	人	生工	85.5
ACTB-R	GCTATCACCTCCCCTGTGTG	121	NM_001101.5	人	生工	85.5

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1.4.2 WesternBlot检测Nrf2表达

加入裂解液提取总蛋白，蛋白浓度用BCA法测定。随后进行电泳，转膜，封闭1.5 h，4 ℃加封闭液稀释的一抗过夜后，TBST洗膜，加封闭液稀释的二抗37 ℃孵育90 min，加入显影液显影，利用蛋白条带的吸光度计算蛋白表达量。

1.5 检测指标

实验分两部分进行：（1）采用CCK8检测对照组及H₂O₂组细胞活力，流式检测两组细胞活性氧及线粒体膜电位，另外采用qPCR检测上述两组的基质金属蛋白酶3（MMP3）、Nrf2、miR-153-3p、Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）表达含量。（2）采用qPCR检测对照组、miR-153-3p inhibitor-NC组及miR-153-3p inhibitor组的Nrf2、miR-153-3p表达含量；采用Westernblot检测对照组、miR-153-3p inhibitor-NC组及miR-153-3p inhibitor组的Nrf2表达含量。

1.6 统计学处理

实验所得数据采用均数±标准差（$\bar x \pm s $）表示，检验方法：计量资料两样本比较采用独立样本t检验；多样本组间比较采用单因素方差分析后多重比较，检验水准取双侧α = 0.05，P < 0.05为差异有统计学意义。

2. 结果

2.1 H₂O₂对髓核细胞活性影响

用CCK8检测对照组、H₂O₂组的细胞活力进行检测，结果提示经H₂O₂处理的腰椎髓核细胞活力较对照组明显下降，差异具有统计学意义（P < 0.05），见表2。

表 2 CCK8检测对照组、H₂O₂组细胞活力比较[（$\bar x \pm s$）%]

Table 2. Comparison of cell viability between CCK8 control group and H₂O₂ group [（$\bar x \pm s $）%]

组别	细胞活力	t	P
对照组	1.00 ± 0.10	8.592	0.000^#
H₂O₂组	0.55 ± 0.08	8.592	0.000^#

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2.2 用流式细胞检测对照组、H₂O₂组的细胞活性氧、线粒体膜电位

结果提示经200 μmol/L H₂O₂处理的腰椎髓核细胞活性氧含量明显增加（P < 0.05，差异具有统计学意义）；H₂O₂组细胞线粒体膜电位较对照组明显降低（P < 0.05，差异具有统计学意义），提示H₂O₂处理的腰椎髓核细胞线粒体膜电位降低，见表3，表4。

表 3 流式检测对照组、H₂O₂组细胞活性氧（$\bar x \pm s $）

Table 3. Flow detection of reactive oxygen species in control group and H₂O₂ group （$\bar x \pm s $）

组别	平均荧光强度值	t	P
对照组	32423.33 ± 4157.62	−7.555	0.000^#
H₂O₂组	62127.83 ± 8686.98^*	−7.555	0.000^#

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表 4 流式检测对照组、H₂O₂组细胞线粒体膜电位（$\bar x \pm s $）

Table 4. Flow cytometry detection of mitochondrial membrane potential in control group and H₂O₂ group （$\bar x \pm s $）

组别	线粒体膜电位下降比例	t	P
对照组	16.43 ± 1.30	11.736	0.000^*
H₂O₂组	7.98 ± 1.19	11.736	0.000^*
注：经正态性检验，两样本符合正态分布，采用两独立样本的t检验。^*P < 0.05。

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2.3 采用qPCR检测对照组、H₂O₂组的miR-153-3p、COL-Ⅱ、MMP3、Nrf2表达含量

结果提示对照组、H₂O₂组Nrf2表达量无明显差异（P > 0.05），H₂O₂组的miR-153-3p、MMP3表达量较对照组明显减少，而其COL-Ⅱ表达量较对照组明显减少（P < 0.05，差异具有统计学意义），见表5。

表 5 qPCR检测对照组、H₂O₂组相关miRNA或mRNA相对表达量（$ \bar x \pm s $）

Table 5. Relative expression levels of miRNA or mRNA in control group and H₂O₂ group detected by qPCR （$\bar x \pm s $）

组别	miR-153-3P	COL-Ⅱ	MMP3	Nrf2
对照组	1.01 ± 0.18	1.01 ± 0.16	1.01 ± 0.16	1.01 ± 0.15
H₂O₂组	2.29 ± 0.44^*	0.52 ± 0.16^*	2.52 ± 0.75^*	0.98 ± 0.13
与对照组相比，^*P < 0.05。

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2.4 采用qPCR检测对照组、miR-153-3p inhibitor-NC组及miR-153-3p inhibitor组的Nrf2、miR-153-3p相对表达量

结果提示：与对照组、inhibitor-NC组相比，inhibitor组的miR-153-3p表达量降低、Nrf2表达量增高（P < 0.05，差异具有统计学意义）；而inhibitor-NC组与对照组的Nrf2、 miR-153-3p表达量无明显差异（P > 0.05），见表6，图1。

表 6 qPCR检测3组的Nrf2、miR-153-3p相对表达量（$\bar x \pm s $）

Table 6. Relative expression levels of Nrf2 and miR-153-3p in the three groups detected by QPCR （$\bar x \pm s $）

分组	miR-153-3p	NRF2
对照组	1.01 ± 0.18	1.01 ± 0.18
miR-153-3p inhibitor-NC组	1.19 ± 0.22^*	0.98 ± 0.18
miR-153-3p inhibitor组	0.37 ± 0.07^*	2.65 ± 0.41^*
^*P < 0.05。

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图 1 qPCR检测3组miR-153-3p相对表达量图

与inhibitor-NC组相比，^**P < 0.01。

Figure 1. Relative expression of miR-153-3p in the three groups detected by qPCR

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2.5 采用Westernblot检测对照组、inhibitor-NC组及nhibitor组的Nrf2表达含量

结果提示，与对照组、inhibitor-NC组相比，inhibitor组胞质及胞核中Nrf2表达量增高（P < 0.05，差异具有统计学意义），而inhibitor-NC组胞质及胞核中Nrf2表达量与对照组无明显差异（P > 0.05），见表7。

表 7 Westernblot检测3组的Nrf2相对表达量（$\bar x \pm s $）

Table 7. Relative expression of Nrf2 in the three groups detected by Westernblot （$\bar x \pm s $）

分组	胞质	胞核
对照组	1.00 ± 0.17	1.00 ± 0.14
miR-153-3p inhibitor-NC组	1.10 ± 0.13	0.95 ± 0.15
miR-153-3p inhibitor组	1.47 ± 0.23^*	2.33 ± 0.41^*
与对照组，inhibitor-NC组相比，^*P < 0.05。

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inhibitor-NC组胞质及胞核中的Nrf2表达量与对照组比较，P > 0.05，差异无统计学意义，见图2。

图 2 Westernblot检测3组的Nrf2相对表达量

^*P < 0.05。

Figure 2. Relative expression levels of Nrf2 detected by Western blot in the three groups.

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3. 讨论

3.1 NPCs退变和ECM代谢失衡是LDD的主要病理特征

椎间盘主要由外周的纤维环、中央的髓核和上下终板组成。髓核和纤维环的细胞数量较少，但细胞外基质（ECM）丰富，约占整体的99%，后者主要由胶原（Ⅰ、Ⅱ型）和蛋白聚糖组成。髓核细胞（NPCs）可产生蛋白聚糖、Ⅱ型胶原和其他ECM因子，有利于维持椎间盘完整性。LDD是一个复杂的过程，典型特征是ECM成分的丢失。LDD的早期退变出现在NPCs中，表现为水和蛋白聚糖的丢失，NPCs功能退化，合成分泌Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的能力减弱，ECM合成与分解代谢失衡，使椎间盘结构与成分发生变化，导致椎间盘功能减弱或丧失^[3]，引起神经痛甚至功能障碍。

在正常椎间盘中，ECM合成和降解处于动态平衡状态，其代谢依赖于基质金属蛋白酶（MMPs）、蛋白聚糖酶与基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）之间的平衡调节^[4]。MMPs是一类蛋白水解酶，可降解除多糖外的几乎所有ECM成分。蛋白聚糖酶是解聚素样金属蛋白酶家族的重要成员（ADAMTSs），主要降解蛋白聚糖。MMPs和ADAMTSs的活性可被内源性特异性的TIMPs所抑制。研究发现，在不同退变程度的人髓核组织样本中，MMPs和ADAMTSs表达明显升高，TIMPs表达与椎间盘退变程度呈负相关^[5]，因而会导致ECM成分降解增强，引起椎间盘结构和成分的改变，最终导致LDD。故MMPs、ADAMTSs与TIMPs之间的失衡在LDD的发病机制中发挥重要作用。

3.2 氧化应激通过激活多种通路影响NPCs功能以及ECM代谢，进而介导LDD

LDD病因复杂，越来越多的证据表明年龄、性别、环境、行为影响、氧化应激、炎症和遗传与LDD风险相关^[6]。其中，氧化应激能够通过加速椎间盘细胞的衰老、凋亡，调节细胞自噬以及ECM的合成与降解等多种途径介导椎间盘的退变，被认为是引起LDD的主要因素之一。活性氧簇（ROS）是细胞氧化代谢过程中的必然产物，广泛参与信号转导，代谢调节、程序性细胞死亡，衰老和椎间盘的表型转换等^[7]。当各种原因造成机体内ROS产生增多或机体对抗ROS能力下降时，机体处于氧化应激状态，此时ROS可通过细胞膜直接造成DNA、蛋白质、脂质的氧化损伤，从而引起NPCs功能损伤。在本实验中，H₂O₂组中腰椎髓核细胞活性氧含量增加、MMP3表达增加、Col Ⅱ含量下降，可以说明氧化应激可以影响NPCs功能以及ECM代谢，进而介导LDD。而这一进程可能与ROS可激活p38MAPK、Wnt/β-catenin等多种可引起炎症反应的信号通路有关^[8-9]。

3.3 线粒体自噬清除受损线粒体，减少ROS积聚，miR153/Nrf2/PINK1通路在其中发挥重要作用

在本实验中，H₂O₂处理的腰椎髓核细胞线粒体膜电位下降，说明H₂O₂诱导的NPCs衰老和凋亡与线粒体功能障碍有关。线粒体是产生ROS的能量工厂，线粒体自噬是神经退行性疾病中重要的细胞抗氧化途径，通过自噬途径对受损线粒体的选择性降解，在氧化应激过程中改善线粒体功能障碍，维持线粒体质量控制。大量研究表明，线粒体自噬可以保护NPCs免受线粒体途径诱导的氧化应激、衰老、细胞凋亡^[10-12]。

Nrf2作为一种可以调节含有细胞保护基因的抗氧化反应元件（ARE）的表达的转录因子，可进入细胞核并与包含靶基因的ARE序列结合，可激活靶基因的转录，参与氧化应激和ROS代谢过程。最近研究证实，在神经元中，Nrf2通过激活PINK1启动子的ARE序列，进而上调PINK1，PINK1通过清除受损的线粒体和减少ROS等多种机制参与线粒体稳态的维持，使细胞在细胞存活方面具有优势^[13-14]。此外，通过Nrf2/PINK1途径可调节和减弱管状细胞的氧化应激损伤和凋亡以维持线粒体质量，由此激活PINK1/Parkin诱导的线粒体自噬，影响下游Drp1和Mfn2表达量，最终可改善ROS的生成。

microRNA（miRNAs）是一类非编码小RNA，参与细胞增殖、ECM代谢、自噬、炎症反应、氧化应激、凋亡、线粒体功能调节等多种细胞活动，介导多种生理和病理反应。其中，miR-153被认为是一种神经富集miRNAs，在中枢神经系统的发育和功能以及神经退行性疾病的发病机制中均发挥重要作用。研究发现，miR-153靶向Nrf2 3’UTR，上调miR-153表达可影响Nrf2及其活化功能，进而削弱了神经元的抗氧化防御，使神经元死亡增多^[15]，还可升高ROS水平，通过ROS激活p38MAPK通路^[16]。大量证据已表明，miRNAs在退行性和正常NPCs之间存在差异表达，可通过调节MMPs的表达，进而影响ECM代谢，参与LDD进程^[17]。本实验结果已显示miR-153-3p可调控Nrf2表达，而调节miR-153-3p对于LDD进程的影响及相关机制，需要进一步地深入研究。

H₂O₂可引起腰椎髓核细胞活性氧含量增加、细胞活力下降、线粒体膜电位下降、MMP3增加、Col Ⅱ含量下降、miR-153-3p表达增加，说明了H₂O₂可引起腰椎髓核细胞线粒体功能障碍，导致ROS增加，引起腰椎髓核细胞外基质成分改变，从而加速腰椎间盘细胞的衰老、凋亡，促进LDD进程。Nrf2是PINK1基因转录调控因子，PINK1通过清除受损的线粒体和减少ROS等多种机制参与维持线粒体稳态，抑制miR-153-3p表达，可上调腰椎髓核细胞Nrf2表达水平，提示miR-153-3p参与存进LDD进程的过程可能与其调控Nrf2表达、调节线粒体自噬过程有关，但是相关机制有待进一步深入研究。

表 1 2组一般资料比较[（$\bar x \pm s $）/n（%）]

Table 1. Comparison of general data between the two groups[（$\bar x \pm s $）/n（%）]

组别	n	性别		平均年龄（岁）	疾病类型			切除部位
组别	n	男	女	平均年龄（岁）	肝血管瘤	肝内胆管结石	肝占位性病变	左半肝	肝左外侧
对照组	30	18（60.00）	12（40.00）	42.5±12.2	14（46.67）	11（36.67）	5（16.67）	22（73.33）	8（26.67）
实验组	30	20（66.67）	10（33.33）	40.7±14.4	12（40.00）	11（36.67）	7（23.33）	21（70.00）	9（30.00）
t/χ²	−	0.327		0.633	1.163			0.064
P	−	0.567		0.530	0.559			0.800

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表 2 2组外科医生对术中视野满意率情况比较[n（%）]

Table 2. Comparison of surgeons' satisfaction rates with intraoperative surgical fields between the two groups[n（%）]

组别	n	优	良	中	差	术中视野满意率
对照组	30	5（16.67）	15（50.00）	9（30.00）	1（3.33）	20（66.67）
实验组	30	23（76.67）	5（16.67）	2（6.67）	0（0.00）	28（93.33）
χ²	−	−	−	−	−	6.269
P	−	−	−	−	−	0.012^*
^*P < 0.05。

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表 3 2组总出血量、平均出血量及手术时间对比（$\bar x \pm s $）

Table 3. Comparison of total blood loss，average blood loss，and operation time between the two groups （$\bar x \pm s $）

组别	n	术中总出血量（mL）	平均出血量（mL）	手术时间（min）
对照组	30	690.26±110.32	667.25±102.55	142.03±75
实验组	30	346.19±52.66	289.61±46.52	104.14±51
t	−	8.801	17.722	2.631
P	−	0.001^*	0.001^*	0.010^*
^*P < 0.05。

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表 4 2组不同时间点MAP值情况比较（$\bar x \pm s $）

Table 4. Comparison of MAP values at different time points between the two groups （$\bar x \pm s $）

组别	n	术前（mmHg）	术中（mmHg）	术后（mmHg）
对照组	30	95.81±11.20	70.50±10.09	77.52±9.67
实验组	30	94.30±10.24	78.63±10.28	84.61±9.55
F	−	0.004	62.031	49.634
P	−	0.952	0.001^*	0.001^*
^*P < 0.05。

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表 5 2组术中平均CVP值、术中及术后尿量变化情况比较（$\bar x \pm s $）

Table 5. Comparison of average intraoperative CVP values and changes in intraoperative and postoperative urine volume between the two groups （$\bar x \pm s $）

组别	n	术中平均CVP （mmHg）	术中尿量（mL）	术后尿量（mL）
对照组	30	5.30±1.80	1283.33±422.12	779.32±253.14
实验组	30	3.81±1.50	1268.81±392.41	1086.71±211.63
t	−	7.790	0.251	5.208
P	−	0.001^*	0.803	0.001^*
^*P < 0.05。

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表 6 2组总住院时间、平均住院时间情况比较（$\bar x \pm s $，d）

Table 6. Comparison of total hospital stay and average hospital stay between the two groups（$\bar x \pm s $，d）

组别	总住院时长	平均住院时长
对照组（n=30）	149.00±5.00	10.24±4.13
实验组（n=30）	107.00±3.00	7.27±2.16
t	13.225	10.526
P	0.001^*	0.001^*
^*P < 0.05。

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参考文献(17)

[1]	Wu G,Chen T,Chen Z. Effect of controlled low central venous pressure technique on postoperative hepatic insufficiency in patients undergoing a major hepatic resection[J]. Am J Transl Res,2021,13(7):8286-8293.
[2]	王小梅,曹琴,成可熹,等. 不同体位控制低中心静脉压在腹腔镜肝切除术中的应用[J]. 实用医院临床杂志,2020,17(3):175-177.
[3]	Liu J,Cao B,Luo Y,et al. Risk factors of major bleeding detected by machine learning method in patients undergoing liver resection with controlled low central venous pressure technique[J]. Postgraduate Medical Journal,2023,99(1178):1280-1286. doi: 10.1093/postmj/qgad087
[4]	赵博,李乐,杨晨,等. 控制性低中心静脉压对老年患者腹腔镜肝叶切除术脑血管事件的影响[J]. 国际老年医学杂志,2020,41(3):154-156.
[5]	郭高锋,王洋洋,容雄飞,等. 不同SVV指导术中液体治疗对腹腔镜肝叶切除术中出血及术后肾功能的影响[J]. 中华麻醉学杂志,2021,41(5):584-588.
[6]	Wang F,Sun D,Zhang N,et al. The efficacy and safety of controlled low central venous pressure for liver resection: A systematic review and meta-analysis[J]. Gland Surgery,2020,9(2):311-320. doi: 10.21037/gs.2020.03.07
[7]	Wang F,Sun D,Zhang N,et al. The efficacy and safety of controlled low central venous pressure for liver resection: A systematic review and meta-analysis[J]. Gland Surgery,2020,9(2):31120-31320.
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[10]	刘辉,李志霞,谢志伟. 中心静脉压联合每搏量变异度为目标导向的液体治疗在腹腔镜肝叶切除术中的应用[J]. 山西医药杂志,2021,50(10):1672-1674.
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期刊类型引用(3)

1.	杨人香，王巍，马怡，苏欣，苏会岚，李娜. 正电性金纳米-核酸适配体纳米生物传感器快速检测野生菌中的α-鹅膏毒肽. 食品安全质量检测学报. 2023(10): 76-83 . 百度学术
2.	张慧洁，杨根梦，王浩伟，曾晓锋，李桢. 鹅膏毒肽中毒动物模型建立的研究进展. 中国实验动物学报. 2023(08): 1078-1084 . 百度学术
3.	马春茂，彭爱华，曹钰. 鹅膏毒肽蘑菇中毒的研究进展. 华西医学. 2023(11): 1748-1754 . 百度学术

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1. 材料与方法
1.1 标本来源
1.2 实验分组
1.3 标本处理方法
1.4 检测方法
1.5 检测指标
1.6 统计学处理
2. 结果
2.1 H2O2对髓核细胞活性影响
2.2 用流式细胞检测对照组、H2O2组的细胞活性氧、线粒体膜电位
2.3 采用qPCR检测对照组、H2O2组的miR-153-3p、COL-Ⅱ、MMP3、Nrf2表达含量
2.4 采用qPCR检测对照组、miR-153-3p inhibitor-NC组及miR-153-3p inhibitor组的Nrf2、miR-153-3p相对表达量
2.5 采用Westernblot检测对照组、inhibitor-NC组及nhibitor组的Nrf2表达含量
3. 讨论
3.1 NPCs退变和ECM代谢失衡是LDD的主要病理特征
3.2 氧化应激通过激活多种通路影响NPCs功能以及ECM代谢，进而介导LDD
3.3 线粒体自噬清除受损线粒体，减少ROS积聚，miR153/Nrf2/PINK1通路在其中发挥重要作用

1. 材料与方法
1.1 标本来源
1.2 实验分组
1.3 标本处理方法
1.4 检测方法
1.5 检测指标
1.6 统计学处理
2. 结果
2.1 H₂O₂对髓核细胞活性影响
2.2 用流式细胞检测对照组、H₂O₂组的细胞活性氧、线粒体膜电位
2.3 采用qPCR检测对照组、H₂O₂组的miR-153-3p、COL-Ⅱ、MMP3、Nrf2表达含量
2.4 采用qPCR检测对照组、miR-153-3p inhibitor-NC组及miR-153-3p inhibitor组的Nrf2、miR-153-3p相对表达量
2.5 采用Westernblot检测对照组、inhibitor-NC组及nhibitor组的Nrf2表达含量
3. 讨论
3.1 NPCs退变和ECM代谢失衡是LDD的主要病理特征
3.2 氧化应激通过激活多种通路影响NPCs功能以及ECM代谢，进而介导LDD
3.3 线粒体自噬清除受损线粒体，减少ROS积聚，miR153/Nrf2/PINK1通路在其中发挥重要作用

参考文献(17)

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[1]	张洪波, 李振龙, 吕瑛, 张益绰, 裘翔铭, 黄婷婷. 单孔与双孔电视胸腔镜肺叶切除术治疗肺癌的临床疗效比较, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240419
[2]	陈磊, 唐彤, 张代忠, 柳凤玲, 杨中秋, 严欢. 精准肝蒂解剖技术辅助腹腔镜肝癌切除术的效果及对炎症免疫应激、肝功能的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240417
[3]	李国松, 李大华, 宋国杰, 杨晨, 戈佳云, 邵国辉. 腹腔镜脾切除术在外伤性脾破裂中的应用价值, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230902
[4]	柴旋, 王忠慧, 汪亚宏, 刘光顺, 吕振超, 邵世豪. 窒息氧合技术在胸腔镜肺段切除术中的应用, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230502
[5]	李珊珊, 杨会, 吕振超, 赵敏, 刘光顺, 王忠慧. GDFT联合小剂量甲氧明在胸腹联合腔镜食管癌根治术中的应用, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20201105
[6]	文政琦. 腹腔镜下经肛提肌外腹会阴联合切除术治疗低位直肠癌的临床应用, 昆明医科大学学报.
[7]	顾永芳. 姑息性手术与胰十二指肠切除术治疗胰头癌合并壶腹周围癌的远期疗效, 昆明医科大学学报.
[8]	陆启瑜. 经皮肝胆囊穿刺引流联合腹腔镜胆囊切除术治疗高龄高危急性梗阻化脓性胆囊炎56例, 昆明医科大学学报.
[9]	潘子鹏. 腹腔镜阑尾切除术治疗急性阑尾炎的临床疗效及其安全性评价, 昆明医科大学学报.
[10]	谷彬. 低领小切口甲状腺切除术115例, 昆明医科大学学报.
[11]	蒋海燕. 目标导向液体治疗对高龄胃肠道肿瘤患者术后的影响, 昆明医科大学学报.
[12]	顾永芳. 规则与非规则性肝叶切除术治疗肝胆管结石疗效与安全性观察, 昆明医科大学学报.
[13]	陶建平. 目标导向液体治疗对失血性休克犬输液量及肺水通道蛋白1、5的影响, 昆明医科大学学报.
[14]	潘宜双. 解剖性肝切除在治疗双侧肝内胆管结石中的临床应用价值, 昆明医科大学学报.
[15]	李涓. 应用宫腹腔镜切除术治疗子宫纵隔53例妊娠临床分析, 昆明医科大学学报.
[16]	孙德云. 精准肝切除术治疗复杂肝肿瘤的临床体会, 昆明医科大学学报.
[17]	杨世昆. 肝右三叶切除并门静脉切除和重建治疗肝门胆管癌, 昆明医科大学学报.
[18]	. 完全胸腔镜下肺叶切除术治疗非小细胞肺癌54例临床分析, 昆明医科大学学报.
[19]	. 左肝外叶切除治疗左肝内胆管结石79例疗效分析, 昆明医科大学学报.
[20]	黄松泉. 左肝外叶切除治疗左肝内胆管结石79例疗效分析, 昆明医科大学学报.

留言板

目标导向液体治疗联合米力农在腹腔镜肝叶切除手术中实现控制性低中心静脉压的观察

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240918

作者简介: 彭博（1988～），女，云南昆明人，医学学士，主治医师，主要从事心胸外科手术麻醉临床工作

通讯作者: 殷巍，E-mail：3846485@qq.com

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