留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

袁伟 孟明耀 李欣欣 熊晶晶 李檬 曹佳 刘梅 侯宗柳 黄永坤

袁伟, 孟明耀, 李欣欣, 熊晶晶, 李檬, 曹佳, 刘梅, 侯宗柳, 黄永坤. 内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
引用本文: 袁伟, 孟明耀, 李欣欣, 熊晶晶, 李檬, 曹佳, 刘梅, 侯宗柳, 黄永坤. 内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响[J]. 昆明医科大学学报, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
Wei YUAN, Mingyao MENG, Xinxin LI, Jingjing XIONG, Meng LI, Jia CAO, Mei LIU, Zongliu HOU, Yongkun HUANG. Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
Citation: Wei YUAN, Mingyao MENG, Xinxin LI, Jingjing XIONG, Meng LI, Jia CAO, Mei LIU, Zongliu HOU, Yongkun HUANG. Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells[J]. Journal of Kunming Medical University, 2022, 43(9): 7-12. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928

内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220928
基金项目: 云南省检验医学重点实验室开放课题基金资助项目(2017DG005)
详细信息
    作者简介:

    袁伟(1994~),女,云南文山人,在读硕士研究生,主要从事儿科学专业研究工作

    孟明耀与袁伟对本文有同等贡献

    通讯作者:

    侯宗柳,E-mail:hzl579@163.com

    黄永坤 ,E-mail:hykkmyncnwd@163.com

  • 中图分类号: R329.2+4

Effects of Dose-response and Time-dependent of Endotoxin on Proliferation of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells

  • 摘要:   目的  探讨内毒素(Endotoxin),又称为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的量效和时效对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖的影响。  方法  用含不同浓度LPS(0.098、0.195、0.39、0.78、1.56、3.12、6.25、12.5、25和50 EU/mL)的干细胞培养基培养hUC-MSCs,采用CCK-8增殖实验检测24h、48h和72 h的细胞增殖情况。确定促进hUC-MSCs增殖的低浓度(0.098 EU/mL)、中浓度(1.56 EU/mL)和高浓度(25 EU/mL)LPS,选择作用时间72 h,进一步用流式细胞术明确LPS对hUC-MSCs增殖的影响。  结果  CCK-8检测结果提示,作用24 h、48 h时,表现为抑制hUC-MSCs的增殖。作用72 h时,表现为促进细胞增殖,且低浓度区域促进作用最显著,浓度增加其促增殖作用相对减弱。流式细胞术结果提示低浓度LPS组G0/G1期的占比降低,S期和G2/M期占比增高。  结论  LPS的量效和时效对hUC-MSCs的增殖表现出不同的效应,适宜的LPS浓度及作用时间有利于hUC-MSCs的增殖。
  • 图  1  不同浓度及不同作用时间的内毒素对hUC-MSCs增殖的影响

    A:LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs增殖情况;B:不同浓度LPS作用24 h hUC-MSCs增殖情况;C:不同浓度LPS作用48 h hUC-MSCs增殖情况;D:不同浓度LPS作用72 h hUC-MSCs增殖情况。与对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001。

    Figure  1.  Effects of endotoxin with different concentrations and different time on the proliferation of hUC-MSCs

    图  2  LPS刺激后流式细胞技术检测hUC-MSCs细胞周期代表图例

    A:不含LPS的对照组;B:LPS终浓度为0.098 EU/mL;C:LPS终浓度为1.56 EU/mL;D:LPS终浓度为25 EU/mL。

    Figure  2.  Cell cycle of hUC-MSCs tested by flow cytometry after LPS stimulation

    图  3  不同浓度LPS作用72 h时hUC-MSCs细胞周期比例

    与对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001。

    Figure  3.  Proportion of hUC-MSCs cell cycle after 72 h of LPS with different concentrations

    表  1  LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs吸光度(A)值($ \bar x \pm s $

    Table  1.   Absorbance (A) of hUC-MSCs at different dose-response and time-dependent of LPS ($ \bar x \pm s $

    组别hUC-MSCs增殖
    24 h48 h72 h
    实验组1 0.571 ± 0.015* 0.811 ± 0.001* 1.321 ± 0.013*
    实验组2 0.540 ± 0.025* 0.897 ± 0.030 1.346 ± 0.009*
    实验组3 0.535 ± 0.002* 0.858 ± 0.011* 1.263 ± 0.026*
    实验组4 0.433 ± 0.030* 0.871 ± 0.008 1.129 ± 0.003*
    实验组5 0.552 ± 0.003* 0.865 ± 0.010* 1.037 ± 0.018*
    实验组6 0.554 ± 0.003* 0.861 ± 0.020* 1.145 ± 0.038*
    实验组7 0.547 ± 0.008* 0.865 ± 0.028* 1.018 ± 0.038*
    实验组8 0.593 ± 0.005* 0.870 ± 0.012 1.049 ± 0.011*
    实验组9 0.630 ± 0.003 0.853 ± 0.041* 1.063 ± 0.034*
    实验组10 0.639 ± 0.007 0.933 ± 0.012 0.927 ± 0.027
    对照组 0.660 ± 0.004 0.940 ± 0.020 0.906 ± 0.012
      注:实验组1至10LPS终浓度依次为:0.098、0.195 、0.39 、0.78 、1.56 、3.12 、6.25 、12.5、25、50 EU/mL,表示分别在24 h、48 h、72 h时,与对照组相比,*P < 0.05。
    下载: 导出CSV

    表  2  LPS不同浓度及不同作用时间hUC-MSCs增殖率(%)

    Table  2.   Proliferation rates of hUC-MSCs at different dose-response and time-dependent of LPS (%)

    时间组1组2组3组4组5组6组7组8组9组10对照组
    24 h 86.46 81.82 81.11 65.61 83.69 83.99 82.88 89.8 95.45 96.82 100.05
    48 h 86.24 95.43 91.31 92.7 91.99 91.56 92.06 92.55 90.74 99.26 100
    72 h 145.81 148.53 139.37 124.61 114.5 126.34 112.36 115.75 117.29 102.32 100
      注:实验组1至10LPS终浓度依次为:0.098、0.195 、0.39 、0.78 、1.56 、3.12 、6.25 、12.5、25、50 EU/mL。
    下载: 导出CSV

    表  3  LPS对hUC-MSCs细胞周期的影响(%)

    Table  3.   Effect of LPS on huc-Mscs cell cycle (%)

    分期实验组1实验组2实验组3对照组
    G0/G1期 94.240 ± 0.450* 96.210 ± 0.323* 96.330 ± 0.254* 97.550 ± 0.300
    S期 2.880 ± 0.144* 3.310 ± 0.144* 3.060 ± 0.121* 1.900 ± 0.110
    G2/M期 2.880 ± 0.248* 0.480 ± 0.064 0.610 ± 0.075 0.550 ± 0.075
      注:实验组1、2、3的LPS终浓度分别为0.098 EU/mL、1.56 EU/mL、25 EU/mL,对照组不含LPS;与对照组相比,*P < 0.05。
    下载: 导出CSV
  • [1] Lou S,Duan Y,Nie H,et al. Mesenchymal stem cells:Biological characteristics and application in disease therapy[J]. Biochimie,2021,185(3):9-21.
    [2] Yi X,Liu F,Chen F,et al. Comparison of biological characteristics of placenta mesenchymal stem cells derived from fetus[J]. Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(3):1183-1196.
    [3] Qin Z,Hua S,Chen H,et al. Parathyroid hormone promotes the osteogenesis of lipopolysaccharide-induced human bone marrow mesenchymal stem cells through the JNK MAPK pathway[J]. Bioscience Reports,2021,41(8):BSR20210420. doi: 10.1042/BSR20210420
    [4] Qi T,Weng J,Yu F,et al. Insights into the role of magnesium ions in affecting osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells[J]. Biological Trace Element Research,2021,199(2):559-567. doi: 10.1007/s12011-020-02183-y
    [5] Bagge J,Macleod J N,Berg L C. Cellular proliferation of equine bone marrow and adipose tissue-derived mesenchymal stem cells decline with increasing donor age[J]. Frontiers in Veterinary Science,2020,7(10):602403.
    [6] 高方媛,王宪波. 肠源性内毒素血症在肝衰竭发生发展中的作用[J]. 临床肝胆病杂志,2014,30(8):825-828.
    [7] Wang X,Ni J,You Y,et al. SNX10-mediated LPS sensing causes intestinal barrier dysfunction via a caspase-5-dependent signaling cascade[J]. The EMBO Journal,2021,40(24):e108080.
    [8] 丁晨. 脂多糖对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响及其相关机制的研究[D]. 上海: 第二军医大学硕士学位论文, 2017.
    [9] Camilleri M,Madsen K,Spiller R,et al. Intestinal barrier function in health and gastrointestinal disease:Intestinal barrier function[J]. Neurogastroenterology & Motility,2012,24(6):503-512.
    [10] Neves A L,Coelho J,Couto L,et al. Metabolic endotoxemia:A molecular link between obesity and cardiovascular risk[J]. Journal of Molecular Endocrinology,2013,51(2):51-64. doi: 10.1530/JME-13-0079
    [11] Mulak A,Bonaz B. Brain-gut-microbiota axis in Parkinson’s disease[J]. World Journal of Gastroenterology,2015,21(37):10609-10620. doi: 10.3748/wjg.v21.i37.10609
    [12] 侯玉森,柴家科,刘玲英,等. 脂多糖预处理对人脐带间充质干细胞内毒素耐受的影响[J]. 中华医学杂志,2014,94(12):948-951. doi: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.12.018
    [13] 梁力建,李绍强. 缺血预处理对肝硬化肝癌患者入肝血流阻断肝切除的保护作用及其机理探讨[J]. 中华外科杂志,2002,40(4):28-30.
    [14] 朱路文,叶涛,姜云飞,等. 电针预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎性因子及细胞凋亡的影响[J]. 中国康复理论与实践,2016,22(7):765-768. doi: 10.3969/j.issn.1006-9771.2016.07.005
    [15] 陈裕洁,龚楚链,谭芳,等. 右美托咪啶预处理对脓毒症肾损伤大鼠炎性因子和氧化应激的影响[J]. 南方医科大学学报,2015,35(10):1472-1475,1491. doi: 10.3969/j.issn.1673-4254.2015.10.20
    [16] 李晓泓,张露芬,解秸萍,等. 艾灸预处理对佐剂性关节炎大鼠下丘脑HSP70的影响及保护机制研究[J]. 北京中医药大学学报,2005,28(4):86-89. doi: 10.3321/j.issn:1006-2157.2005.04.027
    [17] Pipicz M,Kocsis G F,Sarvary-arantes L,et al. Low-dose endotoxin induces late preconditioning,increases peroxynitrite formation,and activates STAT3 in the rat heart[J]. Molecules (Basel,Switzerland),2017,22(3):E433. doi: 10.3390/molecules22030433
    [18] Yuan G,Yu Y,Ji L,et al. Down-regulated receptor interacting protein 140 is involved in lipopolysaccharide-preconditioning-induced inactivation of kupffer cells and attenuation of hepatic ischemia reperfusion injury[J]. PloS One,2016,11(10):e0164217. doi: 10.1371/journal.pone.0164217
    [19] Garcia-bonilla L,Brea D,Benakis C,et al. Endogenous protection from ischemic brain injury by preconditioned monocytes[J]. The Journal of Neuroscience:The Official Journal of the Society for Neuroscience,2018,38(30):6722-6736. doi: 10.1523/JNEUROSCI.0324-18.2018
    [20] 侯婧瑛,于萌蕾,郭天柱,等. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究,2021,25(7):985-990. doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2160
    [21] 王婕,余丽梅. 炎症因子干预影响间充质干细胞的免疫调控特性[J]. 中国组织工程研究,2020,24(13):2108-2113. doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2054
    [22] 王迪生,孔刘莎,王佳,等. 红细胞生成素预处理脂肪间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病肾病[J]. 中国组织工程研究,2019,23(9):1370-1376. doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1601
    [23] 曲铁兵. 川芎嗪预处理促进骨髓间充质干细胞迁移的体外研究[D]. 杭州: 浙江中医药大学硕士学位论文, 2014.
  • [1] 邓勇军, 陈倩, 邹建彬, 宫政, 刘焕鹏.  ZIC1基因过表达激活P53信号通路抑制胸膜间皮瘤细胞增殖, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20240405
    [2] 李婷, 郭维华.  糖酵解重编程在口腔鳞状细胞癌中的研究进展, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230611
    [3] 王惠, 曾文珺, 张海萍, 郭瑞威.  钙库操纵型钙通道Orai3分子对冠状动脉血管平滑肌细胞增殖的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230423
    [4] 梁彩红, 孟明耀, 李欣欣, 熊晶晶, 李檬, 刘梅, 侯宗柳, 黄永坤.  肠道菌群代谢物脱氧胆酸对人脐带间充质干细胞hUC-MSCs增殖及细胞周期的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20230402
    [5] 钱石兵, 孟明耀, 于鸿滨, 段开文, 李昌全, 夏志刚.  三七总皂苷对人根尖牙乳头干细胞增殖的影响, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20221018
    [6] 王晓寒, 牟善茂, 郝翠芳, 任琳琳, 王敏, 赵彤.  富血小板血浆促进人子宫内膜间充质干细胞(EnMSCs)增殖的机制, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20220126
    [7] 全宇航, 王忠慧, 李珊珊, 刘光顺.  七氟烷抑制宣威肺癌XWLC-05细胞生物学行为, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20211202
    [8] 殷顺会, 周建忠, 李自良.  Tiger17促进口腔黏膜成纤维细胞的增殖和迁移, 昆明医科大学学报. doi: 10.12259/j.issn.2095-610X.S20210823
    [9] 李珊珊, 全宇航, 龚玲俐, 杨会, 浦劲宏, 王忠慧.  七氟烷对人骨肉瘤Saos2细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响, 昆明医科大学学报.
    [10] 古利明, 曾勇, 陈俊辉, 王福平, 郝应禄, 吴海鹰, 阮继银, 李燕皎, 陈云, 夏婧, 孙佳, 胡隽源, 李薇, 余从涛, 马朝霞, 钱传云, 胡敏.  人脐带间充质干细胞联合抗病毒等方法治疗新型冠状病毒肺炎, 昆明医科大学学报.
    [11] 谢环, 田洁, 黄娅芬.  shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响, 昆明医科大学学报.
    [12] 蒋红樱, 张曦, 张乐航, 曾怡, 彭文芳, 白彝华.  红细胞生成素干预间充质干细胞移植对慢性肾衰竭大鼠的影响, 昆明医科大学学报.
    [13] 张瑞鹏, 王辉, 戴毅, 张鸿, 李伟, 王小军, 高增战.  联合介入及自体外周血干细胞移植治疗下肢动脉缺血性疾病, 昆明医科大学学报.
    [14] 高红强, 刘静, 李志强, 王海雷, 陈刚, 李立.  MiR-199a-3p对大鼠肝细胞增殖的抑制作用, 昆明医科大学学报.
    [15] 唐帮丽.  脐带间充质干细胞移植治疗狼疮性肾炎的疗效与机制, 昆明医科大学学报.
    [16] 胡正雄.  TGF-β2和geneX对BrdU标记骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的作用, 昆明医科大学学报.
    [17] 袁勇.  适度低氧微环境对体外培养脑胶质瘤干细胞生长的影响, 昆明医科大学学报.
    [18] 张健.  盐霉素对人骨肉瘤MG-63细胞体外增殖和凋亡的影响, 昆明医科大学学报.
    [19] 赵瑜敏.  牙龈卟啉单胞菌对兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响, 昆明医科大学学报.
    [20] TRB3在同型半胱氨酸抑制内皮细胞增殖中的作用研究, 昆明医科大学学报.
  • 加载中
图(3) / 表(3)
计量
  • 文章访问数:  3348
  • HTML全文浏览量:  2170
  • PDF下载量:  30
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2022-06-23
  • 网络出版日期:  2022-09-07
  • 刊出日期:  2022-09-29

目录

    /

    返回文章
    返回