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小凹蛋白-1(CAV1)在肿瘤组织中的表达及其对生存预后的影响

刘一笑 受梦媛 张莹 张荣强 孙娜

陈兴龙, 张敏, 杨琪瑶, 罗永谋, 曹婷婷, 唐丽萍, 李勇. 茯苓95%乙醇提取物三萜类化学成分的UPLC-IT-TOF/MS分析[J]. 昆明医科大学学报, 2021, 42(11): 1-8. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20211101
引用本文: 刘一笑, 受梦媛, 张莹, 张荣强, 孙娜. 小凹蛋白-1(CAV1)在肿瘤组织中的表达及其对生存预后的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2023, 44(11): 47-55. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231107
Xing-long CHEN, Min ZHANG, Qi-yao YANG, Yong-mou LUO, Ting-ting CAO, Li-ping TANG, Yong LI. Analysis of Triterpene Chemical Constituents in Poria cocos 95% Ethanol Extract via UPLC-IT-TOF/MS[J]. Journal of Kunming Medical University, 2021, 42(11): 1-8. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20211101
Citation: Yixiao LIU, Mengyuan SHOU, Ying ZHANG, Rongqiang ZHANG, Na SUN. Expression of CAV1 in Tumor Tissues and Its Effect on Survival Prognosis of Patients[J]. Journal of Kunming Medical University, 2023, 44(11): 47-55. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231107

小凹蛋白-1(CAV1)在肿瘤组织中的表达及其对生存预后的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231107
基金项目: 咸阳市科学技术社会发展项目(2021ZDYF-SF-0017);陕西中医药大学研究生创新项目(303-1730103226);公共卫生与预防医学校级特色学科(2022XKZC04)
详细信息
    作者简介:

    刘一笑(1999~),男,陕西咸阳人,在读硕士研究生,主要从事慢病防治研究工作

    通讯作者:

    张荣强,E-mail:zhangrqxianyang@163.com

    孙娜,E-mail:283529713@qq.com

  • 中图分类号: R730.7

Expression of CAV1 in Tumor Tissues and Its Effect on Survival Prognosis of Patients

  • 摘要:   目的  通过生物信息学分析小凹蛋白-1(CAV1)在多种肿瘤中的表达与预后意义及其免疫浸润的相关性,阐明其对肿瘤预后的评估价值。   方法  基于TCGA和GTEx数据库分析CAV1基因在不同肿瘤组织中的mRNA表达水平,通过CPTAC数据库分析CAV1基因在不同肿瘤组织中的蛋白表达水平,单因素COX回归分析CAV1表达与肿瘤患者生存预后之间的相关性,HPA数据库分析CAV1表达的肿瘤免疫组化水平,Spearman相关性分析肿瘤与免疫浸润细胞的相关性。采用多因素COX回归和Nomogram列线图建立BLCA、LGG和HNSC预测评分模型。   结果   CAV1基因在26种肿瘤组织中mRNA异常表达(P < 0.05),CAV1的高表达对膀胱尿路上皮癌(BLCA)、脑低级别胶质癌(LGG)和头颈鳞状细胞癌(HNSC)3种肿瘤患者总生存期产生不良影响,并且在BLCA、LGG和HNSC中与多种肿瘤免疫浸润细胞密切相关。单因素COX回归分析显示CAV1(HR = 1.489,P = 0.0078)和年龄(HR = 1.424,P = 0.0022)是BLCA患者总生存期的危险因素,CAV1(HR = 2.432,P = 0.0006)与WHO grade(HR = 3.023,P = 0.0004)是LGG患者总生存期的危险因素,CAV1(HR = 1.432,P = 0.0085)与临床病理分型(HR = 1.806,P = 0.0006)是HNSC患者总生存期的危险因素。   结论   CAV1基因的表达及调节与BLCA、LGG和HNSC的发生发展、患者的预后、肿瘤免疫有一定的相关性,可能成为改善BLCA、LGG与HNSC患者预后的潜在标志。
  • 茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf的干燥菌核,寄生于松科植物的根茎上,埋于土壤下繁衍而成。茯苓又名松苓、茯菟、茯灵,其野生资源稀少,栽培品种主要产于安徽、湖北、湖南、云南、贵州等地。茯苓味甘、淡,性平,归心、肺、脾、肾经;具有利水渗湿,健脾,宁心功效;用于水肿尿少,痰饮眩悸,脾虚食少,便溏泄泻,心神不安,惊悸失眠。茯苓始载于《神农本草经》,应用广泛,不仅是多种方剂和中成药的原料,有“十药九茯苓”之说,也添加在各种食品中,是沿用千年的药食两用的中药材[1]。羊毛甾烷四环三萜类化合物是茯苓主要成分之一,其结构类型主要分为四种,分别为羊毛甾-8-烯型三萜、羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜、3,4-开环-羊毛甾-8-烯型三萜、3,4-开环-羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜[2]。现代药理学研究结果显示,茯苓三萜类化合物是茯苓传统药效和拓展功效的物质基础[3-9]。本文采用超高效液相色谱串联离子阱飞行时间质谱(UPLC-IT-TOF/MS) 技术定性分析云南大理产茯苓95%乙醇提取物的三萜类化学成分,并对其裂解规律进行总结,为该产地茯苓的药效物质基础解析和质量控制提供参考依据。

    LC-MS分析所用仪器为岛津公司(Shimaduz,Kyoto,Japan)生产的LCMS-IT-TOF仪。液相色谱仪控制器型号为CBM-20A,泵型号为LC-30AD,自动进样器型号为SIL-30AC,脱气装置型号为DGU-20A5,二极管阵列检测器为SPD-M20A,柱温箱型号为CTO-20AC。

    茯苓购自昆明市螺蛳湾中药材市场(产自云南大理),经昆明医科大学唐丽萍教授鉴定为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf的干燥菌核;色谱纯乙腈购自德国默克公司,色谱纯甲酸购自上海阿拉丁试剂公司,超纯水由默克MingCheTM-D24UV设备制备。

    干燥药材茯苓10 g,粉碎,用95%乙醇250 mL浸泡1 h,加热至微沸,加热1 h,过滤浓缩得浸膏1.8 g。取5 mg 浸膏,加入2 mL甲醇超声溶解,离心(10000 r/min×10 min)取上清液进样。

    色谱柱为UHPLC XB-C18色谱柱 (2.1×100 mm,1.8 µm),柱温30℃,紫外检测波长范围为190~400 nm。流动相A:甲酸/水(0.05/100,v/v),B:乙腈;流速为0.20 mL/min;梯度洗脱条件:起始梯度为5% B,0~50 min,5%~90 % B;50~55 min,90% B;55~56 min,90%~5% B;56~60 min,5% B。进样量为:2 µL。

    质谱条件:离子源为ESI源,三氟乙酸钠校正,电喷雾正负离子同时检测。分析条件如下:喷雾电压为4.50 kV或− 3.50 kV;检测电压为1.65 kV;旋转式真空泵压力为71.0 Pa;干燥气压力为110.0 kPa;喷雾气为氮气,流速为1.5 L/min;曲形裂解器(CDL)温度为200 ℃;加热模块温度为200 ℃;离子捕获时间为10 ms;母离子选择范围为m/z ±3.0 Da;裂解能量(CID)为50%;裂解气为氩气,扫描范围为m/z 100~1000。

    Shimadzu Composition Formula Predictor软件用于预测分子式,并通过多级质谱数据分析,结合氮规则和Scifinder数据库检索推断化合物的基本结构信息。

    茯苓的95%乙醇提取物在实验色谱、质谱条件下响应良好,经过分析发现其主要化合物为羊毛甾烷型四环三萜,保留时间集中在15~50 min之间,最大离子流图(BPC)如图1所示。共分析出24个羊毛甾烷型四环三萜类成分,鉴定了22个,化学结构如图2所示。

    图  1  茯苓在LC-MS分析条件下的最大离子流图
    Figure  1.  Base peak chromatogram (BPC) of Poria cocos in both positive (1BPC) and negative ion mode (3BPC)
    图  2  茯苓羊毛甾烷型三萜的化学结构
    Figure  2.  The lanostane triterpenoids chemical structures of Poria cocos

    色谱峰的鉴定结果如表1所示,主要展示色谱峰保留时间、分子量、分子式、二级质谱碎片以及化合物名称等。根据化合物的结构不同,将识别到的色谱峰分为三类,包括羊毛甾-8-烯型三萜、羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜和其他羊毛甾三萜类型,通过不同类型化合物的结构特征来说明其鉴别过程。

    表  1  茯苓中色谱峰的LC/ESI–MSn鉴定结果(1)
    Table  1.  Characterization of the peaks in LC/ESI–MSn chromatogram of Poria cocos (1)
    色谱峰保留时间分子式分子量ESI+ (误差,mDa)ESI (误差,mDa)化合物名称
    1 17.51 C30H48O5 488 [M+Na]+ 511.3328 (−6.6)
    MSn: 511-493.3316 (C30H46O4, +2.8),
    453.3319 (C30H44O3, −4.4)
    [M−H]487.3402 (−2.7) Daedaleanic acid B[10]
    2 19.15 C30H46O6 502 [M+Na]+ 525.3301 (+11.4) [M−H]501.3164 (−5.8) Pinicolic acid F [9]
    3 19.90 C31H48O5 500 MSn: 483.3468 (C31H46O4, −0.1), 465.3319 (C31H44O3, −4.4) [M−H]499.3427 (−0.2) 29α-羟基去氢土莫酸
    29α-Hydroxydehy-dropachymic acid[14]
    4 19.90 C30H48O6 504 [M+Na]+ 527.3331 (−1.2)
    MSn: 527- 495.3077 (C29H44O5, +6.3), 437.2886 (C27H42O3, −14.0)
    [M−H]503.3373 (−0.5) -
    5 21.69 C31H48O6 516 [M+Na]+539.3047 (+6.8)
    MSn: 539- 521.2809 (C31H46O5, −6.5), 507.2633 (C30H44O5, −4.6)
    [M−H]515.3056 (+4.2) 5,​8α-​Dioxy-​3β,​16α-​dihydroxylanosta-​7,
    ​24-​ dien-​21-​oic acid [18]
    6 21.97 C31H46O6 514 [M+H]+515.3331 (−3.6)
    MSn: 515- 497.3360 (C31H44O5, +9.8), 443.2839
    (C31H38O2, −10.6), 433.3267 (C30H40O2, +16.6), 425.2996
    (C28H40O3, −5.4), 415.2933 (C30H38O, −6.2), 385.2397
    (C24H32O4, +2.4), 377.2199 (C25H28O3, +8.8), 335.2455
    (C24H30O, +8.6), 253.1655 (C18H20O, +6.8), 247.1670
    (C16H22O2, −2.3), 229.1583 (C16H20O, −0.4), 201.1704 (C15H20, +6.6)
    [M−H]513.3151 (−7.1)
    MSn: 513- 483.3167 (C31H46O4, −5.6)
    5α,​8α-​过氧化去氢土莫酸
    5α,​8α-​Peroxydehydrotumulos​ic acid[19]
    7 22.54 C31H46O5 498 [M+H]+ 499.3287 (−13.1)
    MSn: 481.3308 ( (C31H44O4, −0.4), 463.3147 (C31H42O3, −6.0)
    [M−H]497.3193 (−7.9)
    MSn: 497- 403.2418 (C24H26O5, −7.2), 389.2435 (C27H34O2, −5.1),
    371.2336(C27H32O, −4.4), 355.2131 (C26H28O, +6.4)
    6α-羟基猪苓酸C
    6α-​Hydroxypolyporenic acid C[11]
    8 23.69 C33H48O8 572 [M+H]+573.3312 (−11.1) [M−H]571.3213 (−6.3) 3-(2-羟基乙酰氧基)- 5α,​8α-​过氧化去氢土莫酸
    3-(2-hydroxyacetoxy)- 5α,​
    8α-​peroxydehydrotumulosic acid [20]
    9 25.78 C31H46O5 498 [M+H]+ 499.3433 (+1.5)
    MSn: 481.3408 ( (C31H44O4, +9.6)- 451.3147 (C30H42O3, −1.4),
    435.2955 (C29H38O3, +6.2), 325.2132 (C22H28O2, −3.0),
    299.2112 (C20H26O2, +10.6)
    [M−H]497.3236 (−3.6) -
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    表  1  茯苓中色谱峰的LC/ESI–MSn鉴定结果(2)
    Table  1.  Characterization of the peaks in LC/ESI–MSn chromatogram of Poria cocos (2)
    色谱峰保留时间分子式分子量ESI+ (误差,mDa)ESI- (误差,mDa)化合物名称
    10 28.42 C32H50O6 530 [M+Na]+553.3443 (−5.7)
    MSn: 553- 535.3422 (C32H48O5, +2.8), 495.3437
    (C30H48O4, −0.8), 477.3274 (C30H46O3, −6.5), 435.3364
    (C28H44O2,+13.0), 353.2548 (C22H34O2, +9.7)
    [M−H]529.3461 (−7.4) 3-乙酰氧基-16α,26-二羟基-羊毛甾-8,24-二烯-21-酸
    3-​ Acetoxy-​16α,​26-​dihydroxy-lanosta-8,24-dien-21-oic acid[10]
    11 29.01 C33H50O6 542 MSn: 525.3513 (C33H48O5, −6.2)- 507.3459
    (C33H46O4, −1.0), 465.3365 (C31H44O3, +0.2),
    447.3544 (C32H46O, −7.7)
    [M−H]541.3460 (−7.5)
    6α-羟基去氢茯苓酸
    6α-​Hydroxy-dehydropachym​ic acid[13]
    12
    31.15 C31H48O4 484 [M+Na]+485.3592 (−3.3)
    MSn: 485- 467.3492 (C31H46O3, −2.9), 449.3408 (C31H44O2, −0.6),
    311.2388 (C22H30O, +1.9), 293.2259 (C22H28, −0.5)
    [M−H]483.3413 (−6.7)
    MSn: 483- 437.3393 (C30H46O2, −3.2), 421.2978 (C29H42O2, −13.4)
    3β,15α-二羟基-羊毛甾-7,9(11),24-三烯-21-酸
    3β,15α-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-21-oic acid[15]
    13

    30.27 C31H50O4 486 [M+H]+ 487.3722 (−6.0)
    MSn: 487- 469.3719 (C31H48O3, +4.3),
    451.3553 (C31H46O2, −1.8), 343.2701
    (C23H34O2, +6.9), 313.2464 (C22H32O, −6.2),
    295.2405 (C22H30, −1.5)
    [M−H]485.3570 (−6.6)
    MSn: 483- 423.3371 (C29H44O2,+10.2)
    土莫酸
    Tumulosic acid[10-11]
    14 31.74 C31H46O5 498 [M+H]+ 499.3368 (−5.0)
    MSn: 499- 481.3292 (C31H44O4, −2.0), 463.3291 (C31H42O3, +8.4),
    421.3024 (C29H40O2, −7.7), 325.2198 (C22H28O2, +3.8), 307.2102 (C22H26O, +4.6)
    [M−H]497.3199 (−7.3)
    MSn: 497- 425.2942 (C31H38O, +9.2)
    29-羟基猪苓酸 C
    29-​Hydroxypolyporenic acid C[16]
    15 33.26 C33H52O6 544 [M+H]+ 545.3733 (−10.4)
    MSn: 545- 527.3696 (C33H50O5, −3.5), 451.3097 (C31H46O2, +2.6), 433.3267 (C31H44O, −19.8), 295.2433 (C22H30,+2.3)
    [M−H]543.3623 (−6.8)
    MSn: 543- 467.3227 (C31H48O3, +9.6)
    25-羟基茯苓酸
    25-​Hydroxypachimic acid[11]
    16 33.57 C31H46O4 482 [M+H]+ 483.3420 (−4.9)
    MSn: 483- 465.3327 (C31H44O3, −3.6), 447.3246 (C31H42O2, −1.2), 309.2214 (C22H28O, +0.1)
    [M−H]481.3266 (−5.7)
    MSn: 481- 311.1817 (C21H28O2, −14.0)
    猪苓酸 C
    Polyporenic acid C[11]
    17 34.28 C31H48O4 484 [M+H]+ 485.33637 (+1.2)
    MSn: 483- 467.3486 (C31H46O3, −3.4), 449.3532 (C31H44O2, +11.8), 311.2343 (C22H30O, −2.6), 293.2330 (C22H28,+6.6)
    [M−H]483.3378 (−10.2)
    MSn:
    ​3-表去氢土莫酸
    3-​epi-​Dehydrotumulosic acid acid[11]
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    表  1  茯苓中色谱峰的LC/ESI–MSn鉴定结果(3)
    Table  1.  Characterization of the peaks in LC/ESI–MSn chromatogram of Poria cocos (3)
    色谱峰保留时间分子式分子量ESI+ (误差,mDa)ESI (误差,mDa)化合物名称
    18 34.89 C31H48O4 484 [M+H]+ 485.3589 (−3.6)
    MSn: 483- 467.3526 (C31H46O3, +0.6), 449.3377 (C31H44O2, −3.7), 311.2408 (C22H30O, +3.9), 293.2265 (C22H28, 0.1)
    [M−H]483.3406 (−7.4)
    MSn: 481- 337.2465 (C24H34O, −7.2)
    去氢土莫酸
    Dehydrotumulosic acid[17]
    19 38.63 C33H50O5 526 [M+H]+ 527.3671(−6.0)
    MSn: 527- 509.3564 (C33H48O4, −6.1), 449.3398 (C31H44O2, −1.6), 293.2240 (C22H28, −2.4)
    [M−H]525.3493 (−9.2)
    MSn:
    3-表去氢茯苓酸
    3-​epi-​Dehydropachymic acid[14]
    20 39.64 C32H50O5 514 [M+H]+ 515.3708(−2.3)
    MSn: 515- 497.3555 (C32H46O4, −7.0), 437.3398 (C30H44O2, −1.6), 295.2422 (C22H30,+0.2)
    [M−H]513.3532 (−5.3)
    3-O-乙酰基-16α-羟基松苓酸
    3-​O-​Acetyl-​16α-​hydroxytrametenolic acid[12]
    21 40.64 C33H50O5 526 [M+H]+ 527.3697 (−3.4)
    MSn: 527- 509.3594 (C33H48O4, −3.1), 449.3446 (C31H44O2, +3.2), 353.2501 (C24H32O2, +2.6),
    293.2254 (C22H28, −1.0)
    [M−H]525.3511 (−7.4)
    MSn: 525- 479.3471 (C32H48O3, −6.0), 465.3351 (C31H46O3, −2.3), 355.2295 (C23H32O3, +1.6),
    去氢茯苓酸dehydropachymic acid[11]
    22 41.87 C33H52O5 528 [M+H]+ 529.3820 (−6.8)
    MSn: 529- 511.3735 (C33H50O4, −4.7), 451.3599 (C31H46O2, −3.0), 295.2419 (C22H30, −0.1)
    [M−H]527.3666 (−7.6)
    MSn: 527- 465.3330 (C31H46O3, −4.4)
    茯苓酸
    Pachymic acid[10-11]
    23 45.90 C30H46O3 454 [M+H]+ 455.3532 (+1.2)
    MSn: 455- 437.3457 (C30H44O2, +4.3), 311.2370 (C22H30O, +0.1), 295.2381 (C22H30, −3.9)
    [M−H]453.3342 (−3.2) 3-羟基-羊毛甾-7,9(11),24-三烯-21酸
    Dehydrotrametenolic acid[12]
    24 47.30 C30H48O3 456 [M+H]+ 457.3663 (−1.3)
    MSn: 457- 439.3502 (C30H46O2, −6.9), 313.2445 (C22H32O, −8.1), 295.2463 (C22H30, +4.3)
    [M−H]455.3471 (−6.0) 3-氢化松苓酸
    trametenolic acid[13]
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    A型羊毛甾-8-烯型三萜(1,10,13,15,20,22,24)主要结构特征核心结构四元环中的C-8和C-9位之间为双键,C-3位均有羟基或乙酰氧基取代;除了化合物24,C-16位均有α位羟基取代;化合物1中C-17侧链的C-24是羰基取代,其他化合物C-24位均为双键。对于A型化合物而言,较容易失去C-17位支链,且同时失去一个H2O,形成含[M+H-C9H16O2-H2O]+的碎片离子。以色谱峰13为例,在正负离子模式下容易检测到其[M+H]+和 [M-H]-离子,分别为m/z 487.3722和485.3570,预测其分子式为C31H50O4,以m/z 487.3722为母离子进行轰击,检测到5个碎片,分别为m/z 469.3719 (C31H48O3,+4.3),451.3553 (C31H46O2,−1.8),343.2701 (C23H34O2,+6.9),313.2464 (C22H32O,−6.2),295.2405 (C22H30,−1.5),推测其分别对应于[M+H-H2O]+,[M+H-2H2O]+,[M+H-CO2-2H2O-4CH4]+,[M+H-C9H16O2-H2O]+,[M+H-C9H16O2-2H2O]+;通过查阅文献比对,茯苓中化合物土莫酸(Tumulosic acid)满足该裂解条件,因此将色谱峰13鉴定为土莫酸(Tumulosic acid)。色谱峰22的[M+H]+和[M-H]-离子分别为m/z 529.3820和527.3666,预测其分子式为C33H52O5,检测到丢失H2O离子碎片m/z 511.3735 (C33H50O4,−4.7),进一步裂解还形成了451.3599 (C31H46O2,−3.0),295.2419 (C22H30,−0.1)等碎片离子,分别对应[M+H-CH3COOH-H2O]+,[M+H-CH3COOH-H2O-C9H16O2]+,与茯苓酸(Pachymic acid)的裂解方式相符,因此将色谱峰22鉴定为茯苓酸(Pachymic acid)。图3展示了主要色谱峰的质谱图。

    B型羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜(2,3,7,11~12,14,16~19,21,23)主要结构特征为核心结构四元环中的C-7、C-8位和C-9、C-11位之间形成异环双键,C-3位均有羟基、乙酰氧基或氧代取代,与A型相似,较容易失去C-17位支链,且同时失去一分子H2O,形成含[M+H-C9H16O2-H2O]+的碎片离子。色谱峰14检测到其[M+H]+峰为m/z 499.3368,因此预测其分子式为C31H46O5m/z 481.3292 (C31H44O4,−2.0),463.3291 (C31H42O3,+8.4)是连续失去二个H2O产生的碎片,m/z 421.3024 (C29H40O2,−7.7)对应的是[M+H-H2O-CO2-CH4]+碎片离子,m/z 325.2198 (C22H28O2,+3.8)为失去C-17侧链和一个H2O生成的[M+H-C9H16O2-H2O]+的碎片离子,m/z 307.2102 (C22H26O,+4.6)为失去C-17侧链和二个H2O生成的[M+H-C9H16O2-2H2O]+的碎片离子,这些裂解行为与29-羟基猪苓酸 C (29-Hydroxypolyporenic acid C)相符,因此色谱峰14被鉴定为29-羟基猪苓酸 C (29-Hydroxypolyporenic acid C)。图3展示了主要色谱峰的质谱图。

    C型其他羊毛甾三萜类型(5,6,8)的主要结构特征为C-5位和C-8位通过过氧键链接,因此该类型化合物的主要质谱裂解特征行为是C-5位和C-8位过氧基的丢失,色谱峰5和6分别检测到失去过氧基的碎片离子m/z 507.2633 (C30H44O5,−4.6)和385.2397 (C24H32O4,+2.4)、229.1583 (C16H20O,−0.4);以及侧链羧基先裂解,再进一步裂解C-17侧链,形成丰富的离子碎片,并结合数据库搜索,可将其结构初步鉴定。

    图  3  茯苓中主要色谱峰的质谱图
    Figure  3.  The mass spectrum of main chromatogram peaks in Poria cocos

    我国茯苓人工栽培历史悠久,且有广泛的茯苓资源,但是茯苓的不同品种和不同地域是导致其有效成分差异的主要原因。UPLC-IT-TOF/MS结合了液相的快速分离能力和飞行时间质谱的准确结构鉴定功能的优点,具有高效分离能力、高分辨和高灵敏度的特性,故本文利用UPLC-IT-TOF/MS技术分析鉴定云南大理的茯苓95%乙醇提取物的化学成分,发现其主要化合物为羊毛甾烷四环三萜,结构类型包括A型羊毛甾-8-烯型三萜(1,10,13,15,20,22,24)[9-13]、B型羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜(2,3,7,11~12,14,16~19,21,23)[11-17]和C型其他羊毛甾三萜类型。该类化合物在ESI源正离子模式响应较好,较易检测到[M+H]+和[M+Na]+离子,其二级质谱碎片较为丰富。通过以[M+H]+或[M+Na]+离子作为母离子进行轰击,其主要裂解途径为失去核心结构四元环的羟基或者乙酰基,形成碎片同时C-17位侧链也容易失去,C-17位侧链含有羧基的化合物较容易脱羧再裂解C-17位侧链,形成含有22个碳原子的离子碎片,并通过将化合物的结构进行简单分离,总结其质谱裂解规律。

    三萜类化合物是茯苓的主要化学成分之一,其已被报道具有免疫调节、抗炎及抗肿瘤等多种生物功效。研究结果显示,产自云南大理的茯苓95%乙醇提取物的主要成分是羊毛甾烷四环三萜类化合物,化合物结构特征是其他羊毛甾三萜类型(5,6,8)的C-5位和C-8位均通过过氧键链接,为进一步研究该种茯苓的化学成分和生物活性提供了科学依据。

  • 图  1  CAV1基因在人类肿瘤组织和正常组织中的mRNA表达分析

    *P < 0.05;**P < 0.01;***P < 0.001。

    Figure  1.  mRNA expression analysis of CAV1 gene in human tumor tissues and normal tissues

    图  2  CAV1基因在不同癌症组织和正常组织中的总蛋白表达分析

    Figure  2.  Total protein expression analysis of CAV1 gene in different cancer tissues and normal tissues

    图  3  CAV1基因在BLCA、LGG与HNSC肿瘤组织中的预后KM曲线图

    A:CAV1与BLCA患者生存预后相关性;B:CAV1与LGG患者生存预后相关性;C:CAV1与HNSC患者生存预后相关性。

    Figure  3.  Prognostic KM curve of CAV1 gene in BLCA,LGG and HNSC tumors

    图  4  BLCA、LGG和HNSC肿瘤组织和正常组织的免疫组化图 (×100)

    A:膀胱组织与膀胱肿瘤组织CAV1表达;B:脑组织与脑低级别胶质肿瘤组织CAV1表达;C:头颈部与头颈鳞状细胞肿瘤组织CAV1表达。

    Figure  4.  Immunohistochemical maps of BLCA,LGG and HNSC tumor tissue and normal tissue (×100)

    图  5  CAV1基因在3种不同肿瘤组织中与免疫浸润细胞相关性棒棒糖图

    A:CAV1在LGG中与免疫浸润细胞相关性;B:CAV1在HNSC中与免疫浸润细胞相关性;C:CAV1在BLCA中与免疫浸润细胞相关性。*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  5.  Lollipop map of CAV1 gene correlation with immunoinfiltrating cells in three different tumor tissues

    图  6  CAV1表达对BLCA总生存期的影响因素COX回归分析及其Nomogram模型的构建与评估

    A:单、多因素COX回归分析;B:Nomogram模型;C:校准曲线。

    Figure  6.  COX regression analysis of influencing factors of CAV1 expression on overall survival of BLCA and Nomogram model construction and evaluation

    图  7  CAV1表达对LGG总生存期的影响因素COX回归分析及其Nomogram模型的构建与评估

    A:单、多因素COX回归分析;B:Nomogram模型;C:校准曲线。

    Figure  7.  7Cox regression analysis of factors influencing CAV1 expression on overall survival of LGG and Nomogram model construction and evaluation

    图  8  CAV1表达对HNSC总生存期的影响因素COX回归分析及其Nomogram模型的构建与评估

    A:单、多因素COX回归分析;B:Nomogram模型;C:校准曲线。

    Figure  8.  COX regression analysis of factors influencing CAV1 expression on HNSC overall survival and Nomogram model construction and evaluation

  • [1] Roy P S,Saikia B J. Cancer and cure: A critical analysis[J]. Indian J Cancer,2016,53(3):441-442. doi: 10.4103/0019-509X.200658
    [2] Yahya E B,Alqadhi A M. Recent trends in cancer therapy: A review on the current state of gene delivery[J]. Life Sci,2021,15(269):119087.
    [3] 曹毛毛,陈万青. GLOBOCAN 2020全球癌症统计数据解读[J]. 中国医学前沿杂志,2021,13(3):63-69.
    [4] 马丽萍,丁春燕,田梅,等. 信号转导和转录激活因子3及小凹蛋白1在X射线诱导肺腺癌A549细胞早衰中的调控关系研究[J]. 中国医学装备,2021,18(3):1-5.
    [5] 黄青云. LncRNA HOTAIR通过MiR-203/Caveolin-1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响[D]. 南昌: 南昌大学, 2021.
    [6] 李倩. Caveolin1通过OCTN2(SLC22A5)逆转结直肠癌耐药性[D]. 厦门: 厦门大学, 2021.
    [7] 高冬梅,张小芳,安杰,等. Cav-1对EGFR敏感基因突变非小细胞肺癌患者厄洛替尼治疗耐药的机制研究[J]. 解放军医药杂志,2022,34(3):1-5.
    [8] 邓心怡,高子煦,王璐,等. 环指蛋白157通过下调小凹蛋白-1表达参与ERK通路激活促进黑素瘤细胞增殖[J]. 中国临床医学,2023,30(2):257-264.
    [9] 崔玉洁,杜梦颖,李硕,等. Caveolin-1调控VEGFR-2对肺癌细胞增殖及侵袭的影响[J]. 现代中西医结合杂志,2022,31(20):2798-2802.
    [10] 韩蕴,李洪艳,张叶军,等. Caveolin-1和ER-α36相互作用促进胶质瘤细胞生长[J]. 癌症,2022,41(3):142-151.
    [11] Wang Y,Song Y,Che X,et al. Caveolin-1 enhances RANKL-induced gastric cancer cell migration[J]. Oncol Rep,2018,40(3):1287-1296.
    [12] 邵伟伟,王树人,刘水,等. 小窝蛋白1和表皮生长因子受体在肺腺癌的表达及临床意义[J]. 江苏医药,2023,49(2):158-163.
    [13] 谭超,邹黎黎. 小凹蛋白1与肿瘤的研究进展[J]. 中华肿瘤防治杂志,2015,22(6):483-488.
    [14] Sung H,Ferlay J,Siegel R L,et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide for 36 Cancers in 185 Countries[J]. CA Cancer J Clin,2021,71(3):209-249. doi: 10.3322/caac.21660
    [15] Vivian J,Rao A A,Nothaft F A,et al. Toil enables reproducible,open source,big biomedical data analyses[J]. Nature Biotechnology,2017,35(4):314-316. doi: 10.1038/nbt.3772
    [16] Chen F,Chandrashekar D S,Varambally S,et al. Pan-cancer molecular subtypes revealed by mass-spectrometry-based proteomic characterization of more than 500 human cancers[J]. Nat Commun,2019,10(1):5679. doi: 10.1038/s41467-019-13528-0
    [17] Bindea G,Mlecnik B,Tosolini M,et al. Spatiotemporal dynamics of intratumoral immune cells reveal the immune landscape in human cancer[J]. Immunity,2013,39(4):782-795. doi: 10.1016/j.immuni.2013.10.003
    [18] 王红磊,李昕宇,蒙椿海,等. Caveolin-1在肿瘤中的作用机制研究概况[J]. 广西中医药大学学报,2021,24(1):54-57.
    [19] 贾帅楠,李劲涛,赵丽娇,等. 环境致癌物与病毒协同致癌作用的研究进展[J]. 病毒学报,2018,34(4):601-609.
    [20] 余水红,李帆,金耀,等. 基于数据库探索GPX4基因在泛癌中的潜在价值[J]. 济宁医学院学报,2022,45(4):278-282.
    [21] 周威. TAF1L基因异常表达对口腔鳞状细胞癌病变作用的研究[D]. 深圳: 深圳大学, 2019.
    [22] 吴秀珍. 高通量基因测序在胃肠道恶性肿瘤中的临床意义[D]. 苏州: 苏州大学, 2017.
    [23] 彭贻龙,郑彩云. 骨肉瘤中FoxM1、Sox9基因异常表达与肿瘤病理特征的相关性研究[J]. 海南医学院学报,2018,24(7):797-799.
    [24] 谭金晶. DLK1基因异常表达及其促进肺癌细胞侵袭的分子机制[D]. 北京: 北京协和医学院, 2014.
    [25] Quest A F,Lobos-González L,Nuñez S,et al. The caveolin-1 connection to cell death and survival[J]. Curr Mol Med,2013,13(2):266-281. doi: 10.2174/156652413804810745
    [26] Lin X,Chai G,Wu Y,et al. A methylation regulates the epithelial mesenchymal transition of cancer cells and translation of Snail[J]. Nat Commun,2019,10(1):2065. doi: 10.1038/s41467-019-09865-9
    [27] 陈胜武,赵恒伍,高轶轩. Toll样受体2在泛癌中的表达、对预后的影响及其作用机制[J]. 中国医科大学学报,2022,51(9):810-816.
  • [1] 李杨, 刘容, 刘朝敏, 徐龙玉, 张文静.  基于生物信息学识别与肺癌患者预后和免疫微环境相关的铜死亡基因, 昆明医科大学学报.
    [2] 李梦, 牛奔, 胡瑾, 马燕琳.  免疫检查点抑制剂引起肿瘤患者甲状腺功能障碍的临床分析, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240111
    [3] 王兴粉, 邓玥, 杨丽华.  卵巢癌脂质代谢相关基因预后模型的构建及免疫浸润分析, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240403
    [4] 杜国庆, 刘志琴, 李姚, 史永华.  ANGPT1和TEK影响人类肿瘤进展的泛癌分析, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240608
    [5] 唐杰夫, 杨德兴, 刘圣哲, 王强, 付凯, 王振方, 栾英, 李敏, 刘荣.  奥密克戎变异株老年重症感染者细胞免疫指标对预后的价值研究, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20231214
    [6] 王强, 杨德兴, 周维钰, 唐杰夫, 付凯, 王振方, 刘圣哲, 李敏, 栾英, 刘荣.  基于循环和细胞免疫效应指标为基础的脓毒性休克患者预后风险因素分析, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230716
    [7] 杨中婷, 杜兴梅, 叶卿云, 李本燕, 秦明芳, 焦锋, 陈莹, 邓睿, 黄源.  健康社会决定因素对恶性肿瘤死亡人群总生存时间的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220727
    [8] 余婷婷, 李冬玲, 王红英, 李丽华, 普冬, 武昆利.  昆明地区艾滋初治病例感染、免疫及耐药情况调查, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220133
    [9] 杨帆, 张弦, 张勇, 王瑶瑶.  原发性消化道肿瘤对患者免疫细胞影响的临床观察, 昆明医科大学学报.
    [10] 梁睿, 淳于纬训, 沈焘, 孙乐, 李云峰.  肠道菌群和免疫在结直肠肿瘤中作用研究进展, 昆明医科大学学报.
    [11] 范旭, 冯煜然, 朱梅.  微波消融联合免疫疗法治疗肿瘤的研究进展, 昆明医科大学学报.
    [12] 李重熙, 刘俊, 白劲松, 田波, 于闵, 古善群.  直接抗病毒药物治疗人类免疫缺陷病毒感染合并丙型肝炎的疗效, 昆明医科大学学报.
    [13] 徐静逍, 程馨缘, 郭施余, 顾力华, 魏丹霞, 杨仁华.  清热润燥口服液对BALB/c小鼠免疫功能的影响, 昆明医科大学学报.
    [14] 任朝凤.  调节性T细胞培养及输入慢性阻塞性肺病大鼠后免疫细胞变化, 昆明医科大学学报.
    [15] 何维曜臻.  妊娠合并人类免疫缺陷病毒感染与正常妊娠胎儿超声生长参数比较, 昆明医科大学学报.
    [16] 叶燎昆.  女子散打运动员大负荷训练阶段部分生化指标变化特点研究, 昆明医科大学学报.
    [17] 艾毅钦.  87例直肠腺癌患者肿瘤分期和细胞免疫状态分析, 昆明医科大学学报.
    [18] T细胞斑点试验在人类免疫缺陷病毒合并肺结核感染中不同T细胞水平临床诊断价值, 昆明医科大学学报.
    [19] 肠内营养加三七多糖对创伤大鼠白介素-2水平的影响, 昆明医科大学学报.
    [20] 两种血液稀释方法对直肠癌患者围术期T淋巴细胞亚群的影响, 昆明医科大学学报.
  • 期刊类型引用(1)

    1. 蒋俊娥,王振常,罗艺徽. 壮方消积化肝方通过调控铁死亡治疗肝癌的作用机制. 广西医学. 2024(09): 1373-1382 . 百度学术

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出版历程
  • 收稿日期:  2022-01-01
  • 网络出版日期:  2023-11-03
  • 刊出日期:  2023-11-30

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