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丙泊酚调节MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激和凋亡

谭莹 秦海燕 孙翔 苏彦伊 王英宝

谭莹, 秦海燕, 孙翔, 苏彦伊, 王英宝. 丙泊酚调节MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激和凋亡[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(3): 35-41. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240305
引用本文: 谭莹, 秦海燕, 孙翔, 苏彦伊, 王英宝. 丙泊酚调节MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激和凋亡[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(3): 35-41. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240305
Ying TAN, Haiyan QIN, Xiang SUN, Yanyi SU, Yingbao WANG. Propofol Regulates MPP+-induced Mitochondrial Oxidative Stress and Apoptosis in SH-SY5Y Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(3): 35-41. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240305
Citation: Ying TAN, Haiyan QIN, Xiang SUN, Yanyi SU, Yingbao WANG. Propofol Regulates MPP+-induced Mitochondrial Oxidative Stress and Apoptosis in SH-SY5Y Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(3): 35-41. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240305

丙泊酚调节MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激和凋亡

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240305
基金项目: 昆明市卫生科技人才培养基金资助项目[2023-sw(后备)-18]
详细信息
    作者简介:

    谭莹(1986~) ,女,云南瑞丽人,医学硕士,主治医师,主要从事麻醉与心脑保护研究工作

    通讯作者:

    王英宝,E-mail:944450200@qq.com

  • 中图分类号: R742.5

Propofol Regulates MPP+-induced Mitochondrial Oxidative Stress and Apoptosis in SH-SY5Y Cells

  • 摘要:   目的   探讨不同浓度的丙泊酚(propofol,PPF)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的帕金森(Parkinson's disease, PD)模型细胞氧化应激和凋亡的作用。  方法   利用1 mM MPP+诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y构建PD细胞模型。PPF处理组分别用10、20、40、80 μM PPF在MPP+诱导前刺激SH-SY5Y细胞4 h。细胞计数法(cell counting kit-8,CCK-8)评估细胞增殖活力。2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCF-DA)荧光探针用于检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)。试剂盒分别检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NADPH)氧化酶的水平。Western blot用于检测线粒体和细胞质中细胞色素c的蛋白表达以及细胞中Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达。流式细胞术分析细胞凋亡率。  结果   MPP+诱导明显抑制SH-SY5Y细胞的增殖(P < 0.001),促进细胞中ROS(P < 0.001)、MDA(P < 0.001)、NADPH氧化酶(P < 0.01)、细胞质中细胞色素c的表达(P < 0.01)并诱导细胞凋亡(P < 0.001)以及促凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3的表达(P < 0.01),减少线粒体中细胞色素c的蛋白表达(P < 0.01)和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P < 0.01)。PPF预处理可缓解MPP+诱导引起的SH-SY5Y细胞增殖抑制以及氧化应激和凋亡的促进作用(P < 0.001),且40 μM和80 μM对细胞的作用更为显著。  结论   PPF预处理可缓解MMP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激,减少细胞凋亡。
  • 图  1  MPP+诱导对SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激的作用

    A:MPP+诱导对SH-SY5Y细胞增殖活力的作用;B:荧光探针检测ROS水平;C:ROS水平统计;D:试剂盒检测MDA水平;E:试剂盒检测NADPH氧化酶水平;与NC组比较,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  1.  Effect of MPP+ induction on mitochondrial oxidative stress in SH-SY5Y cells

    图  2  MPP+诱导对SH-SY5Y细胞中细胞色素C和细胞凋亡的影响

    A:Western blot用于检测细胞色素c的蛋白表达;B:细胞色素c蛋白表达统计;C:细胞凋亡检测;D:细胞凋亡率统计;E:Western blot检测凋亡相关蛋白表达;F:凋亡相关蛋白表达统计;与NC组相比,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  2.  Effect of MPP+ induction on cytochrome c and cell apoptosis in SH-SY5Y cells

    图  3  PPF调控MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激

    A:不同浓度PPF对SH-SY5Y细胞增殖活力的作用;B:ROS荧光强度统计;C:荧光探针检测不同浓度PPF对ROS水平的影响;D:不同浓度PPF对细胞中MDA浓度的影响;E:不同浓度PPF对细胞中NADPH氧化酶浓度的影响;与MPP+组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  3.  PPF regulated MPP+-induced mitochondrial oxidative stress in SH-SY5Y cells

    图  4  PPF调控MPP+诱导的SH-SY5Y细胞中细胞色素c和细胞凋亡

    A:Western blot检测线粒体及细胞质中细胞色素c的蛋白表达;B:细胞色素c蛋白表达统计;C:细胞凋亡率检测;D:细胞凋亡率统计;E:Western blot检测凋亡相关蛋白表达;F:凋亡相关蛋白表达统计;与MPP+组比较,**P < 0.01,***P < 0.001。

    Figure  4.  PPF regulated MPP+-induced cytochrome c and cell apoptosis in SH-SY5Y cells

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出版历程
  • 收稿日期:  2023-12-25
  • 网络出版日期:  2024-03-11
  • 刊出日期:  2024-03-30

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