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内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

袁伟 孟明耀 李欣欣 熊晶晶 李檬 曹佳 刘梅 侯宗柳 黄永坤

袁伟, 孟明耀, 李欣欣, 熊晶晶, 李檬, 曹佳, 刘梅, 侯宗柳, 黄永坤. 内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
引用本文: 袁伟, 孟明耀, 李欣欣, 熊晶晶, 李檬, 曹佳, 刘梅, 侯宗柳, 黄永坤. 内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
Wei YUAN, Mingyao MENG, Xinxin LI, Jingjing XIONG, Meng LI, Jia CAO, Mei LIU, Zongliu HOU, Yongkun HUANG. Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
Citation: Wei YUAN, Mingyao MENG, Xinxin LI, Jingjing XIONG, Meng LI, Jia CAO, Mei LIU, Zongliu HOU, Yongkun HUANG. Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928

内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
基金项目: 云南省检验医学重点实验室开放课题基金资助项目(2017DG005)
详细信息
    作者简介:

    袁伟(1994~),女,云南文山人,在读硕士研究生,主要从事儿科学专业研究工作

    孟明耀与袁伟对本文有同等贡献

    通讯作者:

    侯宗柳,E-mail:hzl579@163.com

    黄永坤 ,E-mail:hykkmyncnwd@163.com

  • 中图分类号: R329.2+4

Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells

  • 摘要:   目的  探讨内毒素(Endotoxin),又称为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的量效和时效对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖的影响。  方法  用含不同浓度LPS(0.098、0.195、0.39、0.78、1.56、3.12、6.25、12.5、25和50 EU/mL)的干细胞培养基培养hUC-MSCs,采用CCK-8增殖实验检测24h、48h和72 h的细胞增殖情况。确定促进hUC-MSCs增殖的低浓度(0.098 EU/mL)、中浓度(1.56 EU/mL)和高浓度(25 EU/mL)LPS,选择作用时间72 h,进一步用流式细胞术明确LPS对hUC-MSCs增殖的影响。  结果  CCK-8检测结果提示,作用24 h、48 h时,表现为抑制hUC-MSCs的增殖。作用72 h时,表现为促进细胞增殖,且低浓度区域促进作用最显著,浓度增加其促增殖作用相对减弱。流式细胞术结果提示低浓度LPS组G0/G1期的占比降低,S期和G2/M期占比增高。  结论  LPS的量效和时效对hUC-MSCs的增殖表现出不同的效应,适宜的LPS浓度及作用时间有利于hUC-MSCs的增殖。
  • 图  1  不同浓度及不同作用时间的内毒素对hUC-MSCs增殖的影响

    A:LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs增殖情况;B:不同浓度LPS作用24 h hUC-MSCs增殖情况;C:不同浓度LPS作用48 h hUC-MSCs增殖情况;D:不同浓度LPS作用72 h hUC-MSCs增殖情况。与对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001。

    Figure  1.  Effects of endotoxin with different concentrations and different time on the proliferation of hUC-MSCs

    图  2  LPS刺激后流式细胞技术检测hUC-MSCs细胞周期代表图例

    A:不含LPS的对照组;B:LPS终浓度为0.098 EU/mL;C:LPS终浓度为1.56 EU/mL;D:LPS终浓度为25 EU/mL。

    Figure  2.  Cell cycle of hUC-MSCs tested by flow cytometry after LPS stimulation

    图  3  不同浓度LPS作用72 h时hUC-MSCs细胞周期比例

    与对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001。

    Figure  3.  Proportion of hUC-MSCs cell cycle after 72 h of LPS with different concentrations

    表  1  LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs吸光度(A)值($ \bar x \pm s $

    Table  1.   Absorbance (A) of hUC-MSCs at different dose-response and time-dependent of LPS ($ \bar x \pm s $

    组别hUC-MSCs增殖
    24 h48 h72 h
    实验组1 0.571 ± 0.015* 0.811 ± 0.001* 1.321 ± 0.013*
    实验组2 0.540 ± 0.025* 0.897 ± 0.030 1.346 ± 0.009*
    实验组3 0.535 ± 0.002* 0.858 ± 0.011* 1.263 ± 0.026*
    实验组4 0.433 ± 0.030* 0.871 ± 0.008 1.129 ± 0.003*
    实验组5 0.552 ± 0.003* 0.865 ± 0.010* 1.037 ± 0.018*
    实验组6 0.554 ± 0.003* 0.861 ± 0.020* 1.145 ± 0.038*
    实验组7 0.547 ± 0.008* 0.865 ± 0.028* 1.018 ± 0.038*
    实验组8 0.593 ± 0.005* 0.870 ± 0.012 1.049 ± 0.011*
    实验组9 0.630 ± 0.003 0.853 ± 0.041* 1.063 ± 0.034*
    实验组10 0.639 ± 0.007 0.933 ± 0.012 0.927 ± 0.027
    对照组 0.660 ± 0.004 0.940 ± 0.020 0.906 ± 0.012
      注:实验组1至10LPS终浓度依次为:0.098、0.195 、0.39 、0.78 、1.56 、3.12 、6.25 、12.5、25、50 EU/mL,表示分别在24 h、48 h、72 h时,与对照组相比,*P < 0.05。
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    表  2  LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs增殖率(%)

    Table  2.   Proliferation rates of hUC-MSCs at different dose-response and time-dependent of LPS (%)

    时间组1组2组3组4组5组6组7组8组9组10对照组
    24 h 86.46 81.82 81.11 65.61 83.69 83.99 82.88 89.8 95.45 96.82 100.05
    48 h 86.24 95.43 91.31 92.7 91.99 91.56 92.06 92.55 90.74 99.26 100
    72 h 145.81 148.53 139.37 124.61 114.5 126.34 112.36 115.75 117.29 102.32 100
      注:实验组1至10LPS终浓度依次为:0.098、0.195 、0.39 、0.78 、1.56 、3.12 、6.25 、12.5、25、50 EU/mL。
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    表  3  LPS对hUC-MSCs细胞周期的影响(%)

    Table  3.   Effect of LPS on huc-Mscs cell cycle (%)

    分期实验组1实验组2实验组3对照组
    G0/G1期 94.240 ± 0.450* 96.210 ± 0.323* 96.330 ± 0.254* 97.550 ± 0.300
    S期 2.880 ± 0.144* 3.310 ± 0.144* 3.060 ± 0.121* 1.900 ± 0.110
    G2/M期 2.880 ± 0.248* 0.480 ± 0.064 0.610 ± 0.075 0.550 ± 0.075
      注:实验组1、2、3的LPS终浓度分别为0.098 EU/mL、1.56 EU/mL、25 EU/mL,对照组不含LPS;与对照组相比,*P < 0.05。
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-06-23
  • 网络出版日期:  2022-09-07
  • 刊出日期:  2022-09-29

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