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宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的阴道微生态特点

谭丁及,  尹洪莉,  朱锐,  张曦,  余鑫,  飞勇,  李昕,  段铭,  何亮,  杨宏英

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文章导航 > 昆明医科大学学报  > 2021 >  42(8): 118-122
谭丁及, 尹洪莉, 朱锐, 张曦, 余鑫, 飞勇, 李昕, 段铭, 何亮, 杨宏英. 宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的阴道微生态特点[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(8): 118-122. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210821
引用本文: 谭丁及, 尹洪莉, 朱锐, 张曦, 余鑫, 飞勇, 李昕, 段铭, 何亮, 杨宏英. 宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的阴道微生态特点[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(8): 118-122. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210821
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Ding-ji TAN, Hong-li YIN, Rui ZHU, Xi ZHANG, Xin YU, Yong FEI, Xin LI, Ming DUAN, Liang HE, Hong-ying YANG. Analysis of Vaginal Microecological in Women with Cervical Intraepithelial Neoplasia and Cervical Cancer[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(8): 118-122. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210821
Citation: Ding-ji TAN, Hong-li YIN, Rui ZHU, Xi ZHANG, Xin YU, Yong FEI, Xin LI, Ming DUAN, Liang HE, Hong-ying YANG. Analysis of Vaginal Microecological in Women with Cervical Intraepithelial Neoplasia and Cervical Cancer[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(8): 118-122. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210821
shu

宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的阴道微生态特点

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210821
  • 1.

    昆明医科大学第三附属医院/云南省肿瘤医院/云南省癌症中心 检验科

  • 2.

    妇科

  • 3.

    放射科，云南 昆明　650118

基金项目: 国家癌症中心及中国癌症基金会基金资助项目（NCC2017A34，NCC2017A33）；云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金资助项目[2018FE001（-248）]；云南省科技厅基础研究专项基金资助项目（202001AS070033）；云南省卫生科技计划基金资助项目（2018NS0062）；云南省教育厅科学研究基金资助项目（2020J0196）；昆明医科大学研究生创新基金资助项目（2021S069）
详细信息
    作者简介:

    谭丁及（1996～），女，重庆永川人，在读硕士研究生，主要从事阴道微生物研究工作。尹洪莉和谭丁及对本文有同等贡献

    通讯作者:

    何亮，E-mail：2464606392@qq.com

    杨宏英，E-mail：jyahy@tom.com

  • 中图分类号: R737.33

Analysis of Vaginal Microecological in Women with Cervical Intraepithelial Neoplasia and Cervical Cancer

  • 1.

    Dept. of Laboratory

  • 2.

    Dept. of Gynecology

  • 3.

    Dept. of Radiology，The 3rd Affiliated Hospital of Kunming Medical University/Cancer Hospital of Yunnan/Cancer Center of Yunnan，Kunming Yunnan 650118，China

摘要

    摘要
  • 摘要:   目的  研究宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者阴道微生态特点，为宫颈疾病预防和治疗提供参考。  方法  选取昆明医科大学第三附属医院（云南省肿瘤医院）2018年7月至2018年10月病理诊断为宫颈上皮内瘤变患者（n = 65）、宫颈癌患者（n = 51）和同期体检健康女性（n = 88）为研究对象，收集阴道拭子，通过显微镜镜检进行微生态评价。  结果  与健康组相比，宫颈上皮内瘤变组在菌群密集度构成上，差异有统计学意义（P < 0.05），在菌群多样性、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异无统计学意义（P > 0.05）。宫颈癌组与健康组在菌群密集度、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异均有统计学意义（P < 0.05），在菌群多样性构成上，差异无统计学意义（P > 0.05）。  结论  宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者阴道微生态失调，以宫颈癌失调最为显著。尽早发现阴道微生态失调，恢复阴道微生态平衡，有利于防治宫颈癌。
    Abstract:   Objective  To investigate the characteristics of vaginal microecology in patients with cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer, and provide information for the prevention and treatment of cervical diseases.  Methods  From July 2018 to October 2018, patients with cervical intraepithelial neoplasia （n = 65）, patients with cervical cancer （n = 51） and healthy control （n = 88） in Yunnan Cancer Hospital were selected. Vaginal swabs were collected and microecological assessment were performed by microscopic examination.  Results  Compared with healthy group, there was a significant difference in the composition of bacterial density in the cervical intraepithelial neoplasia group （P < 0.05）, despite there was no significant difference in flora diversity, dominant bacteria, pH and Nugent score （P > 0.05）. There were significant differences in flora density, dominant bacteria, pH and Nugent score composition between the cervical cancer group and the healthy group （P < 0.05） and there was no significance in the composition of bacterial diversity （P > 0.05）.  Conclusion  Patients with cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer have microecological imbalance, especially in cervical cancer patients. Early detection and restoration of female vaginal microecological imbalance are beneficial for the prevention and treatment of cervical cancer.
    • HTML全文

  • 宫颈癌（cervical cancer，CC）是女性生殖道最高发的恶性肿瘤，据2018年癌症年报报道[1]，宫颈癌发病率和死亡率位居全球女性第4位，发展中国家第2位。宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宫颈癌前病变，如未治疗或干预经过数年或数十年可进展为宫颈癌，2种病变的发生与感染高危型HPV、吸烟、过早性生活、多个性伴侣等因素有关。近年研究表明阴道微生态失衡是促进宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生的重要因素[2-4]。本研究旨在分析宫颈上皮内瘤变及宫颈癌女性阴道微生态特点，为宫颈疾病预防和治疗提供资料。

    1.   资料与方法

    1.1   资料来源

    从云南省肿瘤医院选取2018年7月至2018年10月病理诊断为宫颈上皮内瘤变患者（n = 65），宫颈癌患者（n = 51）及健康体检女性（n = 88）为研究对象。纳入标准[5]：2周内未使用抗生素及阴道用药，就诊3d内未进行阴道灌洗，24h内未进行性交，自愿参与女性。排除标准[5]：妊娠和月经期女性，患全身系统疾病及不愿参与女性。健康组年龄20～71岁，平均（43.86±9.80）岁；宫颈上皮内瘤变组患者年龄 28～70岁，平均（41.75±9.20）岁；宫颈癌组患者年龄25～71岁，平均（46.20±9.90）岁。各组间年龄组成，差异无统计学意义（P > 0.05）。

    1.2   阴道微生态评估

    用无菌棉拭子于子宫颈口与粘膜交界处逆时针旋转3圈，停留10s，取阴道分泌物进行阴道微生态评价，评价内容包括菌群密集度、菌群多样性、优势菌、pH、Nugent评分。菌群密集度Ⅰ级为油镜下细菌1～9个，Ⅱ级10～99个，Ⅲ级 > 100个，Ⅳ级细菌聚集成团或密集覆盖粘膜上皮。菌群多样性Ⅰ级为油镜下细菌1～3种，Ⅱ级4～6种，Ⅲ级7～9种，Ⅳ级 > 10种。菌群密集度和菌群多样性以未见/Ⅰ级和Ⅳ级为异常菌群，Ⅱ级和Ⅲ级为正常菌群。优势菌为革兰阳性大杆菌（乳杆菌）。pH用pH精密试纸测，3.8～4.5为正常， > 4.5为异常。Nugent评分标准[6] 0～3为正常，4～6为中间型细菌性阴道炎，≥7分为细菌性阴道炎（bacterial vaginitis，BV）。

    1.3   统计学处理

    采用SPSS23.0软件对结果进行统计分析。符合正态分布的计量资料用均数±标准差（$\bar x \pm s$）表示，各组均数比较用方差分析。计数资料用率（%）表示，率、构成比分析用χ2检验或H检验。检验水准α= 0.05。

    2.   结果

    2.1   宫颈上皮内瘤变组与健康组阴道微生态比较

    宫颈上皮内瘤变组与健康组相比，两者在菌群密集度构成上，差异有统计学意义（P < 0.05），CIN组菌群密集度未见/Ⅰ级构成比为67.69%高于健康组45.45%，CIN组菌群密集度Ⅳ级构成比例为1.54%高于健康组0.00%，CIN组菌群密集度Ⅱ/Ⅲ级构成比30.77%低于健康组54.55%。2组在菌群多样性、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异无统计学意义（P > 0.05），见表1。

    表  1  健康组、宫颈上皮内瘤变组阴道微生态比较[n（%）]
    Table  1.  Comparison of vaginal microecology between healthy control and cervical intraepithelial neoplasia group [n（%）]
    项目健康组（n = 88）宫颈上皮内瘤变组（n = 65）χ2/ZP
    菌群密集度
    　未见/Ⅰ级 40（45.45） 44（67.69） −2.641 0.009*
    　Ⅱ/Ⅲ级 48（54.55） 20（30.77）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.54）
    菌群多样性 −0.867 0.386
    　未见/Ⅰ级 74（84.09） 58（89.23）
    　Ⅱ/Ⅲ级 14（15.91） 6（9.23）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.54）
    优势菌
    　革兰阳性大杆菌 62（70.45） 52（80.00） 5.174 0.159
    　革兰阳性球菌 4（4.55） 2（3.08）
    　革兰阴性短杆菌 1（1.14） 3（4.62）
    　无 21（23.86） 8（12.30）
    pH
    　3.8～4.5 51（57.95） 47（73.31） 3.345 0.067
    　> 4.6 37（42.05） 18（27.69）
    Nugent评分（分）
    　0～3 54（56.81） 46（70.77） −1.366 0.172
    　4～6 30（34.09） 19（29.23）
    　> 7 4（9.09） 0（0.00）
    　　与健康组比较，*P < 0.05。
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    2.2   宫颈癌组与健康组阴道微生态比较

    宫颈癌组与健康组在菌群密集度、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异有统计学意义（P < 0.05）。宫颈癌组菌群密集度未见/I级构成比70.59%高于健康组45.45%，优势菌乳杆菌构成比为45.1%低于健康组70.45%，pH > 4.6构成比80.39%高于健康组42.05%，Nugent评分4～6分构成比62.75%高于健康组34.09%。2组女性在菌群多样性构成上，差异无统计学意义（P > 0.05），见表2。

    表  2  健康组、宫颈癌组阴道微生态比较[n（%）]
    Table  2.  Comparison of vaginal microecology between healthy control and cervical cancer group [n（%）]
    项目健康组（n = 88）宫颈癌组（n = 51）χ2/ZP
    菌群密集度
    　未见/Ⅰ级 40（45.45） 36（70.59） −2.859 0.004*
    　Ⅱ/Ⅲ级 48（54.55） 15（29.41）
    　Ⅳ级 0（0.00） 0（0.00）
    菌群多样性
    　未见/Ⅰ级 74（84.09） 45（88.24） −0.816 0.537
    　Ⅱ/Ⅲ级 14（15.91） 5（9.80）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.96）
    优势菌
    　革兰阳性大杆菌 62（70.45） 23（45.10） 10.543 0.014*
    　革兰阳性球菌 4（4.55） 8（15.69）
    　革兰阴性短杆菌 1（1.14） 2（3.92）
    　无 21（23.86） 18（35.29）
    pH
    　3.8～4.5 51（57.95） 10（19.61） 19.28 < 0.001*
    　> 4.6 37（42.05） 41（80.39）
    Nugent评分（分）
    　0～3 54（61.36） 17（33.33） −2.948 0.003*
    　4～6 30（34.09） 32（62.75）
    　> 7 4（0.05） 2（3.92）
    　　与健康组比较，*P < 0.05。
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    3.   讨论

    我国女性宫颈癌每年新发病例高达13.15万，死亡人数约5.3万[7]。目前普遍认为宫颈癌的发生由持续感染高危险型HPV引起。多数育龄妇女会感染HPV，他们大多数通过阴道免疫系统自发清除病毒，少数免疫力低下、阴道微生物失调者会持续感染HPV并进展为宫颈上皮内瘤变和宫颈癌[8]。宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者与健康女性相比基因表达水平发生改变[9]，而且阴道微生态有所不同。阴道微生态是由正常阴道菌群、阴道局部免疫系统、机体内分泌系统及阴道解剖结构构成的系统。正常情况下阴道微生态处于动态平衡，预防生殖道感染，一旦失衡则引发多种妇科疾病，促进宫颈病变发生。梁月娟等[10]通过荟萃分析得出阴道微生态失衡增加宫颈病上皮内瘤变风险，国外学者[11]也发现阴道菌群失衡与增加宫颈癌变风险有关。

    笔者分别比较88例健康女性与65例宫颈上皮内瘤变患者、51例宫颈癌患者的阴道微生态差异，发现宫颈上皮内瘤变组菌群密集度与健康组相比差异有统计学意义（P < 0.05）；宫颈癌组与健康组相比，两者在菌群密集度、优势菌、pH、Nugent评分构成上差异均有统计学意义（P < 0.05）。郑晶晶等[12]研究表明宫颈上皮内瘤变患者和宫颈癌患者的菌群密集度与多样性较健康对照组低。陈剑[13]的研究同样表明宫颈癌前病变患者和宫颈癌患者菌群密集度Ⅰ/Ⅳ级、菌群多样性Ⅰ/Ⅳ级比例均高于健康对照组。与笔者的研究发现相似，宫颈上皮内瘤变、宫颈癌患者菌群密集度和多样性未见/Ⅰ级、Ⅳ级均高于健康组女性。

    乳杆菌是健康阴道内的主要菌属，其在维持阴道健康过程中发挥关键作用。乳杆菌紧密黏附于阴道上皮，抑制病原微生物黏附[14]；产生物种特异性的代谢产物（如细胞外多糖），发挥抗肿瘤作用[15-16]；调节阴道免疫系统，减少阴道炎症[17]；维持菌群平衡，减少HPV感染[18-19]。目前众多研究表明，乳杆菌数量和阴道微生物组成与宫颈上皮内瘤变进展或消退有关，也与降低宫颈癌发生率有关。Anita等[20]对87名未经治疗的CIN2+女性进行为期2 a的观察，1 a之后回访发现初次观察以乳杆菌为主的女性CIN2+更有可能消退；相反，其他厌氧细菌增加，乳杆菌减少的女性更有可能持续CIN2+。Wang等[3]对11篇文献进行荟萃分析表明乳杆菌数量多与减少宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生相关。综上所述，乳杆菌是健康阴道内的保护性因素，乳杆菌减少与宫颈病变密切相关。笔者的研究发现宫颈癌组乳杆菌比例较健康组低，说明宫颈癌女性阴道微生物失调。逯彩虹[21]对宫颈癌患者阴道微生物分布特点研究表明宫颈癌患者阴道乳杆菌定植密度降低，这与笔者研究相似。

    笔者的研究发现宫颈癌组pH > 4.5的比例高于健康对照组。与笔者研究结果相似，刘晓霞等[22]研究表明宫颈癌患者的阴道pH（4.8±0.03）明显高于对照组（4.0±0.03）。国外研究[23]表明阴道pH升高与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生有关。Nugent评分多用于诊断细菌性阴道炎，评分4～6分可诊断为中间型细菌性阴道炎，评分≥7则诊断为BV。Silva等[24]研究表明BV是促进宫颈病变进展的因素。笔者的研究发现宫颈癌组Nugent评分4～6分、≥7分的构成比分别高于健康组。

    近年来阴道微生态与宫颈病变的关联受到广泛关注但两者相互作用的具体机制尚未完全阐明，笔者应扩大样本量进一步评价阴道微生态与宫颈疾病进展的相关性，为宫颈癌预防提供新思路。总之，笔者的研究表明宫颈上皮内瘤变和宫颈癌阴道微生态失调，以宫颈癌失调最为显著。妇科临床工作中尽早发现女性阴道微生态失调，进而恢复阴道微生态平衡，有利于防治宫颈癌。

  • 表  1  健康组、宫颈上皮内瘤变组阴道微生态比较[n（%）]

    Table  1.   Comparison of vaginal microecology between healthy control and cervical intraepithelial neoplasia group [n（%）]

    项目健康组（n = 88）宫颈上皮内瘤变组（n = 65）χ2/ZP
    菌群密集度
    　未见/Ⅰ级 40（45.45） 44（67.69） −2.641 0.009*
    　Ⅱ/Ⅲ级 48（54.55） 20（30.77）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.54）
    菌群多样性 −0.867 0.386
    　未见/Ⅰ级 74（84.09） 58（89.23）
    　Ⅱ/Ⅲ级 14（15.91） 6（9.23）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.54）
    优势菌
    　革兰阳性大杆菌 62（70.45） 52（80.00） 5.174 0.159
    　革兰阳性球菌 4（4.55） 2（3.08）
    　革兰阴性短杆菌 1（1.14） 3（4.62）
    　无 21（23.86） 8（12.30）
    pH
    　3.8～4.5 51（57.95） 47（73.31） 3.345 0.067
    　> 4.6 37（42.05） 18（27.69）
    Nugent评分（分）
    　0～3 54（56.81） 46（70.77） −1.366 0.172
    　4～6 30（34.09） 19（29.23）
    　> 7 4（9.09） 0（0.00）
    　　与健康组比较，*P < 0.05。
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    表  2  健康组、宫颈癌组阴道微生态比较[n（%）]

    Table  2.   Comparison of vaginal microecology between healthy control and cervical cancer group [n（%）]

    项目健康组（n = 88）宫颈癌组（n = 51）χ2/ZP
    菌群密集度
    　未见/Ⅰ级 40（45.45） 36（70.59） −2.859 0.004*
    　Ⅱ/Ⅲ级 48（54.55） 15（29.41）
    　Ⅳ级 0（0.00） 0（0.00）
    菌群多样性
    　未见/Ⅰ级 74（84.09） 45（88.24） −0.816 0.537
    　Ⅱ/Ⅲ级 14（15.91） 5（9.80）
    　Ⅳ级 0（0.00） 1（1.96）
    优势菌
    　革兰阳性大杆菌 62（70.45） 23（45.10） 10.543 0.014*
    　革兰阳性球菌 4（4.55） 8（15.69）
    　革兰阴性短杆菌 1（1.14） 2（3.92）
    　无 21（23.86） 18（35.29）
    pH
    　3.8～4.5 51（57.95） 10（19.61） 19.28 < 0.001*
    　> 4.6 37（42.05） 41（80.39）
    Nugent评分（分）
    　0～3 54（61.36） 17（33.33） −2.948 0.003*
    　4～6 30（34.09） 32（62.75）
    　> 7 4（0.05） 2（3.92）
    　　与健康组比较，*P < 0.05。
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    • 参考文献(24)
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-06-11
  • 网络出版日期:  2021-08-03
  • 刊出日期:  2021-08-04

目录

摘要
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  • 1.   资料与方法

  • 1.1   资料来源

  • 1.2   阴道微生态评估

  • 1.3   统计学处理

  • 2.   结果

  • 2.1   宫颈上皮内瘤变组与健康组阴道微生态比较

  • 2.2   宫颈癌组与健康组阴道微生态比较

  • 3.   讨论

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