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TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响

刘红明 陈志松 邹立芳 杨智雄 喻卓 胡伟

刘红明, 陈志松, 邹立芳, 杨智雄, 喻卓, 胡伟. TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(6): 15-21. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240603
引用本文: 刘红明, 陈志松, 邹立芳, 杨智雄, 喻卓, 胡伟. TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2024, 45(6): 15-21. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240603
Hongming LIU, Zhisong CHEN, Lifang ZOU, Zhixiong YANG, Zhuo YU, Wei HU. Exploring the Effect of TRPC1 and BK-α expression on Diabetic Nephropathy[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(6): 15-21. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240603
Citation: Hongming LIU, Zhisong CHEN, Lifang ZOU, Zhixiong YANG, Zhuo YU, Wei HU. Exploring the Effect of TRPC1 and BK-α expression on Diabetic Nephropathy[J]. Journal of Kunming Medical University, 2024, 45(6): 15-21. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240603

TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240603
基金项目: 云南省科技厅基础研究计划基金资助项目(202001AY070001-184);云南省心脑血管临床医学研究中心子课题基金资助项目(ZX2019-03-01);云南省放射与治疗临床医学研究中心子课题基金资助项目(202102AA100067)。
详细信息
    作者简介:

    刘红明(1973~),男,湖北随州人,医学硕士,副主任医师,主要从事冠心病介入和先心病介入的临床及科研工作

    通讯作者:

    喻卓,E-mail:13987190577@163.com

    胡伟,E-mail:2205577459@qq.com

  • 中图分类号: R361.2

Exploring the Effect of TRPC1 and BK-α expression on Diabetic Nephropathy

  • 摘要:   目的   探究瞬时受体电位C1(transient receptor potential channel 1,TRPC1)蛋白和大电导钙离子激活钾通道α亚单位(large conductance Ca2+-activated K+channel α subunit,BK-α)蛋白对大鼠糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的影响。  方法   将SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。利用高脂饲料和链脲佐菌素(streptozocin,STZ)构建DKD模型。采用血糖分析仪检测大鼠血糖变化;采用全自动生化分析仪检测大鼠肾功能水平;HE染色检测肾组织的病理变化以确定造模成功。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分别检测肾组织TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白表达水平;免疫组化检测TRPC1和BK-α的分布和表达情况。  结果   模型组大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr)均显著高于对照组(P < 0.01);模型组大鼠肾小管内壁细胞出现膨胀现象,部分细胞脱离;可见肾小管发生病变或死亡;此外,在许多肾小管及肾间质区域发现有中性白细胞及其残骸;以上HE染色结果提示,DKD模型复制成功。TRPC1和BK-α在肾小球部位最为丰富,且模型组大鼠肾组织中TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白水平都显著高于对照组(P < 0.05)。  结论  大鼠糖尿病肾病影响TRPC1和BK-α在肾组织中的分布和表达。
  • 图  1  各组大鼠肾组织HE染色(100×)

    Figure  1.  HE staining of renal tissue in each group of rats (100×)

    图  2  各组大鼠肾组织TRPC1与BK-α蛋白表达水平(100×)[($ \bar x \pm s $),n=15]

    A:大鼠骨组织肾组织中TRPC1与BK-α蛋白表达;B:BTRPC1与BK-α表达阳性面积统计学分析。与对照组比较,***P < 0.001。

    Figure  2.  Protein expression level of TRPC1 and BK-α in renal tissue of rats in each group [($ \bar x \pm s $),n=15]

    图  3  各组大鼠肾组织中的TRPC1与BK-α的mRNA表达[($ \bar x \pm s $),n=15]

    A:大鼠肾组织中TRPC1的mRNA表达;B:大鼠肾组织中BK-α的mRNA表达。与对照组比较,*P < 0.05、**P < 0.01。

    Figure  3.  mRNA expression levels of TRPC1 and BK-α in renal tissue of rats [($ \bar x \pm s $),n=15]

    图  4  各组大鼠肾组织中的TRPC1与BK-α蛋白表达水平[($ \bar x \pm s $),n=15]

    A:TRPC1与BK-α的蛋白表达电泳图;B:TRPC1与BK-α的统计学分析($ \bar x \pm s $,n=15) ;与对照组比较,*P < 0.05。

    Figure  4.  Protein expression levels of TRPC1 and BK-α in renal tissue of rats [($ \bar x \pm s $),n=15]

    表  1  高糖高脂饲料配料表(%)

    Table  1.   Ingredients of High Sugar and High Fat Feed (%)

    成分 添加比例
    猪油 10.0
    胆固醇 2.5
    蔗糖 20.0
    胆酸盐 1.0
    常规饲料 66.5
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    表  2  TRPC1和BK-α引物序列信息

    Table  2.   TRPC1 and BK-α primer sequence information

    Gene Sequence(5′→3′) Length(bp)
    BK-α TTGAAGATGAGCAACCGCCA 20
    TCATGCCTCATCAGCTTCGG 20
    TRPC1 CGTTCTGAGTTACCTTCGGCT 21
    AGCTGTGTCAGTCCAATCGT 20
    GAPDH GTGGAGTCTACTGGCGTCTT 20
    TGCTGACAATCTTGAGGGA 19
    下载: 导出CSV

    表  3  不同组大鼠的理化指标比较[($ \bar x \pm s $),n=15]

    Table  3.   Comparison of physical and chemical indicators of different groups of rats [($ \bar x \pm s $),n=15]

    组别空腹血糖
    (FPG,mmol/L)
    尿白蛋白排泄率
    (UAER,mg/24 h)
    血尿素氮
    (BUN,mmol/L)
    肌酐
    (Cr,μmol/L)
    对照组5.968 ± 1.3611.09 ± 0.916.403 ± 0.634.028 ± 1.29
    模型组21.61 ± 2.5233.01 ± 1.6226.36 ± 1.3819.85 ± 1.61
    t3.2612.4854.0693.012
    P0.003**0.012**<0.001**0.009**
      与对照组比较,**P < 0.01。
    下载: 导出CSV
  • [1] Guan Z,Li H,Liu R,et al. Artificial intelligence in diabetes management: Advancements,opportunities,and challenges[J]. Cell Rep Med,2023,4(10):101213. doi: 10.1016/j.xcrm.2023.101213
    [2] Sun H,Saeedi P,Karuranga S,et al. IDF diamonds atlas: Global,regional and country-level diabetes prevalence estimates for 2021 and projects for 2045[J]. Diabetes Res Clin Pract,2021,183:109119.
    [3] Reutens A T. Epidemiology of diabetic kidney disease[J]. Med Clin North Am,2013,97(1):1-18. doi: 10.1016/j.mcna.2012.10.001
    [4] Nathan D M. Diabetes: advantages in diagnosis and treatment[J]. JAMA,2015,314(10):1052-1062. doi: 10.1001/jama.2015.9536
    [5] Moraes R D A,Webb R C,Silva D F. Vascular dysfunction in diabetes and obesity: Focus on TRP channels[J]. Front Physiol,2021,12(5):1-23.
    [6] Qian L L,Liu X Y,Yu Z M,et al. BK channel dysfunction in diabetic coronary artery: Role of the E3 ubiquitin ligases[J]. Front Physiol,2020,11(5):1-7.
    [7] Ma R,Pluznick J L,Sansom S C. Ion channels in mesangial cells: Functio,malfunction,or fiction[J]. Physiology,2005,20(4):102-111.
    [8] Dopico A M,Bukiya A N,Jaggar J H. Calcium and voltagegated BK channels in vascular smooth muscle[J]. Pflugers Arch,2018,470(9):1271-1289. doi: 10.1007/s00424-018-2151-y
    [9] Toth P,Csiszar A,Tucsek Z,et al. Role of 20-HETE,TRPC channels,and BKCa in dysregulation of pressure-induced Ca2+ signaling and myogenic constriction of cerebral arteries in aged hypertensive mice [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol,2013,305(12): 698-708.
    [10] Saskia P,JÖRG F,Michaei F. Mice with disrupted BK channel β1 subunit gene feature abnormal Ca2+ spark/STOC coupling and elevated blood pressure [J]. Circ Res,2000,87(11): E53-60.
    [11] Dryer S E,Reise J. TRPC6 channels and their binding partners in podocytes: role inglomerular filtration and pathophysiology[J]. Am J Physiol Renal Physiol,2010,299(4):F689-70134. doi: 10.1152/ajprenal.00298.2010
    [12] Kim B Y,Choi K J,Dryer S E. Nephrin binds to the COOH terminus of a large-conductance Cat-activated K+ channel isoform and regulates its expression on thecell surface[J]. Am J Physiol Renal Physiol,2008,295(1):F235-246. doi: 10.1152/ajprenal.00140.2008
    [13] Qian L,Liu X,Wang R,et al. Role of BK(Ca) channels in diabetic vascular complications[J]. Chin Med J,2014,127(9):1775-1781. doi: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.20132503
    [14] Mysiewicz S C,Hawks S M,Bukiya A N,et al. Differential functional contribution of BK channel subunits to aldosterone-induced channel activation in vascular smooth muscle and eventual cerebral artery dilation[J]. International Journal of Molecular Sciences,2023,24(10):8704. doi: 10.3390/ijms24108704
    [15] 宋阿会,刘英莉. BK通道在肾脏钾离子代谢中的作用[J]. 国际泌尿系统杂志,2018,38(4):692-695. doi: 10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2018.04.048
    [16] Wang R X,Shi H F,Chai Q,et al. Molecular mechanisms of diabetic coronary dysfunction due to large conductance Ca2+-activated K+ channel impairment[J]. Chin Med J,2012,125(4):2548-2555.
    [17] Wen J,Cheng J,LI P Y,et al. Changes of large conductance Ca2+-activated K+ channel impairment of mesenteric artery smooth muscle cells in disbetic patient[J]. Chongqing Med,2014,43(18):2312-2315.
  • [1] 刘孟雪, 缪佳, 盛雪鹤.  血UA、Smad1蛋白、尿mALB含量与2型糖尿病肾病患者达格列净治疗效果的相关性分析, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240425
    [2] 周琼, 彭葆坤, 翁晓春, 菊珍, 孙诺批楚, 唐哲.  德钦藏族初诊断2型糖尿病临床特点及糖化血红蛋白影响因素, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210819
    [3] 阮愕舒, 王烁, 苏惠, 尹凤琼, 钱忠义, 杨建宇.  人参皂苷Rg1对2型糖尿病大鼠的肾脏保护作用, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210625
    [4] 郭欣, 赖薇, 李艳华, 陈韵如, 叶傲然, 唐顺松, 罗静.  磷脂酶Cε1在1型糖尿病大鼠病理性神经痛中的作用初探, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210206
    [5] 曾怡, 廖云娟, 李颖, 何振坤.  达格列净治疗早期糖尿病肾病的疗效及对血清MCP-1、IL-6水平的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20211218
    [6] 李诗雨, 杜士刚, 赵玲, 杨璐, 陈珮琪, 戴雨如, 柯亭羽.  TIR 与糖尿病蛋白尿相关性的临床观察, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20211214
    [7] 向茜, 李万碧, 张弦, 刘华, 王玉明, 杨才, 白云霞.  维生素D受体基因ApaⅠ、BsmⅠ位点单核苷酸多态性与2型糖尿病肾病的相关性, 昆明医科大学学报.
    [8] 念馨.  金属硫蛋白基因G-201A多态性在2型糖尿病及原发性高血压的分布差异性, 昆明医科大学学报.
    [9] 向茜.  维生素D受体基因FokI位点单核苷酸多态性与糖尿病肾病的相关性, 昆明医科大学学报.
    [10] 王祥芸.  牙周基础治疗对2型糖尿病伴牙周炎与超敏C-反应蛋白的影响, 昆明医科大学学报.
    [11] 王兴宁.  尿微量白蛋白与肌酐比值在2型糖尿病早期肾损伤中的应用, 昆明医科大学学报.
    [12] 熊煜欣.  STZ小剂量多次与大剂量单次腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型的研究, 昆明医科大学学报.
    [13] 杜兴华.  血清胱抑素C和血清肌酐、尿素在糖尿病肾病早期诊断中的应用价值, 昆明医科大学学报.
    [14] 陈孝红.  2型糖尿病肾病患者血清PEDF、CRP、IL-6水平与尿白蛋白排泄率相关性分析, 昆明医科大学学报.
    [15] 卢房利.  β-catenin与视黄醇结合蛋白对糖尿病肾病的诊断价值, 昆明医科大学学报.
    [16] 王少云.  糖尿病皮肤缺损愈合进程中单核细胞趋化蛋白-1表达的研究, 昆明医科大学学报.
    [17] 唐丽丽.  GLP-1与2型糖尿病及糖尿病肾病的相关性研究, 昆明医科大学学报.
    [18] 老年2型糖尿病、糖耐量异常、空腹血糖受损患者血小板膜糖蛋白PAC-1和CD62P的研究, 昆明医科大学学报.
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出版历程
  • 收稿日期:  2023-09-23
  • 网络出版日期:  2024-05-23
  • 刊出日期:  2024-06-25

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